自体脂肪源性干细胞联合无菌生物护创膜对慢性创面愈合的影响

目的评估自体脂肪源性干细胞(ADSCs)联合无菌生物护创膜对慢性创面愈合的作用。方法选取武警总医院收治的60例慢性创面患者,随机分为凡士林油纱组(A组)、无菌生物护创膜组(B组)、ADSCs联合无菌生物护创膜组(C组),每组20例。观察3组创面愈合情况、愈合时间及治疗后7、21、40d时的创面愈合率,治疗前、治疗7d、治疗14d时创面上皮基底层细胞增殖情况及治疗后50d创面上皮化情况,计数治疗前和治疗后7d创面上皮基底层新生微小血管密度(MVD)。结果与A、B组创面愈合情况比较,C组创周炎性反应轻,肉芽组织形成好,创缘上皮爬行速度快,且B组创面愈合情况好于A组。创面愈合时间A组>B组>C组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。3组治疗后各时间点创面愈合率、创面上皮基底层增殖细胞数、新生微小血管密度比较均为C组优于B组优于A组,差异有统计学意义(P<0.05),治疗后50d创面上皮化情况亦为C组优于B组优于A组。结论自体ADSCs联合无菌生物护创膜可明显改善慢性创面修复细胞的增殖状态,促进创面血管再生,改善创面局部生长环境,加速创面愈合。

体外扩增自体脂肪干细胞对空鼻综合征患者黏膜功能重建的临床研究

目的分析、评估采用自体脂肪干细胞（ASCs）重建空鼻综合征（ENS）患者鼻黏膜功能的可行性和有效性。方法选取2013年8月-2014年2月武警总医院收治的ENS患者5例,每例患者抽取自体脂肪组织15～20ml,于体外进行脂肪干细胞的分离、培养,扩增至第3代时进行细胞免疫表型、分化情况及遗传稳定性鉴定。对有鼻甲残留的ENS患者（n=3）,在鼻黏膜受损处进行ASCs注射移植,隔10日1次,共4次;对无鼻甲残留的ENS患者（n=2）,在鼻黏膜受损处进行ASCs注射移植3次后,抽取其自体单纯脂肪颗粒1～5ml,与第3～6代ASCs混合后行鼻内下鼻甲或中鼻甲成形术。治疗前和治疗后3、6、9个月行鼻内镜检查前后对比,SNOT-20问卷调查、鼻声阻力和鼻黏膜纤毛清除功能所得数据进行统计学分析。结果 2例无鼻甲残留ENS患者行第3～6代ASCs注射移植及3例有鼻甲残留的ENS患者行ASCs联合脂肪颗粒移植后3、6、9个月,鼻内镜检查显示鼻甲成形无明显吸收,鼻腔黏膜明显改善,SNOT-20评分亦明显改善,差异有统计学意义（P〈0.05）。与治疗前比较,5例患者鼻甲成形术后鼻声阻力和鼻黏膜纤毛清除功能无明显变化（P〉0.05）。结论采用脂肪干细胞联合自体脂肪移植行鼻甲成形术重建黏膜功能,可明显改善ENS患者的症状,且效果稳定,是一种新的有助于ENS黏膜修复的治疗方法。

体外诱导脂肪来源干细胞向黏膜上皮细胞分化的研究

目的探讨在体外诱导脂肪来源干细胞(ADSCs)分化为黏膜上皮细胞的可能性。方法获取成年人皮下脂肪组织,进行ADSCs的分离、培养,扩增至第三代进行细胞免疫表型、分化情况及遗传稳定性鉴定。分别采用含10%胎牛血清、8μg/L表皮生长因子(EGF)、10%胎牛血清+8μg/L EGF、10%胎牛血清+8μg/L EGF+30%成纤维细胞培养基、10%胎牛血清+30%成纤维细胞培养基的DMEM培养液进行培养,于培养前及培养后7、14d观察各组细胞的光镜特征,采用免疫组织化学染色检测特异性细胞表面标记物的表达以及Western blotting方法检测诱导前后ADSCs中CK-7、CK-14的蛋白表达水平。结果与未加EGF诱导剂培养组比较,经EGF诱导14d后多数ADSCs细胞形态、排列方式发生改变。CK-19免疫组化染色显示呈强阳性。Western blotting检测结果提示诱导后的黏膜上皮细胞特异性蛋白CK7、CK14呈高表达。结论 ADSCs在一定诱导条件下可向黏膜上皮样细胞分化。

