组织学与胚胎学教学方法探讨

组织学与胚胎学是研究人体微细结构、结构与功能的关系和人体发生发展的科学，属于显微形态学科。其特点是理论性与实践性较强，名词、概念多，形态描述困难，理论知识抽象。因此，组织学与胚胎学历年来被学生认为是难学的基础课，给教学带来很大困难。因此，教师在教学中应想方设法提高学生的识记能力，逐步提高学生的学习兴趣，使其学习潜能、潜力充分发挥，从而在学习中得到事半功倍的效果。笔者在教学中有几点体会，总结如下。

EZH2在胚胎干细胞和肿瘤方面的研究进展

PcG蛋白家族成员EZH2是PCR2复合物的催化活性亚单位,通过甲基化核小体组蛋白H3的27位赖氨酸残基,沉默下游基因。这些下游靶基因大部分具有抑制肿瘤发生和调控干细胞分化的作用,它们的沉默将导致肿瘤的发生和干细胞多向分化潜能障碍。EZH2介导的基因沉默机制和DNA甲基转移酶(DNMTs)以及组蛋白脱乙酰酶(HDACs)之间存在密切的联系。现就EZH2在胚胎干细胞、肿瘤研究和临床应用前景作一综述。

人类面部形态发育关联基因与颜面畸形的研究进展

人类的面部形态极其复杂,各个组成部分及整体形态在很大程度上受到基因及其相关效应的调控,具有很高的遗传度。在正常变异范围内,基因决定了面部形态的多样性;而在正常变异范围之外,基因则与颜面发育畸形相关联。此外,DNA甲基化等表观遗传学调控,也同时受到环境的影响,共同作用于面部形态的发生过程。目前,有关人类面部形态发育关联基因研究的进行,主要依赖于全基因组关联性分析(GWAS)和各种面部成像技术。对于人类面部形态相关基因的研究,除了能够帮助我们更好地预测面部形态及预防和治疗颜面发育畸形外,在进化、生物学、法医学领域都有重要的意义。本文就与人类面部正常形态和颜面发育畸形关联的基因研究进展作一综述。

输卵管卵巢脓肿误诊为卵巢癌1例

1病例资料患者女性,40岁,身高145 cm,体重35 kg,因“左下腹隐痛2个月”于2022年3月10日入住汕头大学医学院第二附属医院。患者在入院2个月前无明显诱因开始出现下腹隐痛不适,无加重,无向他处放射,无伴恶心呕吐,无头晕头痛,无腹胀,无尿频尿急,无肛门坠胀感等不适,近2个月内体重较前下降了约2.5 kg。入院时,检查患者生命体征示:血压121/81 mmHg,心率110次/min,体温36.9℃。体格检查:腹部柔软,左侧附件区轻压痛,无反跳痛,可触及一直径约7 cm硬质肿块。实验室检测示:白细胞9.6×10^(9)/L,糖类抗原125247.4 IU/mL,糖类抗原19-939.06 U/mL。经阴道超声和计算机断层扫描检查均提示左侧附件肿块,直径约8 cm。综合患者症状及上述多项指标诊断考虑卵巢癌可能,予行剖腹探查手术进行诊疗。

广西玉林青少年头发中钙镁含量与身高体重的关系

目的 :通过调查分析青少年青春期发育阶段头发钙镁含量与身高体重的关系 ,探讨影响该人群生长发育的地域性特征。方法 :采用随机抽样方法从玉林地区检测了 710例 (男 4 2 4 ,女 2 86) 7～ 16岁的健康青少年的身高体重指标并用偏振塞曼原子吸收仪对他们的头发样品中钙镁含量进行测定。结果 :男女头发中钙含量与身高成负相关 ;女性头发中镁含量与身高体重成正相关 ;男女各年龄间头发钙含量存在显著性差异。结论 :在该地区青少年生长发育时期 ,头发中钙镁含量随着体质发育的变化发生不断的改变 ,不同性别、不同年龄发育阶段头发中钙镁含量表现出不同的变化特征 。

