二甲双胍诱导人胎盘绒毛癌细胞系JAR凋亡的机制初探

目的探索二甲双胍诱导人胎盘绒毛癌细胞系JAR凋亡的作用机制。方法将JAR细胞分为对照组和二甲双胍处理组(终浓度5、10、20、40、80mmol/L)处理24h后选取合适的药物浓度。激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡,分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和免疫蛋白印记(Western blot)检测凋亡相关基因AMPK,p-AMPK,mTOR,Caspase-3,Bcl-2和Bax的变化趋势。结果 40mmol/L的二甲双胍处理能够引发JAR细胞凋亡,并且激活AMPK的磷酸化并下调mTOR的蛋白水平;同时上调Caspase-3和Bax的mRNA及蛋白水平,并且下调Bcl-2的mRNA和蛋白表达,降低Bcl-2和Bax的蛋白水平比例。结论二甲双胍可能是通过AMPK/mTOR和Caspase-3及Bcl-2/Bax两个通路的共同作用诱导JAR细胞发生凋亡。

二甲双胍对人绒癌JAR细胞上皮-间质转化和侵袭迁移能力的影响

目的 探索二甲双胍对人绒癌JAR细胞株上皮-间质转化,侵袭和迁移能力的影响。方法 使用浓度为40 mmol/L的二甲双胍处理人绒癌JAR细胞株,随后分别使用基于Transwell小室的实时荧光照相技术和划痕实验分别检测二甲双胍处理前后JAR细胞的侵袭和迁移变化;使用实时荧光定量聚合酶链反应和免疫蛋白印记法检测可能调控上述现象的分子:腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶( p-AMPK )、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的mRNA及蛋白变化趋势。结果 二甲双胍处理人绒癌JAR细胞株24 h后AMPK的mRNA表达增加,AMPK总蛋白无明显变化而p-AMPK蛋白表达上调。细胞的迁移和侵袭能力减弱,同时上皮-间质转化分子标志物E-cadherin上调,N-cadherin和Vimentin下调,提示上皮-间质转化能力降低。结论 二甲双胍可以通过磷酸化激活AMPK抑制人绒癌JAR细胞株的上皮-间质转化,侵袭和迁移能力。