肿瘤研究中的实验动物福利问题探讨

在肿瘤发生机制及预防诊断和治疗的研究中,动物实验作为介于体外细胞实验和临床试验之间的中间环节,是至关重要的。动物福利与动物实验的结果密切相关,动物福利的改善可以影响动物实验的合理性、可行性和伦理可接受性并提高实验结果的可靠性。本文整理了肿瘤研究中涉及实验动物的相关方面,主要包括:肿瘤动物模型、肿瘤模型相关动物福利及人道终点等。

大鼠急性呼吸窘迫综合征动物模型的建立

目的 建立大鼠急性呼吸窘迫综合征动物模型 (ARDS)。方法 选取KM小鼠SD大鼠 (雌雄不限 ) ,分为正常对照组及百草枯组 ,小鼠按每公斤体重 10 0mg ,大鼠按每公斤体重 12 0mg一次灌胃给药。再分 2 4h、4 8h、72h组 ,小鼠每组 10只股动脉采血用于血气分析 ,取肺测定肺系数 ,全肺拍照进行对照 ,大鼠每组 10只取肺石腊包埋 ,病理切片。结果 ①整体外观变化 随着给药时间延长 ,呼吸变得越来越困难、消瘦、咳嗽 ,2 4h后鼻腔有淡红色分泌物 ,食欲渐进性下降。②肺外观观察炎症渐进性发展 ,从正常粉红色发展到最后呈肝样变。③血气变化 随染毒时间延长 ,血液pH值逐渐降低 ,PaCO2 逐渐升高 ,PaO2 逐渐下降 ,肺系数逐渐增大 ,组间数据进行t检验p <0 0 1,差异有显著性。④病理切片观察肺部呈典型炎症病理变化过程 ,最终肺泡内形成典型透明膜。结论 百草枯染毒成功制造鼠ARDS模型。

研究生实验动物学教学的思考

实验动物学是生命科学领域中研究生教育的重要基础课程。但是,当前我国研究生的实验动物学相关知识水平参差不齐,研究所用动物和实验方法各异,实验动物教学需强调基础理论的系统性和新颖性;教学形式多样化和教学内容有针对性是充分调动学生学习积极性的重要一环;加强动物实验操作能力训练并注重现场考核是巩固实验动物学教学效果的有效手段。

关于建立清洁级动物室的探讨

随着科技的发展，对实验动物级别及设施的要求越来越高，清洁级动物室已是每一所医学院校必备的硬件。本文作者在资金少、时间紧的情况下，采用自己安装隔离器的方法，建立一个清洁级动物室，经一年多的运转，各项指标符合清洁级动物实验室的要求，经省实验动物监测所及医...

动物屏障系统的环境质量控制

硬件设施的高性能及良好维护是维持屏障环境各项参数达到标准的基础;对进出屏障的人流和物流的严格控制是减少环境受外源微生物污染的关键;对屏障环境的制度化监测和维护是保证环境质量达标的核心。

昆明小鼠正常PaO_2、PaCO_2、pH值、肺系数和PQLD_(50)的测定

目的 研究与ARDS密切相关的几个生理指标。方法 KM小鼠动物血pH、PaO2 、PaCO2 由美国NO VA血气分析直接测定 ,PQ中毒LD50 以寇氏法计算。肺系数由湿重除以体重乘 10 0 %得出数值。结果 KM小鼠正常动脉血pH值为 7 36 0 5± 0 0 6 7,PaO2 (kPa)为 12 47± 1 34 13,PaCO2 (kPa) 5 2 6± 0 4949;肺系数 (% )为 0 6 6 6 2±0 0 82 ;百草枯 (paraquat,PQ)中毒LD50 为 93 86 6mg kg。结论 以上所测定几个数据至今尚未见报道 ,我们把测定分析结果公开发表 ,填补KM小鼠理化常数方面的空白 。