广西侗族男性青少年头发五种元素含量与身高体重关系

采用随机抽样方法 ,对广西三江侗族 7～ 1 6岁男性青少年头发中的Fe、Zn、Ca、Cu、Mg和身高、体重进行了检测 ,并用相关分析方法研究了身高、体重与头发中五种元素含量的相关关系。结果显示 ,身高、体重均与头发中的Zn和Ca呈负相关关系 (P <0 0 5 )。

EZH2蛋白在食管上皮永生化细胞系和恶性转化细胞系中的表达

目的研究EZH2蛋白在食管上皮永生化细胞系(SHEE)和恶性转化细胞系(SHEEC)中的表达。方法采用免疫细胞化学染色、免疫印迹分析和流式细胞术检测两种细胞系EZH2蛋白的表达。结果两种细胞EZH2蛋白染色均呈阳性,阳性反应定位于细胞核,部分细胞胞浆也有阳性着色。免疫印迹分析表明SHEEC细胞和SHEE细胞的总蛋白、核蛋白在分子质量约90ku的位置均出现特异性印迹条带。SHEE细胞中EZH2蛋白的表达强于SHEEC细胞(P<0.05)。流式细胞术显示EZH2蛋白在两种细胞中均有表达,两者的平均荧光强度无明显差别;阳性细胞率均较高,其中SHEE细胞阳性率高于SHEEC细胞。结论EZH2蛋白在SHEE细胞和SHEEC细胞中高表达可能参与了它们的恶性改变;而EZH2蛋白在两种细胞系中的差异表达可能与细胞的分化程度及来源于胚胎食管上皮细胞相关。

人肝癌细胞冷冻保存方法研究

有关利用普通冰箱-18℃冷冻保存组织及细胞,迄今未见报道.本实验对-18℃冷冻保存人肝癌细胞株 Bel-7402进行实验研究,现报告如下:1 材料和方法人肝癌细胞株 Bel-7402引自中山医科大学实验动物中心,置于含100 mL/L新生牛血清的 RPMI 1640培养液中,在37℃,50 mL/L CO2,饱湿条件下传代培养,细胞贴壁生长.将处于对数生长期的细胞经 D-Hank’s 液洗2次,后用2.5 g/L 胰蛋白酶消化,再用含100mL/L 新生牛血清的1640液洗涤1次.后分别用含0mL/L,5mL/L,10mL/L,15mL/L,20mL/L DMSO的完全培养基（含100mL/L 新生牛血清1640）重新制成细胞悬液.细胞浓度保持在1×106/mL 左右.将细胞悬液置于2mL的硬塑料冻存管中,加盖密封,做好标记.直接迅速地放入-18℃冰箱中冻存.每种浓度各分装12支冻存管,每管装1 mL 悬液.于1 wk,1 mo,2 mo,3 mo 后分别进行融冻.将上述的冻存管,直接从-18℃冰箱中取出,迅速投入40℃水浴中使之迅速完全融化（约1min 左右）.迅速倒入已备好的RPMI 1640营养液中,并用 RPMI 1640洗涤冻存管2次.后离心,再用 RPMI 1640洗涤细胞2次,置瓶培养;同时制成一定量的细胞悬液,取其中0.5mL 的细胞悬液加入4mL/L 台盼蓝染液0.5 mL,混匀,取少许滴于计数板的计数池内,静置2min 后计算细胞存活率（不着蓝色的细胞为活细胞）.细胞存活率=（活细胞数）/（活细胞数+死细胞数）×100%观察指标:①存活率:台盼蓝拒染试验计数;②冻存后复苏的细胞接种入培养瓶,置于含100mL/L 新生牛血清的 RPMI1640培养基中,于37℃,50 mL/L CO2,饱湿培养箱中培养,24 h 后半保留换液,每天观察.2 结果-18℃条件下用不同浓度的 DMSO 为冷冻保护剂,冻存Bel-7402 1 wk,1 mo,2 mo 及3 mo 后细胞存活率及镜下观察到的生长状况见表1.表1 不同浓度 DMSO 对 Bel-7402的影响DMSO 浓度细胞存活率（%） 接种后见细胞贴壁生长天数（mL/L） 1 wk 1 mo 2 mo 3mo 1 wk 1 mo 2 mo 3 mo0 22.1 17.2 8.2 5.6 ————50 84.3 82.3 78.1 70.1 ————100 90.3 86.5 84.1 79.2 1 2 3 5150 89.8 85.3 83.9 78.9 1 2 3 4200 85.1 81.6 78.3 74.0 1 3 4

