腹膜透析液对腹膜间皮细胞TLR2和TLR4表达的影响

目的观察不同浓度葡萄糖（dextrose）腹膜透析液、艾考糊精（ieodextrin）腹膜透析液对人腹膜问皮细胞Toll样受体2（TLR2）和TLR4表达的影响。方法体外培养人腹膜闯皮细胞株第5～10代（HMrSV5，DMEM／F：Z培养基含10％胎牛血清）用于实验研究。MTT检测细胞活力，实验分为5组：阴性对照组、1．50％dextrose组、2．50％dextrose组、4．25％dextrose组、7．5％icodextrin组，应用蛋白免疫印迹法（westernblot）检测TLR2和TLR4的表达水平。结果不同浓度dextrose腹膜透析液作用24h对腹膜间皮细胞TLR2和TLR4的表达无明显影响。作用48h，1．50％dextrose组、2．50％dextrose组、4．25％dextrose组TLR2分别降低（5．5±2．8）％、（31．4±7．5）％、（54．9±1.9）％，TLR4分别降低（32．9±17．6）％、（47.7±13．5）％、（66．4±13．5）％；作用72h，1．50％dextrose组、2．50％dextrose组、4．25％dextrose组TLR2表达分别降低（29．4±14．7）％、（38．9±9．9）％、（63．5±16．5）％，TLR4表达分别降低（59．5±16．8）％、（63．1±9．5）％、（79．2±14．0）％；7．5％icodextrin组TLR2和TLR4表达与阴性对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论dextrose透析液下调HMrSV5 TLR2和TLR4的表达；icodextrin透析液对TLR2和TLR4的表达无显著影响。

葡萄糖腹膜透析液对人腹膜间皮细胞线粒体活性氧的影响

目的观察不同浓度葡萄糖腹膜透析液对人腹膜间皮细胞线粒体活性氧(ROS)的影响。方法体外培养人腹膜间皮细胞株第5至10代(HMr SV5,DMEM/F12培养基含10%胎牛血清)用于实验研究。MTT检测细胞活力,实验分为7组:对照组、1.5%Dextrose组、2.5%Dextrose组、4.25%Dextrose组、线粒体呼吸链复合酶Ⅰ抑制剂Rotenone组(5μM)、线粒体呼吸链复合酶Ⅱ抑制剂Thenoyltrifluoroacetone(TTFA)组(5μM)、线粒体呼吸链复合酶Ⅲ抑制剂Antimycin A组(100μg/ml),应用流式细胞仪检测总线粒体、呼吸线粒体、超氧化线粒体。结果各组作用12h,1.5%Dextrose、2.5%Dextrose、4.25%Dextrose、Rotenone、Antimycin A组总线粒体、超氧化线粒体明显增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),TTFA组与对照组比较无明显差异。结论葡萄糖腹膜透析液作用下人腹膜间皮细胞线粒体活性氧产生增加。

白藜芦醇对腹膜透析液作用下人腹膜间皮细胞线粒体活性氧产生的影响

目的白藜芦醇对腹膜透析液作用下人腹膜间皮细胞线粒体活性氧产生的影响。方法体外培养人腹膜间皮细胞株第5～10代（HMrSV5，DMEM／F12培养基含10％胎牛血清）用于实验研究。MTT检测细胞活力。实验分组：阴性对照组（培养基）、阳性对照组（加入Rotenone，细胞线粒体呼吸链酶复合体I抑制剂）、实验组（1．5％葡萄糖腹膜透析液）、丁预组（白藜芦醇＋1．5％葡萄糖腹膜透析液）。流式细胞仪检测总线粒体、呼吸性线粒体、产活性氧线粒体。结果与阴性对照组比较，实验组总线粒体、产活性氧线粒体增加，差异具有统计学意义。与实验组比较，干预组总线粒体、产活性氧线粒体减少，差异具有统计学意义。结论白藜芦醇可降低含葡萄糖腹膜透析液作用人腹膜间皮细胞后活性氧的产生。