食管癌SCID小鼠异位移植模型建立的初步探讨

目的建立人食管癌SCID异位移植模型并对其转移性淋巴来源细胞进行筛选。方法将食管癌细胞系Eca-109细胞悬液注射至SCID小鼠胃壁。三个月后或动物频死时处死解剖,观察肿瘤在小鼠体内的生长转移情况,对肉眼可见的转移病灶先建立皮下移植模型后建立转移性细胞亚系。结果胃壁移植15只SCID小鼠,获得9只胃壁移植瘤动物,其中一只出现纵隔淋巴结转移和肺转移。取淋巴结转移灶部分移植至SCID动物皮下,在动物皮下传代两个月(共4代)后,进行常规组织块培养,初步建立细胞亚系,命名为LnF1/Eca-109。结论肿瘤胃壁移植是建立食管癌免疫缺陷动物自发性移植模型和筛选转移性细胞亚系的可行方法。

两种食管鳞癌细胞系增殖和侵袭能力的比较研究

目的:研究两种来源不同的食管鳞癌细胞系EC109和KYSE510分裂增殖能力和侵袭能力的差异。方法:利用MTT实验和侵袭实验,在体外分别检测EC109和KYSE510细胞的分裂增殖能力和侵袭能力;采用裸鼠皮下接种实验和爪垫皮下接种淋巴结转移模型,比较两种细胞在体内的成瘤能力、局部侵袭能力和区域淋巴结转移能力的差异;免疫印迹检测上皮-间充质细胞转换标志蛋白E-cadherin、γ-cadherin和Vimentin在两种细胞中的表达水平。结果:体外实验表明,EC109细胞的分裂增殖和侵袭能力均明显较KYSE510细胞的强(P<0.05);皮下接种和爪垫皮下接种淋巴结转移实验显示EC109细胞的成瘤能力、局部侵袭能力和淋巴结转移能力均较KYSE510细胞的高;免疫印迹检测发现,E-cadherin和γ-cadherin在EC109细胞中的表达水平较KYSE510细胞中的表达低,而Vimentin在EC109细胞中的表达则较KYSE510细胞中的表达高,提示EC109细胞发生上皮-间充质细胞转换的程度较KYSE510的高。结论:EC109细胞的增殖和侵袭能力均较KYSE510细胞的强,上皮-间充质细胞转换可能是导致这种差异的原因之一。

原花青素对急性呼吸窘迫综合征模型大鼠治疗作用的实验研究

目的 探讨原花青素 (Procyanidolic,pc)对急性呼吸窘迫综合征 (Acuterespiratorydistesssyndrome ,ARDS)大鼠疾病模型的治疗作用。方法 大鼠用百草枯 (Paraquat,PQ)一次性灌胃 ,剂量 2 5 0mg/kg,治疗组分别于染毒 6、2 4、4 8h各给予PC治疗剂量 5 0 0mg/kg ,染毒组与治疗组分别于 2 4、4 8、72h ,取大鼠血浆和支气管肺泡液 (BALF) ,测试其血浆和BALF中超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH_Px)的活力 ,各组取肺病理组织做病理组织观察研究。结果 治疗组与染毒组比较 ,血浆和BALF中GSH_PX 、SOD活力逐渐升高 ,差异有显著性P <0 0 5 ,MDA含量下降 ,差异有显著性P <0 0 5 ,染毒与对照组比较 ,血浆和BALF中MDA含量高于对照组 ,差异有显著性P <0 0 5 ,SOD和GSH_PX 活力下降 ,差异有显著性P <0 0 5 ,肺组织病理学观察 ,ARDS组肺泡壁充血 ,炎症细胞浸润 ,Ⅰ型与Ⅱ型细胞破坏 ,肺泡内有炎症渗出物 ,对照组肺泡壁完好 ,肺泡内没有炎症渗出物 ,没有炎症细胞浸润 ;给予PC治疗后 ,肺泡壁充血、出血减轻 ,炎症渗出物减少 ;结论 PC对ARDS模型大鼠有一定的治疗效果。