核基质及其研究方法

真核细胞核内除染色质、核膜与核仁外,还有一个以非组蛋白为主的核基质三维网架结构体系。近年来,核基质的研究在医学、分子生物学等方面取得了许多突破性的进展,具有广阔的前景,已引起人们的广泛关注。本文综述了目前世界上常用的核基质制备方法,全面系统地阐述了它们的优缺点,这将为有关核基质的研究提供借鉴。

树突状细胞对LPAK抗人肝癌细胞的促进作用

目的观察人血树突状细胞（DC）联合LPAK细胞（L）体外抗人肝癌BEL-7402细胞（B）的杀伤效应,并对死亡细胞进行形态学分析.材料和方法LD组为DC＋L＋B,L组为L＋B,二组均采用L：B为5：1和10：1两种放靶比,应用TUNEL法及杀伤细胞检测技术,比较LD和L组的抗肿瘤效应。结果人血DC联合LPAK细胞与单用LPAK细胞的抗肿瘤活性比较,LD组＞L组（P＜0.01）,但二者均能诱导BEL-7402细胞调亡;调亡的肿瘤细胞是TUNEL阳性,在LD组较L组明显增多。结论DC能明显增强LPAK细胞对人肝癌细胞的杀伤活性,但不改变LPAK细胞诱导肿瘤细胞调亡的死亡模式。

细胞因子对树突状细胞抗肝癌作用的影响

目的研究人血树突状细胞（ＤＣ）和细胞因子ＴＮＦ，ＧＭＣＳＦ或ＩＦＮγ联合ＤＣ对淋巴因子和ＰＨＡ激活的杀伤细胞（ＬＰＡＫ细胞）体外杀伤人肝癌细胞株ＢＥＬ７４０２的影响．方法实验分为Ｌ组（ＬＰＡＫ），Ｄ组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ），Ｔ１组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＴＮＦ５０００ｋＵ／Ｌ），Ｔ２组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＴＮＦ５００ｋＵ／Ｌ），Ｇ１组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＧＭ－ＣＳＦ５００ｋＵ／Ｌ），Ｇ２组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＧＭ－ＣＳＦ１００ｋＵ／Ｌ），Ｉ１组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＩＦＮγ５００ｋＵ／Ｌ）和Ｉ２组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＩＦＮγ１００ｋＵ／Ｌ）．每组效靶细胞比分别采用５∶１和１０∶１两种．培养４８ｈ后用中性红比色法检测细胞毒活性．结果Ｌ，Ｄ，Ｔ２和Ｔ１组的细胞毒活性依次增强，各组间差异有显著性（Ｐ＜００１）．Ｇ１和Ｇ２组均高于Ｄ组（Ｐ＜００１），但Ｇ１，Ｇ２组间差异无显著性．Ｉ１，Ｉ２组与Ｄ组相比，也无显著性差异．随效靶比增加，各组细胞毒活性均相应增强．结论ＤＣ能增强ＬＰＡＫ细胞对肝癌细胞ＢＥＬ７４０２的细胞毒活性；ＴＮＦ或ＧＭＣＳＦ与ＤＣ联用，两者有协同作用；但与ＩＦＮγ联用。

