汕头大学医学院附属第一医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药谱分析

目的:了解汕头大学医学院附属第一医院分离的92株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药情况。方法:琼脂稀释法测定17种抗菌药物对MRSA的最低抑菌浓度(MIC)。结果:92株MRSA对实验中所有β-内酰胺类抗生素的耐药率均在80%以上。绝大部分菌株对庆大霉素、红霉素、氟喹诺酮类也不敏感。超过半数的MRSA菌株对利福平保持敏感,对氯霉素、多西环素及米诺环素也普遍敏感,未发现耐万古霉素的MRSA菌株。结论:我院附属第一医院的MRSA呈多重耐药,但对氯霉素,半合成四环素及万古霉素仍然敏感。

我院机能学实验室作品在全国性创新教学实验设计大赛中获一等奖

今年8月份我院机能学实验室教师参加全国性的医学高校教师创新性教学实验设计大赛,经过现场答辩和专家评审等竞赛环节,最终荣获两项一等奖。

组织因子反义寡脱氧核苷酸防治心肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的:研究组织因子(TF)反义寡脱氧核苷酸(AS/TF)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用。方法:设计针对大鼠TF的AS/TF、正义寡脱氧核苷酸(S/TF)和错配寡脱氧核苷酸(Sc/TF)。50只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注损伤组(I/R组)、反义寡脱氧核苷酸防治组(AS/TF组)、正义寡脱氧核苷酸防治组(S/TF组)和错配寡脱氧核苷酸防治组(Sc/TF组),每组10只。Sham组和I/R组大鼠经静脉注入生理盐水,AS/TF组、S/TF组和Sc/TF组大鼠分别注入AS/TF、S/TF和Sc/TF。于注射后10h麻醉大鼠,开胸暴露心脏,于冠状动脉左前降支中1/2处穿线,Sham组只穿线不结扎,其余4组均结扎造成心肌缺血,90min后解除结扎,再灌注1h。用ELISA检测大鼠血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)、血浆凝血酶鄄抗凝血酶复合物(TAT)和血小板P鄄选择素的含量。Northern印迹杂交检测大鼠缺血区心肌组织中TF基因的转录,HE染色观察缺血区心肌组织的病理变化。结果:大鼠心肌缺血再灌注后,血清cTnI、血浆TAT和P鄄选择素含量明显上升(P<0.001),AS/TF组的上升幅度低于I/R组、S/TF组和Sc/TF组(P<0.05)。Northern印迹杂交显示大鼠缺血区心肌组织TF基因的转录明显增强,AS/TF组TFmRNA的转录弱于I/R组、S/TF组和Sc/TF组。HE染色可见大鼠缺血区心肌组织有灶性坏死。

