阴茎根部皮肤环切术与包皮环切器包皮环切术的疗效分析

目的探讨两种全新包皮环切手术方法及治疗效果，从而最大可能地避免包皮环切术所带来的并发症。方法将155例包皮过长患者施行阴茎根部皮肤环切术，同期108例行包皮环切器包皮环切术，对两组手术时间、术中出血量、术后创口出血、水肿、疼痛及感染等并发症进行分析比较。结果根部皮肤环切组手术时间（20±5）min，包皮环切器包皮环切组（5±5）min；前组术中出血量（2±1）ml，后组为（1±0．5）ml；前组术后发生创口水肿4例，血肿2例，无局部感染；后组术后创口水肿5例，无血肿、感染病例，总共并发症发生率4％；前组术后疼痛持续（20±4）h，后组为（24±6）h。结论两组包皮环切手术方式较传统手术都具有优越性，疗效佳，临床上均有广泛的推广价值。

CML28在K562细胞增殖与凋亡调控中的作用研究

目的探讨CML28分子在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞系K562细胞增殖与凋亡调控中的作用机制。方法体外培养K562细胞,电转染特异性CML28小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),收集转染特异性Si-hCML2848h的K562细胞,Trizol一步法提取细胞总RNA,逆转录合成cDNA,通过反转录RCR(reverse transcriptionPCR,RT-PCR)及实时定量PCR(real time PCR)检测其沉默效应;流式细胞术(flow cytometry,FCM)和CFSE标记的细胞增殖试验检测干扰后K562细胞的凋亡与增殖情况,SPSS17.0软件进行统计学分析,分类资料采用非参数检验,计量资料采用方差分析或t检验,以P<0.05为有统计学意义。结果 (1)K562细胞高表达CML28分子;(2)干扰后CML28分子的mRNA水平为0.524±0.044,较阴性对照组明显下降,非参数检验Kruskal-Wallis H:P=0.003,检验水准α=0.05,P<α,差异有统计学意义;(3)Si-hCML28干扰组凋亡率为(22.45±3.54)%,较阴性对照组显著增高,方差分析:P=0.005,检验水准α=0.05,P<α,差异有统计学意义;Si-hCML28干扰后K562细胞增殖显著受抑,t检验:P=0.01,检验水准α=0.05,P<α,差异有统计学意义。结论 (1)CML28分子在K562细胞中呈高表达,Si-hCML28可以显著抑制CML28分子的mRNA表达;(2)siRNA干扰CML28分子后,显著抑制K562细胞的增殖,诱导K562细胞的凋亡。这些结果提示CML28在K562细胞的增殖与凋亡调控中扮演着重要的角色。

GST-CML28融合蛋白的表达和纯化及多克隆抗体制备

本研究探讨GST-CML28融合蛋白的表达及抗体制备。CML28-pGEX-3X重组质粒转化BL21大肠杆菌,提取细菌蛋白后用GSTrap FF纯化柱进行纯化。将纯化后的融合蛋白免疫家兔,制备CML28抗血清;免疫血清用CNBr-activated Sepharose 4B层析柱进行纯化,获得多克隆抗体。结果表明,获得的抗体能够满足针对CML28的ELISA、Western blot、免疫组织化学和量子点荧光检测的实验要求。结论:成功制备了高特异性,高效价的抗人CML28多克隆抗体,为今后深入研究其生物学功能提供了有用的实验工具。