抗核抗体滴度值筛查自身免疫病的探讨

目的:探讨抗核抗体(ANA)滴度筛查自身免疫病(AID)的阈值。方法:回顾分析1年内我院确诊ANA阳性AID和非AID患者的初始ANA滴度。按ANA滴度值和每10岁分组。采用t检验分析ANA滴度均值差异,χ~2检验分析组间差异性。结果:ANA阳性女性AID及非AID患者比率均高于男性(P<0.05),女性AID在20~29岁和40~49岁出现高峰。系统性红斑狼疮、类风湿关节炎和原发性干燥综合征的患病人数排前3位,占总数53.17%。AID患者的ANA平均滴度(1:814)高于非AID患者ANA平均滴度(1:155)(P<0.01)。当ANA滴度达到1:320时,其筛查AID敏感性为73.0%,特异性为81.0%。结论:高滴度ANA多出现在AID,当ANA滴度达到1:320时患AID可能性大,需进一步排查特异性抗体,尤其是育龄期女性。

系统性红斑狼疮患者外周血细胞CD45分子亚型分析

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血细胞CD45亚型(CD45RA、CD45RO)表达与SLE病情活动度相关性。方法:收集SLE和正常对照组各12例外周血。流式细胞术检测外周血细胞表面CD45亚型表达率,SLE疾病活动指数2000(SLEDAI-2K)评估SLE患者病情活动度。结果:SLE组外周血淋巴及单核细胞CD45RA表达率低于正常对照组(P<0.05);静止或低活动度SLE患者淋巴及单核细胞CD45RA表达率高于中、重度SLE患者(P<0.05);SLE患者外周血淋巴细胞CD45RA表达率与SLEDAI-2K负相关(r=-2.76)。结论:SLE患者外周血CD45亚型表达率可作为疾病活动性分子标记。

鸡胚脾脏凋亡细胞核及其环孔板的超微结构

目的 :着重观察鸡胚脾脏凋亡细胞核及其环孔板的形态学变化。方法 :用放线菌酮处理第 15天胚龄鸡胚 ,建立鸡胚脾脏细胞凋亡模型 ,用透射电镜进行观察。结果 :凋亡细胞为各类幼稚血细胞 ,以幼稚淋巴细胞为主 ,巨噬细胞未见凋亡。凋亡细胞核在裂解分离为核碎块的过程中出现环孔板 ,凋亡细胞核完全裂解分离后 ,环孔板消失。结论 :环孔板参与凋亡细胞核的分割以及核碎块的包裹 ,提示凋亡细胞核裂解成为核碎块形成凋亡小体的过程是一个主动的过程。

一种培养细胞切片用于免疫细胞化学染色方法的建立

目的 :建立一种培养细胞切片用于免疫细胞化学染色的方法。方法 :采用琼脂糖凝胶沉淀培养细胞 ,形成细胞团。常规石蜡包埋、切片、免疫组织化学染色。结果 :培养细胞分散均匀 ,阳性免疫反应明显 ,定位明确 ,背景清晰。结论

EZH2蛋白在人胎儿器官发育过程中的表达模式

目的:检测果蝇zeste基因增强子人类同源物2(EZH2)蛋白在人胎儿发育过程中的表达模式,为了解EZH2在胎儿发育过程中可能的作用,提供新的、多器官的信息。方法:收集不同胎龄流产或死产胎儿33例及1例新生儿标本。选取食管、胃、小肠、结肠、肝、胰、腮腺、甲状腺、肾上腺、肺、气管、心脏、大血管(主动脉或肺动脉)、肾、膀胱、子宫、卵巢、睾丸、脾、胸腺、大脑等器官组织,经HE染色辨别形态学结构并构建组织芯片后,进行EZH2免疫组化染色检测。结果:在所有检测的上述胎儿器官中EZH2蛋白均有表达,但在不同的组织器官和不同的胎龄其表达水平不同。EZH2蛋白阳性染色主要定位于细胞核,在部分细胞同时也有细胞质阳性染色。结论:EZH2在人类胎儿期的各器官组织均有表达,表达模式有胎儿发育时间的差异性和高度的组织特异性。