中药麝香胶囊抑瘤作用的实验研究

目的探讨中药麝香胶囊对小鼠实验性肿瘤的疗效。方法昆明小鼠分别接种艾氏腹水癌、S-180、肝癌细胞株(hepatocellular carcinoma,HCC)三种癌细胞株,接种24 h后开始给予中药麝香胶囊,每日1次,共10 d。分高、中、低三个剂量给药(4、21、g/kg以主药麝香药量计)。阳性对照以天仙丸胶囊(1 g/kg)一次性灌服。阴性对照组以同体积生理盐水灌服。接种实体瘤动物于第10天处死,称瘤重,计算抑瘤率;接种腹水瘤动物,观察存活时间,计算生命延长率。结果中药麝香胶囊对实体癌有一定的抑瘤作用,但未达到药典规定的抑瘤率30%的要求;对腹水癌也有一定的抑瘤作用,但也未达到药典规定生命延长率50%的要求;统计学分析(P>0.05)差异没有显著性。结论中药麝香胶囊抑瘤作用不明显,其配方及剂型有待进一步研究与改进。

激活转录因子3的过表达对食管癌细胞生长的抑制作用

背景与目的:激活转录因子3(activating transcription factor 3,ATF3)在食管癌中表达异常下调,但其功能仍不清楚。本研究拟探讨ATF3在食管癌细胞过表达对癌细胞生长及裸鼠成瘤的影响。材料与方法:利用分子克隆技术将ATF3基因完整编码区克隆至真核细胞表达载体pcDNA3中,获得重组表达质粒;将该表达质粒转染食管癌EC109细胞并用G418筛选稳定表达的细胞克隆;用Western blot检测ATF3的过表达效果;对ATF3过表达的细胞与相应对照细胞进行细胞克隆形成实验和裸鼠体内成瘤实验,以分析ATF3过表达对食管癌细胞生长的影响。结果:ATF3的过表达在体外可以降低食管癌细胞的克隆形成能力;在体内可以抑制食管癌细胞在雌鼠中的成瘤能力,但对雄鼠中的成瘤能力没有明显影响。结论:ATF3的过表达可以抑制食管癌细胞的生长,ATF3可能在食管癌的发生发展中发挥重要作用。

高转移潜力食管癌细胞株的建立及其生物学特征

目的建立具有高转移潜力食管癌细胞株并研究其生物学特征。方法将食管癌细胞系EC109细胞悬液异位移植到SCID小鼠胃壁,约3个月后或动物濒临死亡时处死,行病理学解剖,将肉眼可见的纵隔淋巴结转移瘤块接种于SCID鼠皮下扩增,然后取小鼠皮下瘤组织块进行细胞培养,得到性状稳定的细胞株NMC109后,用MTT法分析细胞生长曲线,Western bloting法检测与细胞分裂增殖能力密切相关的TopoIIα表达,酶谱法检测MMP-2和MMP-9的活性,划痕实验和Transwell体外移动实验检测细胞的移动能力。结果与母本细胞EC109相比,所获得的细胞株NMC109其增殖能力和TopoIIα表达明显增强,MMP-9的活性明显升高,移动能力明显增强。结论获得了具有高转移潜力的食管癌细胞株。

两种麻醉剂在犬外科实验中麻醉效果的比较

目的 探讨戊巴比妥钠和苯巴比妥钠在犬外科实验中的麻醉效果。方法 实验犬 12 0只 ,随机分为两组 ,分别用 3%戊巴比妥钠注射液 (剂量 4 5mg/kg)和 5 %苯巴比妥钠注射液 (剂量 10 0mg/kg)行腹腔内注射麻醉 ,对比观察两组动物的各项麻醉指标。结果 戊巴比妥钠组的麻醉起效时间明显短于苯巴比妥钠组 (P <O 0 1) ,麻醉失败者也少于苯巴比妥钠组 (P <0 0 5 )。结论 戊巴比妥钠行腹腔内注射麻醉是一种较快速、有效而安全的动物实验麻醉方法 。

急性呼吸窘迫综合征大鼠肺病理组织电镜观察

目的电镜观察研究急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)大鼠肺损伤病理改变。方法采用百草枯(Paraquat,PQ)染毒建立ARDS动物疾病模型,取肺组织进行电镜观察。结果正常大鼠肺组织肺泡壁完整,肺泡II型上皮细胞胞质内板层小体没有排空现象,而ARDS大鼠肺组织能从多个视野中观察到肺炎症损伤的各种病理变化。结论透射电镜可以观察到ARDS肺损伤的各种病理变化。肺泡II型细胞胞质内板层小体排空为ARDS的特征性病理变化,肺泡II型细胞板层小体排空或许可以作为判断ARDS的重要依据。

