骨髓间充质干细胞移植重建碱烧伤眼表的实验研究

目的探索人骨髓间充质干细胞(MSCs)的诱导分化条件,观察负载人MSCs的羊膜移植重建碱烧伤大鼠眼表的疗效。方法传三代人MSCs分组培养,不同条件刺激后种于羊膜表面。碱烧伤后1个月大鼠随机分A、B、C和D组:A组(A1、A2、A3、A4)移植不同条件诱导的人MSCs,B组移植人角膜缘干细胞(LSCs),C组移植羊膜,D组未治疗。术后观察眼表并评分,2周和1个月时行印迹细胞学(IC)检查,1个月时切片行苏木精-伊红染色,免疫组织化学和免疫荧光检测溴脱氧尿嘧啶(BrdU)、ABCG2、K3/K12、Cx43和血管内皮生长因子(VEGF)。结果术后A、B组较C、D组角膜新生血管和炎性细胞减少、透明度增加(P<0.05)。IC检查示A、B组未见杯状细胞,C、D组可见杯状细胞。A、B组均形成3层以上上皮细胞,C组3层左右,D组为1～2层。免疫组织化学和免疫荧光检查示:A、B组角膜表面可检测到BrdU、ABCG2阳性细胞;A组Cx43均为阴性,A4组中有2个标本K3/K12为弱阳性,其余A组标本均为阴性,B组K3/K12、Cx43均为阳性;A、B组VEGF均较低,C组较强,D组最强。结论人MSCs与人LSCs相同,可成功重建碱烧伤大鼠眼表。其眼表重建功能可能与抗炎和抗血管化作用有关。