DHRS4基因簇缺失型神经母细胞瘤细胞株的克隆和鉴定

目的单克隆培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y-细胞株,并鉴定其在基因水平缺失DHRS4基因簇,包括DHRS4、DHRS4L2和DHRS4L1的基因序列。方法有限稀释法培养实验室偶得的低表达DHRS4基因的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,相差显微镜观察细胞的生长和增殖,PCR、RT-PCR检测DHRS4、DHRS4L2和DHRS4L1基因的DNA和RNA含量,Westernblotting检测DHRS4蛋白的表达。结果筛选得到单克隆神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,在DNA、RNA和蛋白水平均未检测到DHRS4基因簇的DNA序列及表达产物。结论经过克隆低表达DHRS4基因簇的SH-SY5Y细胞,得到纯系的DHRS4基因簇缺失的SH-SY5Y-细胞株,该细胞对于进一步研究DHRS4基因簇的功能和表达调控都是难得的细胞模型。

DHRS4反义RNA结合蛋白的高通量检测与分析

目的 DHRS4是细胞内NADP(H)依赖性视黄醇脱氢/还原酶家族成员4的编码基因。与人类DHRS4基因以头对头形式存在的反义转录本AS1DHRS4,可以调控DHRS4基因的转录。本研究高通量检测分析DHRS4反义RNA结合的蛋白以探讨DHRS4反义转录本调控正义基因表达的作用机制。方法采用甲醛交联细胞内的核酸-蛋白复合物,然后通过生物素标记的奇数组和偶数组寡核苷酸作为探针pull-down AS1DHRS4结合的蛋白,LCMS/MS鉴定后数据库比对分析DHRS4反义RNA结合的蛋白。结果奇数组和偶数组探针pull-down后分别鉴定得到650种和508种蛋白,两组探针检测的共同蛋白434种。大部分蛋白为结合蛋白并与RNA的加工和修饰相关。结论 DHRS4反义RNA结合的蛋白的检测和分析为今后进一步研究反义RNA功能和机制提供了线索和基础。

人体结构命名与社会文化的关联性分析

自古以来,医学有关的推测、假说或者学说与社会文化、哲学以及其它自然科学的发展密切相关并相互影响。本文通过分析不同时期人体结构的命名发现最早很多人体器官的名称来源于古希腊和古罗马神话,科技革命之后新发现的人体微细结构多用发现者的姓名来命名,在当今社会则主要是科学知识和观点对人类社会行为的影响。分析结果显示不同时期的医学科学发展与社会文化具有一定的关联性,并且反映当时社会的意识形态和发展。人体结构命名的分析和分享也有望能促进人体形态学教学与社会科学的联系,增加医学生学习的兴趣和医学人文素养的培养。

利用普通冰箱冻存肿瘤细胞的技术研究

利用普通冰箱-18℃冷冻保存组织、细胞,迄今少见报道.本实验以人肝癌细胞株Bel7402为对象,探讨-18℃冷冻保存方法.1材料与方法1.1 细胞来源及培养方法人肝癌细胞株Bel7402引自中山医科大学实验动物中心,置于含100mL/L新生牛血清的RPMI1640培养液中,在37℃,50mL/LCO2,饱湿条件下传代培养,细胞贴壁生长.1.2 试剂DMSO（AR）由北京化工厂生产;新生牛血清由杭州四季青生物工程材料研究所生产;RPMI 1640由Life Technologies Ins生产;胰蛋白酶（AR）由新疆化学研究所生产.1.3 冻存方法处于对数生长期的细胞经D-Hank’s液洗2次,后用0.25%胰蛋白酶消化,再用含100mL/L新生牛血清的1640液洗涤1次.后分别用含5%、10%、15%、20%DMSO的完全培养基（含100mL/L新生牛血清1640）重新制成细胞悬液.细胞浓度保持在1×106/mL左右.将细胞悬液置于2mL的硬塑料冻存管中,加盖密封,做好标记.直接迅速地放入-18℃冰箱中冻存.每份样品分装4支冻存管,每管装1mL悬液.于1周,1个月,2个月,3个月后分别进行融冻.