杏鲍菇液体菌种的细胞固定化技术及其保藏条件研究

为解决杏鲍菇液体菌种不耐储存和不易运输等问题,通过筛选适宜的固定化载体种类及其质量浓度,分析液体菌种与固定化载体体积比、CaCl_(2)质量浓度、交联时间等对固定化小球形成的影响,优化固定化条件,研究杏鲍菇液体菌种细胞固定化技术;通过测定不同温度条件下保藏不同时间固定化菌种的成活率、菌丝生长速度、呼吸强度、纤维素酶活性等,明确固定化菌种的生物活性和保藏稳定性。结果表明,杏鲍菇液体菌种的细胞固定化最佳条件为:将海藻酸钠与聚乙烯醇(质量比3∶7)作为固定化载体,固定化载体质量浓度为80 g/L,液体菌种与固定化载体溶液体积比5∶5,CaCl_(2)质量浓度为20 g/L,交联时间6 h,制得的固定化菌种球形规则,传质性快,为15 min,机械强度适中,为60.1 g,菌丝增长率高达200.1%。固定化菌种在20、4℃条件下保藏30 d,随着保藏时间增加,成活率和菌丝生长速度无显著性变化,呼吸强度降低,纤维素酶活性升高,说明菌种仍具有较高的生物活性,利于固定化菌种生物活性稳定;-20℃保藏10 d成活率和菌丝生长速度分别降低50个百分点和72.73%,呼吸强度和纤维素酶活性显著降低,菌种生物活性降低,不利于菌种的保藏。

抗弧菌光合细菌的分离鉴定及对氨氮和亚硝态氮的降解特性

该研究采用双层平板涂布法和划线法,从不同地区的海洋环境样品中分离纯化光合细菌,以副溶血弧菌(Vibrio parahemolyticus)、创伤弧菌(V.vulnificus)、鳗弧菌(V.anguillarum)为指示菌,采用牛津杯法测定海洋光合细菌菌株的抑菌作用,采用靛酚蓝分光光度法和盐酸萘乙二胺分光光度法测定不同菌株对氨氮(NH_(4)^(+)-N)和亚硝态氮(NO_(2)^(−)-N)的降解作用,筛选出具有抗弧菌并高效降解NH_(4)^(+)-N和NO_(2)^(−)-N复合功能的优良菌株。结果显示,从30个海水、海泥等样品中分离得到3株光合细菌,分离自连云港车牛山岛海水样品的菌株P-3,对3种弧菌均具有较强的抑制作用,其中对鳗弧菌的作用最强,抑菌圈直径为5.3 mm。3株光合细菌均具有一定的降解NH_(4)^(+)-N和NO_(2)^(−)-N作用,菌株P-3的降解作用最强,在含有50 mg·L^(−1)NH_(4)^(+)-N和NO_(2)^(−)-N的培养基中培养4 d,降解率分别为89.68%和94.98%。经形态学观察、生理生化试验和16S rDNA序列分析,确定P-3为沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)。