人脂肪来源间充质干细胞的制备及其质量检验方法

目的研究人脂肪来源间充质干细胞(human adipose-derived stem cells,h ADSCs)的制备及其质量检验方法,为临床研究提供安全合格的干细胞。方法取50例人吸脂术抽取的脂肪,剪碎,用胰酶和胶原酶消化、分离、培养,并按照《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则》对其进行细胞形态、数量、活率、无菌、支原体、人源特定病毒及猪源病毒、内毒素、免疫抑制活性、分化能力、免疫表型等检测及染色体核型。结果 50例h ADSCs;细菌、内毒素检测阴性,无内外源致病菌;干细胞免疫表型检测CD90、CD105表达阳性,阳性率>95%,CD34、CD45和HLA-DR表达阴性,阳性率<2%;具有成骨、成脂分化潜能;能抑制异体淋巴细胞的增殖。间充质干细胞活性冻存前≥92%,冻存复苏后≥82%。结论按照本工艺及标准制备的h ADSCs符合质量控制标准,为同类干细胞制备及其检定过程标准化提供了试验依据。

肌骨超声引导下穿刺抽脓治疗乳腺脓肿67例

乳腺脓肿常见于哺乳期急性乳腺炎或者非哺乳期乳腺炎脓肿期,既往对于乳腺脓肿采取切开排脓的手术方式,对于哺乳期的患者,常常需要断奶以配合治疗,痛苦大,乳房瘢痕明显.肌骨超声传统上是指应用于肌肉骨骼系统的超声诊断技术,可以监测实时动态影像.用于介入性操作的引导,可以达到“可视化”操作,以提高穿刺成功率和达到诊治效果的目的.笔者对乳腺脓肿采取肌骨超声引导下穿刺抽脓的方法,取得了很好的效果.

《成批严重烧伤伤员的转运方案(2016版)》解读

近年来,爆炸、恐怖袭击事件频发,使成批烧伤作为一种特殊形式的急性、灾害性的创伤,成为当今社会亟待解决的问题。2016年8月,《成批严重烧伤伤员的转运方案(2016版)》首次发表于《中华烧伤杂志》。同年11月,本刊转发了该指南,并由相关专家对该指南撰写了解读。笔者现就该指南中的要点进行解读,旨在为相关临床诊治工作提供帮助和参考。

人脂肪来源间充质干细胞库的初步建立

目的探讨建立生物学性状稳定的人脂肪来源间充质干细胞(h ADSCs)库的可行性,旨在为组织工程种子细胞提供更多来源。方法对分离得到的h ADSCs采用液氮低温冻存,并在一定时间复苏培养,以流式细胞仪检测其表面抗原,在诱导培养基中对其进行成脂和成骨诱导培养,光镜下观察细胞形态,免疫组织化学方法检测成骨诱导的特异标志物碱性磷酸酶(ALP)的表达,观察h ADSCs在复苏前后的分化能力。结果从脂肪组织中分离培养扩增获得数目稳定的h ADSCs,经冻存并复苏后的h ADSCs形态和表面抗原保持不变,可继续扩增10代以上,倍增时间为48h。复苏后第2、第6、第10代h ADSCs均保持了较强的成脂及成骨分化能力。结论初步建立h ADSCs库,可为再生医学修复重建组织工程提供较好的种子细胞。

