加味补阳还五颗粒对脑梗死大鼠HMGB1/RAGE信号通路的影响

目的观察加味补阳还五颗粒对脑梗死大鼠HMGB1/RAGE信号通路的影响。方法将健康雄性SD大鼠90只,按体质量用数字表法随机分为正常组、假手术组、模型组、加味补阳还五颗粒低剂量组、加味补阳还五颗粒中剂量组、加味补阳还五颗粒高剂量组、HMGB1抑制剂组、RAGE阻断剂组、阳性药物组各10只。分别取大鼠梗死区脑组织和血清。ELASA法检测血清中HMGB1和RAGE水平;Western blotting法分析脑组织中HMGB1表达水平。结果中等剂量的加味补阳还五颗粒可降低梗死区脑组织中HMGB1表达水平,可降低脑梗死大鼠血清中HMGB1和RAGE的含量。结论加味补阳还五颗粒可能通过影响脑梗死大鼠HMGB1/RAGE信号通路而发挥脑保护作用。中等剂量的加味补阳还五颗粒,折合人体剂量后每味药剂量如下:黄芪30 g,当归10 g,川芎6 g,赤芍10 g,丹参10 g,地龙10 g,茯苓10 g,陈皮6 g,杜仲10 g,天麻10 g。成人每日1剂,分两次服用。

重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A结构域(HMGB1-A)的原核表达及纯化

目的合成重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A结构域(HMGB1-A)蛋白。方法利用基因工程技术,克隆并重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A盒基因;利用原核表达技术,表达并纯化重组大鼠HMGB1-A盒蛋白,并利用Western blot法进行验证。结果琼脂糖凝胶电泳分析显示HMGB1-A盒基因大小约为250 bp;重组克隆p UC-A经双酶切鉴定,产物大小约为3000 bp、250 bp;重组克隆p GEX-A PCR产物大小约为250 bp。原核表达产物Mr大小约为36 000,与预期一致。结论成功表达并纯化HMGB1-A盒蛋白。