鲨鱼软骨酸性粘多糖对大鼠高血脂的影响

鲨鱼软骨酸性粘多糖（AMPSS）连续灌胃30天，研究其对实验性高血脂大鼠的影响。结果表明：AMPSS对高血脂大鼠血清甘油三脂（TG）及体重没有显著影响（P>0．05），但能显著降低其血清总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）（P<0．05）；显著升高高密度脂蛋白胆固醇（HDL－C）（P<0．05）；LDL-C／HDL-C显著降低，说明AMPSS有明显抗高血脂作用。

小鼠巨噬细胞内游离钙离子变化介导的吞噬作用(英文)

为评估小鼠巨噬细胞吞噬死亡细胞时胞质内游离钙离子的变化。实验使用F luo-3标记巨噬细胞内钙离子和碘化丙碇对死亡细胞核染色,观察吞噬过程中细胞内钙离子的变化和显示巨噬细胞的吞噬功能,检测含死亡细胞的巨噬细胞内荧光密度图像。利用激光扫描共聚焦显微镜检测钙离子的释放。在缺钙的溶液中,可见巨噬细胞接触死细胞时细胞内钙离子快速地聚集和增高。在吞噬体形成时,巨噬细胞内钙离子上升到较高的水平。快速上升后,当吞噬小泡消化时,细胞内游离钙下降,随后钙离子恢复到低水平。研究显示伴随着吞噬小泡中红色荧光的死细胞的出现和消失,巨噬细胞内出现一系列钙离子变化的图像。提示巨噬细胞内钙离子改变在细胞吞噬作用中具有一定的作用。

幼龄和老龄小鼠肝心组织中几项生化指标变化的研究

幼龄和老龄鼠肝、心组织中过氧化脂质（LPO）,超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）测定表明,幼龄鼠肝组织中LPO明显低于老龄鼠,心组织中LPO两组比较不显著（P＜0.01、P＞0.05）;幼龄鼠肝、心组织中SOD活力显著高于老龄鼠（P＜0.001、P＜0.01）;而GSH-Px活力明显低于老龄鼠（P＜0.01P＜0.01）。

绿茶阿拉伯半乳糖蛋白对四氧嘧啶致小鼠高血糖的预防作用

目的:研究绿茶阿拉伯半乳糖蛋白(AGP)对四氧嘧啶致小鼠高血糖的预防作用。方法:40只正常健康小鼠按体质量随机分为绿茶AGP(200、400和800 mg.kg-1.d-1,各10只)溶液组和对照组(NS灌胃,10只)。连续灌胃2周后,尾静脉注射45 mg/kg四氧嘧啶。注射后3 d测定空腹血糖、血清超氧化物歧化酶、血清丙二醛及肝糖元浓度。结果:绿茶AGP能显著增加小鼠肝糖元浓度(P<0.05),且连续灌胃2周,400或800 mg.kg-1.d-1的绿茶AGP能显著降低注射四氧嘧啶的小鼠血糖(P<0.01)。结论:灌胃绿茶AGP能预防小鼠高血糖的形成。

抗NGAL抗体的制备、纯化及其鉴定

目的制备出一定纯度、免疫反应性好的抗NGAL抗体。方法采用纯的NGAL蛋白免疫动物,制备抗血清,然后进行硫酸胺沉淀法纯化抗NGAL抗体,最后运用SDS-PAGE、Western blotting分别鉴定抗NGAL抗体的纯度与免疫反应性。结果硫酸胺沉淀法纯化抗NGAL,SDS-PAGE检测分析表明抗NGAL抗体的纯度大于70%,Western blotting检测分析表明抗NGAL抗体的免疫反应性良好。结论最后获得了一定纯度、免疫反应性良好的抗NGAL抗体。