晚期糖基化终产物受体的表达对大鼠脂肪肝移植术中肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的探讨大鼠脂肪肝移植术中晚期糖基化终产物受体(RAGE)的表达及其对肝脏缺血再灌注损伤的影响。方法 40只SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组喂养蛋氨酸胆碱缺乏饲料(MCD),2周后建立脂肪肝模型,并作为实验组肝移植的供肝;对照组喂养普通饲料2周,并作为对照组肝移植的供肝;另外,随机选健康大鼠40只分别作为实验组和对照组的受体,建立大鼠肝脏移植模型。分别观察实验组和对照组术后的生存率,并分别在术后2和6 h处死大鼠,取肝脏组织行总RNA提取,用PCR检测RAGE RNA的表达量。并用TUNEL试剂盒检测实验组和对照组移植后的肝脏细胞的凋亡及坏死情况。结果成功建立了大鼠脂肪肝模型;实验组RAGE RNA的表达明显高于对照组,且提前出现。脂肪肝移植后,可见大量肝细胞凋亡。结论 RAGE在大鼠脂肪肝缺血再灌注时高水平表达,可导致肝细胞凋亡,与移植是否成功密切相关。

人胚胎干细胞来源的肝细胞:一种具有潜力的乙肝病毒研究模型

目的:初步探索应用人胚胎干细胞来源的肝细胞作为乙肝病毒(HBV)体外研究模型的潜力。方法:定向分化人胚胎干细胞为肝细胞(hESC-Heps);采用免疫荧光方法检测肝性因子如肝细胞核因子-4α(HNF4α)、白蛋白(ALB)和HBV功能性受体钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)受体的表达;实时荧光定量PCR检测Ⅲ型干扰素受体表达,Western blotting检测hESC-Heps在Ⅲ型干扰素刺激下干扰素通路中磷酸化转录信号传导子与激活子2(STAT2)的表达。结果:成熟的hESC-Heps表达肝性因子HNF4α和ALB,表达HBV功能性受体NTCP受体,并且具有人原代肝细胞特异性的Ⅲ型干扰素反应。结论:人胚胎干细胞来源的肝细胞hESC-Heps可能成为一种具有潜力的HBV研究模型。

质子磁共振波谱对急性肝损伤兔肝脏脂质与葡萄糖代谢评估价值的研究

目的探究质子磁共振波谱(1H-MRS)技术对兔急性肝损伤模型中肝脏脂质和葡萄糖代谢改变的评估价值。方法选择健康成年雄性新西兰大白兔20只,采用随机数字表法分为对照组(10只)和实验组(10只)。对照组腹腔注射生理盐水(1 ml/kg);实验组腹腔注射亚硒酸钠(1 ml/kg),构建急性肝损伤模型。48 h后,使用1.5 T磁共振系统,采用单体素点分辨法波谱成像序列扫描兔活体肝脏。使用LCModel软件计算脂质、糖原和葡萄糖复合物(Glyu)和胆碱复合物(CCC)与水的相对峰值,并检测兔血清天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)水平,两组比较采用t检验。对兔肝脏标本进行苏木精-伊红(HE)染色,观察肝脏组织病理学变化。结果19只动物最终完成该实验过程,其中实验组9只,对照组10只。与对照组比较,实验组兔的lipid 13/lipid 09水平(5.21±1.83,7.17±2.56)、lipid 13/(lipid 21+lip 23)水平(6.52±0.82,7.35±2.33)均显著升高,而Glyu水平[(0.22±0.15)×10^(-2),(0.15±0.06)×10^(-2)]和CCC水平[(0.09±0.03)×10^(-2),(0.07±0.03)×10^(-2)]则显著下降,均差异有统计学意义(t=-2.31,-2.88,2.42,2.12;均P<0.05)。实验组兔血清AST[(433.79±140.19)U/L]和ALT[(779.67±149.54)U/L]水平较对照组[(46.51±17.71)U/L,(69.44±20.79)U/L]均显著升高(t=5.46,13.92;均P<0.05)。实验组兔肝脏出现肝小叶结构破坏、肝细胞坏死等急性弥漫性肝损伤的病理变化。结论利用亚硒酸钠可成功诱导兔急性肝损伤。1H-MRS技术可有效评估急性肝损伤的脂质与葡萄糖代谢改变,为临床无创诊断提供了新的思路。