江苏汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体及其特异性配体HLA分析

目的:分析杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)及其特异性配体HLAⅠ类分子在江苏地区汉族人群的分布特点。方法:分别利用real-time PCR法和PCR-SSP方法对173例无血缘关系的江苏汉族健康人群进行KIR和HLA-Cw,HLA-Bw4分型,并分析KIR/HLA配对组合的类型和数量。结果:江苏汉族人群中,>92%的个体同时表达四种抑制性KIR(iKIR)(2DL1,2DL2/3,3DL1,3DL2)。2DL2/HLA-C1,2DL3/HLA-C1,2DL1/HLA-C2,3DL1/Bw4的频率分别依次分别为0.243,0.971,0.457,0.590;2DS1/HLA-C2,2DS2/HLA-C1的频率为0.162,0.231。54.3%的个体只表达2DL1而不表达相应的配体HLA-C2,32.9%的个体只表达3DL1而缺乏配体HLA-Bw4,另有5.8%的个体只表达HLA-Bw4而不表达3DL1。27.7%的个体同时表达3种iKIR/HLA,26%的个体同时表达两种iKIR/HLA,25.4%的个体只遗传一个iKIR/HLA配对,未发现3种iKIR/HLA同时缺失的个体。结论:在江苏汉族人群中,存在KIR与HLA表型分离现象,抑制性KIR/HLA配对表达高于刺激性KIR/HLA配对,约1/4个体只表达单个iKIR/HLA配对。

SYBR green Ⅰ实时荧光PCR法检测KIR基因型

目的:建立一种新的杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因分型方法。方法:利用16对KIR序列特异性引物和两对内参照引物及荧光染料SYBR Green I进行实时聚合酶链反应(real-time PCR),分析各扩增产物的熔解曲线,确定各个KIR基因熔解温度和特征,并以此为依据判断16种KIR基因的出现或缺失。对样本DNA进行不同倍数稀释检测该方法的敏感性。结果:分析熔解曲线能有效地进行KIR基因分型。该方法甚至可以对0.1 ng DNA的样本成功进行KIR分型。利用该方法成功地对10例外周血基因组DNA和10例宫颈细胞基因组DNA进行了KIR分型。结论:SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR应用于KIR基因分型,具有简单、快速、敏感、实时和环保的特点,为实现KIR分型的自动化提供可能性。

杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性与原发性胆汁性肝硬化的相关性分析

目的探讨江苏汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因多态性与原发性胆汁性肝硬化(PBC)的相关性。方法收集2011-06-01/2013-07-31期间江苏省常州三院住院的PBC患者122例和198例相匹配的无血缘关系健康人群外周血标本。采用实时荧光定量PCR检测KIR基因多态性,分析KIR基因及基因型频率在2组人群间的差异。结果 PBC患者KIR2DL2和2DS2基因频率比对照组显著性降低,与降低疾病的患病风险有关。共检测出55种KIR基因型,其中PBC组24种,对照组47种。最常见的基因型为AA1,其次为BX2、BX8、BX4、BX14。对存在于5个或以上个体的11个基因型进行分析,未发现PBC组与对照组之间有显著性差异。结论 KIR2DL2和2DS2的缺失可能是江苏地区汉族人群PBC发病潜在的保护因子。

尿特定蛋白和β2-MG在糖尿病肾病中的水平变化及意义

目的探讨尿微量白蛋白(MA)、尿转铁蛋白(TRU)、尿免疫球蛋白(IgU)、尿α1-微球蛋白(α1-MG)和β2-微球蛋白(β2-MG)在糖尿病肾病(DN)早期诊断中的价值。方法将研究对象分为糖尿病肾病组和健康对照组,利用免疫散射速率比浊法测定尿特定蛋白含量,利用比浊法测定血、尿β2-微球蛋白含量,并进行分析。结果与健康对照组比较,糖尿病肾病患者尿微量白蛋白(MA)、尿转铁蛋白(TRU)、尿免疫球蛋白(IgU)、尿α1-微球蛋白(α1-MG)和β2-微球蛋白(β2-MG)含量和阳性率均显著增高,有显著性差异(P<0.05);糖尿病肾病患者在早期检测中,尿微量蛋白的敏感度和特异度优于尿素和肌酐。结论联合检测尿特定蛋白和尿β2-微球蛋白可作为糖尿病肾病患者肾损害早期诊断的重要指标。

杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性与宫颈癌的相关性分析

目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白(Ig)样受体(KIR)基因多态性与宫颈癌的相关性。方法收集167例宫颈上皮内瘤变3级(CIN3)/宫颈癌患者和163例年龄匹配的无血缘关系健康女性外周血标本。采用SYBR GreenⅠ实时荧光PCR分析KIR基因及基因型频率在两组人群间的差异。结果 CIN3/宫颈癌组的KIR2DL2和2DS2基因频率低于健康人对照组(10.2%vs28.8%,P=0.000;9.6%vs 25.2%,P=0.000)。KIR2DL2/2DS2共表达个体的频率在病例组低于健康人对照组(9.0%vs22.7%,P=0.001),与降低疾病的患病风险有关(OR=0.336)。基因型AA1和BX8与增加CIN3/宫颈癌的患病风险有关(49.1%vs 35.6%,OR=1.746,P=0.013;10.8%vs 4.3%,OR=2.692,P=0.026),而BX4与降低疾病的患病风险有关(2.4%vs 7.4%,OR=0.309,P=0.036)。结论 KIR2DL2/2DS2对宫颈癌的发生可能具有保护性作用。

常州地区女性人乳头瘤病毒感染及基因型分析

目的 了解江苏常州地区妇女宫颈人乳头瘤病毒（HPV）感染的分布情况,为该地区宫颈疾病防治及疫苗的投入使用提供一定的依据.方法 采用导流杂交基因芯片技术对1 016例有性生活史妇女宫颈脱落细胞进行21种HPV基因型检测.结果 在被调查的1 016例妇女中共有20种HPV亚型被检测出来.HPV感染总阳性率为27.8%,高危型检出率为25.6%,低危型为3.4%,混合型感染为6.2%.HPV感染阳性排在前5位的亚型从高到低依次为HPV16,58,52,31和68.随着宫颈疾病病变级别升高,HPV感染率呈正向增加趋势.结论 常州地区HPV亚型感染分布以高危型HPV16,58,52,31,68为主,早期筛查和控制HPV感染能有效降低宫颈癌的发病率.

检测尿细胞角蛋白19片段对膀胱癌的意义

目的 :检测尿液中细胞角蛋白 19片段 (cytokeratin 19fragment ,CYFRA2 1 1)的含量 ,探讨CYFRA2 1 1与膀胱癌的关系。方法 :应用电化学发光免疫测定技术 (ECLIA) ,对 2 3例膀胱癌患者的尿液中CYFRA2 1 1进行定量测定 ,并与正常对照组和泌尿系统良性疾病组对照分析。结果 :膀胱癌组的CYFRA2 1 1水平为 (13 5.0 0± 16.70 ) μg L ,明显高于正常对照组(2 .0 2± 0 .92 ) μg L和泌尿系统良性疾病组 (4.2 3± 1.40 ) μg L(P <0 .0 1)。以 3 .50 μg L为临界值 ,尿CYFRA2 1 1对膀胱癌诊断的敏感性为 91.3 % ,特异性为 89.0 % ,阳性预测值和阴性预测值分别为 65.6%和 97.8%。结论 :尿液CYFRA2 1 1含量的检测可作为膀胱癌的辅助诊断指标和术后监测指标 ,有灵敏、快速。

