激光扫描共聚焦显微镜术检测单个血小板钙波动方法的探讨

目的 探讨血小板贴壁的简易方法 ,同时 ,观察单个血小板激活前后细胞内钙波动及形态变化的规律。方法 采用多种粘附剂固定血小板 ,利用钙荧光探针 (Fluo- 3/ AM) (终浓度 10～ 2 0μm ol)进行染色 ,在激光扫描共聚焦显微镜检测下加入二磷酸腺苷 ,观察和分析血小板内 Ca2 +浓度及形态变化。结果 多聚赖氨酸促进血小板贴壁固定的效果最佳 ;单个血小板激活后细胞内 Ca2 +浓度为激活前的 12 8%,形态由圆形或椭圆形转为不规则形 ,有空泡、突起形成。结论 多聚赖氨酸是血小板贴壁的理想粘附剂 ,本方法能简易、快捷地监测血小板激活过程中胞浆内钙离子动态变化及形态改变 ,有助于血小板功能的深入研究。