反义寡脱氧核苷酸对内皮细胞缺氧再复氧损伤组织因子表达的影响

目的研究反义寡脱氧核苷酸对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧再复氧损伤后组织因子(TF)基因转录和表达的影响。方法培养的HUVEC随机等分成为正常对照组、缺氧再复氧组、反义寡脱氧核苷酸转染组(AS/TF组)、正义寡脱氧核苷酸转染组(S/TF组)和错配寡脱氧核苷酸转染组(Sc/TF组)。设计合成针对人TF的反义寡脱氧核苷酸(AS/TF),同时设计TF的正义寡脱氧核苷酸(S/TF)的错配寡脱氧核苷酸(Sc/TF)作为对照。用SuperFectTransfectionReagent(SF)作载体,将AS/TF、S/TF和Sc/TF分别转染AS/TF组、S/TF组和Sc/TF组HUVEC,正常对照组和缺氧再复氧组HUVEC只加SF,不转染任何寡核苷酸。将缺氧再复氧组、AS/TF组、S/TF组和Sc/TF组HUVEC培养24h后,充入氮气,缺氧条件下培养2h,正常条件下培养1h,完成缺氧再复氧模型的制作。收集各组HUVEC,用发色底物法检测HUVEC表面TF的活性,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测HUVEC中的TF抗原(TF:Ag)。并用膨胀裂解法分离细胞核,进行细胞核连缀反应(Run-onreaction)后,Bio-dot狭线印迹杂交检测HUVEC中的TFmRNA。结果与未经缺氧再复氧的正常对照组HUVEC相比,经过缺氧再复氧的HUVEC表面TF活性明显增强(P<0.001),细胞裂解液中的TF:Ag也显著增多(P<0.001),AS/TF组HUVEC的TF活性和TF:Ag的增加幅度低于缺氧再复氧组、S/TF组以及Sc/TF组(P<0.05-0.01)。体外细胞核连缀反应后,Bio-dot狭线印迹杂交显示,HUVEC缺氧再复氧后TF基因的转录增强,AS/TF组HUVECTFmRNA的转录弱于缺氧再复氧组、S/TF组和Sc/TF组。结论HUVEC缺氧再复氧后,TF基因的转录和表达均显著增强,针对TF的反义寡脱氧核苷酸能够明显抑制HUVEC缺氧再复氧损伤后TF基因的转录和表达。提示TF反义寡脱氧核苷酸对于因TF水平升高所致的血栓性疾病可能有潜在的治疗作用。

肿瘤坏死因子-α抑制剂己酮可可碱对糖尿病大鼠阴茎海绵体RhoA/Rho激酶信号通路的影响

目的:研究糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中RhoA/Rho激酶信号通路改变以及肿瘤坏死因子(TNF)吨抑制剂己酮可可碱(PTX)对该信号通路和阴茎勃起功能的影响。方法:SD大鼠分为对照组、糖尿病组和糖尿病药物干预组;高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素注射诱导糖尿病;腹腔埋置微渗透泵持续慢性给药;在体记录阴茎海绵体窦内压(ICP):ELISA检测血清TNF-α浓度;Western blot检测海绵体组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)以及RhoA/Rho激酶信号通路分子的蛋白表达水平。结果:与糖尿病组比,糖尿病药物干预组血清TNF-α浓度明显下降(P<0.01),阴茎海绵体组织中RhoA、ROCK1和p-MYPT1表达下调(P<0.05),eNOS和nNOS表达增加(P<0.05),阴茎ICP指数显著升高(P<0.05)。结论:TNF-α促进阴茎海绵体组织RhoA/Rho激酶信号通路的激活与表达上调,参与糖尿病性勃起功能障碍的发病机制:PTX对糖尿病大鼠的勃起功能有保护作用。

不同浓度酒精任氏液对蛙坐骨神经干双相复合动作电位的影响

目的:定量探究1%~80%酒精任氏液对蛙坐骨神经干双相复合动作电位(AP)的作用及其恢复情况。方法:制备长为6~8cm的蛙坐骨神经干标本,分别将含有0%、1%、2%、4%、8%、16%、32%、48%、64%、80%酒精的标准任氏液通过新加装在神经屏蔽盒中的加药液槽浸泡位于刺激电极和接地电极之间的神经干各5min,用BL-420F系统分别记录由刺激所诱发的双相AP;之后用标准任氏液冲洗5遍,浸泡5min,分别记录冲洗后AP。结果:与标准任氏液相比,≤4%酒精任氏液对AP峰值和传导速度无影响,≥8%酒精任氏液作用后可使AP峰值和传导速度均下降;16%、32%和≥48%酒精任氏液作用后分别使神经干失去产生AP能力的比例为30%、90%和100%。≤32%酒精任氏液作用后冲洗,AP峰值可完全恢复;48%、64%和80%酒精任氏液作用后冲洗,能恢复产生动作电位能力的比例分别为90%、40%和0%,平均峰值分别下降至正常的60%、36%和0%;冲洗后:≤8%酒精任氏液作用后的AP速度与正常无异,≥16%酒精任氏液作用后的AP速度无法完全恢复。结论:不同浓度酒精对AP峰值和传导速度影响不同,这对酒精的合理使用及过度使用后的损伤恢复有参考意义。

