miRNA-19a对结肠癌LoVo细胞生物学特性影响的机制研究

目的探讨微小RNA(miRNA)-19a对结肠癌LoVo细胞生物学特性影响的可能机制。方法采用脂质体介导的转染方法将miRNA-19a模拟物转染到人结肠癌细胞系LoVo细胞;检测转染后miRNA-19a基因的表达;利用CCK8试剂盒检测细胞的增殖能力,TUNEL法检测细胞凋亡影响,细胞侵袭小室法检测细胞的体外侵袭力,RT-PCR和Western blot检测Hsp90/Akt信号通路的变化。结果转染miRNA-19a的结肠癌LoVo细胞,miRNA-19a表达上调,细胞体外增殖能力增强,细胞凋亡减少,细胞的侵袭力增强;细胞Hsp90和Akt的基因和蛋白表达升高。结论 miRNA-19a可通过上调Hsp90/Akt信号通路表达,促进LoVo细胞增殖,减少细胞凋亡,增强LoVo细胞的侵袭能力。

miRNA-19a对结肠癌细胞增殖活性的影响

目的探讨miRNA(miR)-19a对结肠癌Lo Vo细胞的影响。方法生物信息学软件预测miR-19a的靶基因,采用脂质体介导转染方法将miR-19a模拟物或抑制物转染到人结肠癌Lo Vo细胞;检测转染后miR-19a基因的表达;利用CCK8试剂盒检测细胞的增殖能力;流式细胞术检测miR-19a对细胞周期、细胞凋亡的影响;细胞侵袭小室法检测细胞的体外侵袭力。结果上调miRNA-19a表达,细胞体外增殖能力增强,细胞周期S期细胞数增多,细胞凋亡减少,细胞侵袭力增强;下调miRNA-19a表达,细胞体外增殖能力降低,细胞周期S期细胞数减少,细胞凋亡增加,细胞侵袭力降低。结论 miR-19a在结肠癌中可能扮演致癌基因的角色。

玫瑰花结法与流式细胞术在T细胞亚群检测的应用比较

目的探讨应用玫瑰花结法与流式细胞术检测T细胞亚群,比较两者科学性与实用性。方法分别通过玫瑰花结法及流式细胞仪检测160例健康人外周血中T细胞亚群变化情况,比较CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+水平、检测费用、检测时间。结果两种方法检测后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+水平比较无显著性差异(P>0.05),玫瑰花结法的检测时间、费用均明显少于流式细胞术,差异具有显著性(P<0.01)。结论与流式细胞术相比,玫瑰花结法检测T细胞亚群操作简单、快捷、准确率高,值得临床广泛应用。

白细胞介素12对耐药结核大鼠模型的影响

目的观察、评价白细胞介素12(IL-12)对耐药结核大鼠模型的脏器菌落变化和细胞因子水平的影响。方法将60只SD雌性大鼠经尾静脉感染结核分枝杆菌耐利福平株,每只10~6 CFU,制成耐药结核大鼠模型,随机分为对照组和IL-12组,每组30只。给予PBS或IL-12治疗7 d,ELISA法检测血清IFN-γ水平、流式细胞术行T细胞亚群检测和平板计数法测定器官菌落计数,观察治疗后生存率。结果 IL-12组大鼠1只死亡,肺、肝、脾菌落数分别为(254±98)×10~5、(5±2)×10~5和(16±4)×10~5 CFU/ml,IFN-γ(1125±378)pg/ml;PBS组10只死亡,肺、肝、脾菌落数分别为(682±304)×10~5、(28±17)×10~5和(108±35)×10~5 CFU/ml,IFN-γ(532±198)pg/ml,两组比较差异有显著性。淋巴细胞亚群测定显示IL-12促进Th1细胞反应,改变了Th1/Th2平衡,两组比较差异有显著性。结论 IL-12诱导IFN-γ产生,促进Th1细胞反应,改变了Th1/Th2平衡,对结核分枝杆菌感染大鼠产生保护效应。