脂肪抽吸术两种麻醉药配方的麻醉效果比较

目的研究盐酸罗哌卡因在肿胀麻醉脂肪抽吸术中的应用效果。方法将盐酸罗哌卡因应用于肿胀液中,在肿胀麻醉下进行脂肪抽吸术。对脂肪抽吸者一侧以单纯盐酸利多卡因作为局部肿胀麻醉(A配方),另一侧以盐酸利多卡因与盐酸罗哌卡因混合液作为局部肿胀麻醉(B配方),观察术中生命体征和术中、术后麻醉效果。结果两配方VAS评分,A配方:开始时4.51±1.25,结束时3.23±1.29,术后12 h为2.72±1.26;B配方:开始时1.25±0.45,结束时0,术后12 h为0.45±0.05。手术开始、结束及术后12 h B配方的VAS评分均低于A配方,差异有统计学意义(P<0.05)。结论盐酸利多卡因与盐酸罗哌卡因混合液应用于肿胀液行脂肪抽吸术,麻醉效果好,可减少利多卡因的用量,对于大量脂肪抽吸者可减少局部麻醉药中毒的风险。

基因移植人血管内皮细胞生长因子斜备小鼠新生血管模型

目的探讨血管内皮细胞生长因子基因用重组慢病毒为载体移植制备新生血管动物模型的可行性。方法构建重组慢病毒介导的人血管内皮细胞生长因子（humanvascularendothelialgrowthfactor，hVEGF165）基因，并转染小鼠成纤维细胞（NIH／3T3）。利用流式细胞仪挑选转染成功的细胞，将转染成功的表达人VEGF165的NIH／3T3细胞植入C57小鼠的骨骼肌，建立小鼠的新生血管模型。在新生血管模型上，用ELISA的方法进行小鼠血清VEGF测定。观察瘤体组织形态学。用免疫组化的方法观察是否有表达CD31的细胞。结果经酶切鉴定、聚合酶链反应（PCR）及基因测序证实Lenti—VEGF165-GFP构建成功，包装后测定滴度为6．19×10^7TU／ml。用基因移植的方法成功建立了稳定的小鼠新生血管模型，并证实小鼠外周血中有VEGF的分泌。14d后细胞植入处局部肿胀。44d后HE染色发现细胞植入部位有血管组织的新生，免疫组化显示有围成规则或不规则管状表达CD31的细胞。结论将表达人VEGF165的NIH／3T3细胞植入C57小鼠的骨骼肌，可以产生稳定有效的新生血管模型。

您用的面膜安全吗?

记者从超市、化妆品店、小商品店购买了两元、3元、5元、10元、15元、20元一张的面膜，分别做了测试。令人震惊的是，这些面膜无一例外都含有荧光剂。专家说，现在面膜的无纺布材质和外包装的亮膜，都要经过荧光剂的处理，成分一般是含有苯环的二丙乙烯类，而苯环一般都有致癌性。面膜的无纺布材质的质量越差，含有的荧光剂就越多。

普萘洛尔对婴幼儿血管瘤患者尿液中基质金属蛋白酶(MMPs)表达水平的影响

目的通过分析普萘洛尔对婴幼儿血管瘤(IH)患儿尿液中MMP-9及MMP-2水平的影响,探讨普萘洛尔治疗IH的疗效及可能作用机制。方法对治疗组18例IH患儿给予口服盐酸普萘洛尔治疗,剂量为1.0~1.5 mg/kg,1次/d,疗程为4~8个月。设置未服药组为对照组,对比分析两组患儿在治疗前,治疗后1、3个月尿液中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平。结果(1)治疗组18例患儿经口服普萘洛尔治疗后,血管瘤的生长得到了抑制,瘤体体积显著缩小,瘤体表面颜色变黯淡,且张力大小明显减弱;(2)治疗前,两组患儿尿液中MMP-2与MMP-9差异均无统计学意义(P±0.05);治疗后第1、3个月时,两组患儿尿液中MMP-2和MMP-9差异均有统计学意义(P<0.05)。结论普萘洛尔治疗IH是通过下调患儿尿液中MMP-9及MMP-2的水平而发挥作用,是普萘洛尔治疗IH的作用机制之一。