不同刺激方式对在体和离体蛙腓肠肌单收缩影响的定量分析

目的:自编程定量分析不同电刺激方式对在体和离体蛙腓肠肌单收缩的影响。方法:实验分为四个组:间接刺激在体标本组(n=12),直接刺激在体标本组(n=8),间接刺激离体标本组(n=12),直接刺激离体标本组(n=8)。分别制备在体和离体蛙腓肠肌标本,施以间接电刺激(经坐骨神经)或直接电刺激(细针灸针刺激电极直接刺入腓肠肌中):强度从0 V开始,周期3 s,增量0.02 V,刺激150次;用生物机能实验系统(BL-420F)实时记录不同强度刺激对肌肉收缩的影响。后续通过自编程辅助处理分析肌肉收缩数据,对单收缩特征参数进行定量比较分析。结果:①对在体标本,与直接刺激比较:间接刺激的阈强度、半高强度和最适强度均更小(P<0.05);最大单收缩幅度更大,收缩期更长,上升斜率更小(P<0.05)。②对离体标本,与直接刺激比较:间接刺激的阈强度、半高强度和最适强度也均更小(P<0.05);最大单收缩幅度更大,收缩期更长,上升斜率更小(P<0.05)。③均采用间接刺激或直接刺激时,与离体标本比较,在体标本单收缩的各项参数均无差异(P>0.05)。结论:不论使用间接刺激或是直接刺激,在体标本和离体标本的单收缩功能特点均无显著差异;但间接刺激比直接刺激更容易触发腓肠肌产生单收缩,且单收缩幅度更高。

虎尾轮降低高尿酸血症大鼠血清尿酸水平作用初探

目的:探讨虎尾轮对高尿酸血症大鼠模型血清尿酸水平的影响。方法:SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、别嘌醇阳性对照组(5.00 mg/kg)、虎尾轮低剂量组(5.25 g/kg)和虎尾轮高剂量组(21.00 g/kg)。除正常对照组外,其余各组腹腔注射黄嘌呤300.00 mg/kg,皮下注射氧嗪酸钾100.00 mg/kg,建立高尿酸血症模型,60 min后灌胃给药,120 min后采血测定血清尿酸浓度。结果:模型组大鼠的血清尿酸浓度为(426.07±107.93)μmol/L,与正常对照组[(94.37±16.66)μmol/L]相比升高(P<0.01),提示黄嘌呤联合氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症大鼠模型效果良好。与模型组相比,虎尾轮低、高剂量组、别嘌醇阳性对照组大鼠血清尿酸浓度均下降(均P<0.01)。结论:虎尾轮具有降低高尿酸血症大鼠血清尿酸水平的作用。

牵拉损伤对蛙坐骨神经干动作电位影响的定量研究

目的:探讨牵拉损伤对蛙坐骨神经干动作电位的影响。方法:建立一种简便、可量化的神经牵拉损伤模型,将60只牛蛙的120根坐骨神经随机分为12组,每组10根,区分左右坐骨神经。对照组不牵拉,实验组分别以0.1、0.2、0.3、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8、3.2 N的拉力牵拉后测量坐骨神经的动作电位幅度、绝对不应期、传导速度和刺激阈值,比较不同牵拉程度对蛙坐骨神经动作电位的影响。结果:蛙坐骨神经干在2.8 N以下的牵拉力作用下可保持形态完整,3.2 N牵拉力则可使神经干发生断裂。随着牵拉力的增大,坐骨神经动作电位幅度及传导速度逐渐减少(P值均<0.05),2.4、2.8 N处理组的绝对不应期延长(P值均<0.05)。除了2.8 N处理组,其他组动作电位的刺激阈值与对照组相比差异无统计学意义(P值均>0.05)。结论:蛙坐骨神经干动作电位的传导速度对牵拉损伤最敏感,而刺激阈值和绝对不应期对牵拉损伤的耐受程度较高。