汕头地区36株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药情况分析

目的:了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA,36株)的耐药情况。方法:用聚合酶链反应扩增MRSA携带的mecA基因,并结合PBP2′胶乳凝集试验对临床分离的MRSA进行鉴定。微量肉汤稀释法测定16种抗菌药物对MRSA的最低抑菌浓度。结果:36株MRSA对β-内酰胺类抗生素,庆大霉素及氟喹诺酮类抗生素的耐药率均在80.0%以上,而对利福平的耐药率则较低(41.7%)。MRSA对半合成的四环素耐药率较低,对多西环素和米诺环素的耐药率分别为5.6%和0.0%,未检出万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌。结论:汕头地区分离的MRSA耐药情况严重。

pH值、温度、底物浓度对L1型金属β-内酰胺酶活性的影响

目的研究pH值、温度、底物浓度对L1型金属β-内酰胺酶活性的影响。方法将表达后的L1酶纯化,以亚胺培南为底物,分光光度法测定不同pH值和温度的酶活性及不同底物浓度下的酶反应初速度,观察不同pH值,温度及底物浓度对酶活性的影响。结果L1酶的最适pH为8.2,L1酶在40℃时活性最高。在亚胺培南浓度不超过30μmol/L时,反应初速度随底物浓度增加而呈线性增加,当底物浓度超过100μmol/L时,酶活性反而受抑,初速度明显下降。结论该结果对进一步研究该酶的结构及酶学特性有重要意义,并可为开发有效的L1金属β-内酰胺酶抑制剂提供理论指导。

念珠菌属176株的分离鉴定及其耐药性分析

目的了解医院常见酵母样真菌类型的分布特点及其对常见抗真菌药物的耐药性特点,为临床真菌感染性疾病提供病原学诊断和合理使用抗真菌药物的参考依据。方法采用常规培养分离念珠菌,用显色培养基和VlTEK 32全自动微生物分析仪鉴定念珠菌类型,并参照美国国家临床试验室标准化委员会(NCCLS)推荐的M27-A药敏试验方案的微量稀释法,应用氧化还原指示剂Alamarblue通过比色判定最小抑菌浓度(MIC)值,分别检测分离鉴定出的176株念珠菌属对4种抗真菌药物(氟胞嘧啶、伊曲康唑、两性霉素B、特比萘芬)的体外敏感性。结果在分离鉴定出的176株念珠菌中,白念珠菌114株(64.8%),热带念珠菌23株(13.1%),克柔念珠菌15株(8.5%),光滑念珠菌11株(6.3%),季也蒙念珠菌8株(4.5%),葡萄牙念珠菌5株(2.8%),176株临床分离的念珠菌对抗真菌药物的MIC值呈正态分布,其中白念珠菌对氟胞嘧啶、伊曲康唑、两性霉素B、特比萘芬的耐药率分别为9.6%,8.7%,7.0%,4.4%;热带念珠菌分别为13.0%,0,0,4.3%;克柔念珠菌分别为13.3%,6.7%,0,6.7%;光滑念珠菌分别为9.1%,9.1%,0,0;季也蒙念珠菌分别为12.5%,12.5%,0,12.5%;葡萄牙念珠菌分别为0,0,0,0。结论目前我院临床分离念珠菌中仍以白念珠菌为主,其次是热带念珠菌及克柔念珠菌,比色微量稀释药敏试验方法有较好的可重复性和稳定性,且简单省时,目前常用的抗真菌药对念珠菌属均有良好的体外抑菌作用,均未产生明显的耐药性。

白念珠菌359株分离鉴定及其对5种抗真菌药物的敏感性分析

白念珠菌是人体的正常菌群之一,主要存在人体表面及黏膜等部位,属条件致病菌,近年来由于广谱抗生素、肾上腺皮质激素、免疫抑制剂等药物的广泛使用,各种侵入性操作增多和导管技术的快速发展,使临床科室中白念珠菌感染日益增多,而抗真菌药物的大量使用又容易导致白念珠菌耐药现象也日趋加重,因此了解白念珠菌对抗真菌药物的敏感性和耐药性,对指导临床医师正确地选择抗真菌药物防治白念珠菌感染具有重要意义。本研究2013—2016年。

小檗碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌脂磷壁酸释放的作用研究

目的:探讨小檗碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-Resistance Staphylococcus aureus,MRSA)脂磷壁酸(Lipoteichoic acid,LTA)的释放作用。方法:采用微量肉汤稀释法测定小檗碱对临床分离的MRSA的最低抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC)。酶联免疫法测定MRSA经小檗碱处理后的LTA含量,设置TritonX-100为阳性对照组,阴性对照组不加药。结果:小檗碱对MRSA分离株的MIC值为32μg·ml-1。随着培养时间的增长,各组细菌释放的LTA含量均有上升。与0.02%的Triton X-100相比,8μg·ml-1的小檗碱在各时间点对金黄色葡萄球菌LTA的促释放作用更强。结论:小檗碱可明显促进MRSA的LTA释放,该作用可能与其改变MRSA对β-内酰胺类抗生素耐药性有关。