电化学发光法检测抗CCP抗体在RA诊断中的性能评价

目的分析抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)电化学发光自动化检测在类风湿性关节炎中的诊断效能和临床意义。方法选取类风湿关节炎(RA)患者144例和非RA的其他风湿病患者81例,采用电化学发光法测定血清抗CCP抗体水平,免疫透射比浊法测定血清类风湿因子(RF)。结果 RA组血清抗CCP抗体和RF水平均明显高于非RA组。抗CCP抗体检测敏感度为94.4%,RF为89.6%,差异无统计学意义(P=0.145);抗CCP抗体检测特异度为97.5%,明显高于RF的88.9%(P=0.046)。抗CCP抗体浓度与RF、ESR和CRP水平均无明显相关性(P>0.05)。结论抗CCP抗体与传统的RF相比具有较高的特异性和相似的敏感性。全自动高通量的电化学发光法可作为抗CCP抗体常规检测的一个理想平台。

苏南地区丙型肝炎病毒基因型分布及其与NK细胞比例异常的关系

目的①了解苏南地区丙型肝炎病毒的基因型分布。②测定丙型肝炎患者外周血中NK细胞的百分数。方法用基因芯片方法对103例丙型肝炎患者的血清进行病毒基因分型,并测定这103例丙肝患者外周血淋巴细胞中NK细胞的百分数。结果 103例丙型肝炎中1b型95例(92.2%),2a型4例(3.9%),3b型1例(1.0%),1b+2a混合型3例(2.9%),未发现1a、3a。103例丙型肝炎患者外周血中NK细胞的百分数低于正常对照组(P<0.01),不同丙肝基因型患者NK细胞的百分比无显著性差异(P>0.05)。结论①苏南地区丙肝患者基因分型以1b型为优势株。②NK细胞的减少是导致丙型肝炎的慢性化过程与迁延不愈的一个重要因素。

急性脑梗死生化标志物早期诊断及预后评估的价值

探讨急性脑梗死生化标志物早期诊断及预后评估的价值。方法选取武进人民医院2021年1月-2021年12月间132名急性脑梗死病人为观察组,并选取同期在同一时期内接受的100名健康体检者作为对照组,采用全自动生化分析仪分别检测血清总胆固醇、甘油三酯、HDL-C、LDL-C、同型半胱氨酸(HCY)等生化指标,并将两组的检测结果进行对比,并将两组的检测结果进行对比。结果:观察组血清 TC、 TG、LDL-C、 HCY含量均明显增高,HDL-C与正常组比较差异有统计学意义(分别为5.436,11.000,13.583,16.669,6.045, P0.000)。预后差的患者血清 TC、 HCY、LDL-C的含量均明显高于预后较好的患者(t3.652,4.324,10.551, P0)。TC、低密度脂蛋白 C和 HCY对急性脑梗塞患者的预后有重要影响(P0.05)。结论 急性脑梗死早期诊断中可通过快速检验TC、LDL-C、HCY等指标的异常情况进行分析,对预后评估有较高价值,值得推广。

大肠埃希菌耐药基因及可移动遗传元件与噬菌体原遗传标记研究

目的调查大肠埃希菌临床分离株的耐药性及遗传学特征。方法收集2009年1-12月患者尿液标本中分离的大肠埃希菌20株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析23种β-内酰胺酶基因、14种氨基糖苷类修饰酶基因、6种16SrRNA甲基化酶基因、8种可移动遗传元件遗传标记、9种噬菌体原遗传标记以及与细菌细胞分裂相关的2种基因(dicB、kilR),与细菌致病性相关的2种基因(hofQ、ompT)。结果 20株大肠埃希菌共检出3种β-内酰胺酶基因、6种氨基糖苷类修饰酶基因、1种16SrRNA甲基化酶基因,7种可移动遗传元件遗传标记、6种噬菌体原遗传标记、2种与细菌细胞分裂相关的基因、2种与细菌致病性相关的基因;20株大肠埃希菌全部基因检测结果的样本聚类分析示,1、4、9、10号株为一簇,其余为另一簇。结论对大肠埃希菌尿液分离株进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、16SrRNA甲基化酶基因、可移动遗传元件遗传标记、噬菌体原遗传标记以及与细菌细胞分裂相关的基因,与细菌致病性相关的基因检测与分析,国内为首次,从样本聚类分析图可见,虽无克隆传播,但6、12号株与7、18号株有较近的亲缘关系,有医院感染的可能性。