泌尿生殖道分离的大肠埃希菌耐药性分析

目的了解泌尿生殖道分离大肠埃希菌对抗菌药物的耐药情况，为临床治疗和研究提供依据。方法回顾分析近2a来我院性病门诊患者泌尿生殖道分离的174株大肠埃希菌的耐药情况，细菌鉴定分析及药敏试验采用法国生物梅里埃VITEK32全自动微生物分析系统及其配套试剂。结果174株大肠埃希菌中，超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）阳性96株，阳性率55．2％，ESBLs阴性78例，占全部分离标本的44．8％；大肠埃希菌对氨苄西林、复方新诺明、头孢唑啉的耐药率最高，分别为86．2％、71．3％、63．8％；对呋喃妥因、头孢他啶、哌拉西林／他唑巴坦也保持较低的耐药率，分别为2．3％、4．0％、3．5％；对亚胺培南则全部敏感。产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑啉、头孢曲松及环丙沙星、妥布霉素、复方新诺明的耐药率明显高于非产ESBLs大肠埃希菌。结论治疗大肠埃希菌引起的泌尿生殖道感染应根据药敏情况结果及患者病情进行合理用药，细菌的耐药性分析对指导临床合理用药具有重要意义。

泌尿生殖道分离的大肠埃希菌耐药性分析

目的了解泌尿生殖道分离大肠埃希菌对抗菌药物的耐药情况，为临床治疗和研究提供依据。方法回顾分析近2a来我院性病门诊患者泌尿生殖道分离的174株大肠埃希菌的耐药情况，细菌鉴定分析及药敏试验采用法国生物梅里埃VITEK32全自动微生物分析系统及其配套试剂。结果174株大肠埃希菌中，超广谱p．内酰胺酶（ESBLs）阳性96株，阳性率55．2％，ESBLs阴性78例，占全部分离标本的44．8％；大肠埃希菌对氨苄西林、复方新诺明、头孢唑啉的耐药率最高，分别为86．2％、71.3％、63．8％；对呋喃妥因、头孢他啶、哌拉西林，1也唑巴坦也保持较低的耐药率，分别为2.3％、4．0％、3．5％；对亚胺培南则全部敏感。产ESBLs大肠埃希茵对氨苄西林、头孢唑啉、头孢曲松及环丙沙星、妥布霉素、复方新诺明的耐药率明显高于非产ESBLs大肠埃希菌。结论治疗大肠埃希菌引起的泌尿生殖道感染应根据药敏情况结果及患者病情进行合理用药，细菌的耐药性分析对指导临床合理用药具有重要意义。

实时荧光定量PCR检测女性淋球菌的评价

[目的]评价实时荧光定量PCR检测方法在诊断女性淋球菌(NGH)感染的效果和可行性,试图寻找一种快速而敏感的淋球菌检测方法。[方法]用革兰染色涂片法、培养法和FQ-PCR法检测女性疑诊淋病患者,其中FQ-PCR法采用宫颈拭子、阴道拭子和尿液3种取材方法进行对比。以培养法为“金标准”,分别计算其敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值。并对部分患者治疗前后定量结果进行分析。[结果]培养法检测淋球菌的检出率为6.7%,涂片法的敏感性为60.00%,阳性预期值为54.55%。宫颈拭子FQ-PCR、阴道拭子FQ-PCR和尿液FQ-PCR法的敏感性分别为90%、95%和80%,3种FQ-PCR法特异性高达98%。[结论]FQ-PCR法检测女性淋球菌,具有快速、定量准确、较高敏感性和特异性等优点,可弥补涂片法较粗糙、培养法耗时长的缺点。是一种具有临床应用价值的淋球菌快速定量检测方法。

6种中药单体对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抗菌作用

目的研究6种中药单体对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抗菌作用。方法采用微量肉汤稀释法测定苯唑西林对MRSA的MIC,应用PBP2’胶乳凝集试剂盒对MRSA所产的PBP2’蛋白进行鉴定。采用微量肉汤稀释法测定6种中药单体对MRSA的最低抑菌浓度(MIC)。结果经PBP2’鉴定,16株临床分离菌株均为MRSA。大黄酸的抗MRSA作用最强,MIC在4～16μg/ml,其次为小檗碱,而黄芩苷,黄芩素和穿心莲内酯抗MRSA的作用较弱,绿原酸对MRSA没有抗菌作用。结论大黄酸对MRSA的抗菌作用最强,有望成为抗MRSA的候选药物。