合欢皮提取物抑制血管生成作用的研究

本文采用体外细胞培养法和体内鸡胚尿囊绒膜模型、荷瘤模型检测合欢皮提取物抑制人微血管内皮细胞(HMEC-1)的增殖、迁移活性,观察合欢皮提取物的抑制血管生成情况。发现合欢皮提取物能显著抑制HMEC-1的增殖(IC50为30μg/mL)和迁移,并且呈明显的剂量依赖性。在体内同时具有抑制鸡胚尿囊膜和肿瘤组织中血管生成的作用。

合欢皮提取物抑制血管生成的体内药效学研究

为了探讨合欢皮提取物体内对血管生成的抑制作用。本文采用MTT法和Matrigel plug方法考察合欢皮提取物对人血管内皮细胞(HMEC)增殖和体内Matrigel胶小管形成的影响,运用Lewis肺癌转移小鼠模型,观察合欢皮提取物对小鼠Lewis肺癌的疗效。结果表明合欢皮提取物可明显抑制HMEC细胞的体外增殖(IC50为30μg/mL),并且呈明显的剂量依赖性,同时具有抑制Matrigel plug中的血管新生的作用。合欢皮提取物还能够明显抑制Lewis肺癌肿瘤细胞生长,减少转移病灶。提示合欢皮提取物具有明显抑制血管生成的作用,有可能成为有效的血管生成抑制剂。

王不留行抑制血管形成作用的研究

目的:探讨王不留行对血管生成的抑制作用。方法:采用MTT法及M atrigel p lug法测定王不留行提取物对人血管内皮细胞(HMEC)增殖、迁移及小管形成的影响。结果:王不留行提取物可显著抑制HMEC细胞的体外增殖(IC50为50μg/mL)与迁移,并呈明显的量效关系,同时还能抑制M atrigel p lug模型中的血管新生。结论:王不留行提取物能显著抑制血管生成,有可能成为一种有效的血管生成抑制剂。

白藜芦醇靶点蛋白质的研究

为探讨白藜芦醇在肿瘤细胞中的结合靶点蛋白质。采用亲和甄别磁珠法生物淘洗白藜芦醇的靶点蛋白质。在构建并优化了白藜芦醇结构模型的基础上,通过分子动力学优化分析白藜芦醇与其靶点蛋白质的结构模型,并且使用分子对接分析验证两者的结合作用。结果表明,亲和甄X别磁珠法直接筛选到的能与白藜芦醇的特异性结合的蛋白质是Myosin蛋白质和Actin蛋白质,并且成功构建得到了合理的白藜芦醇分子与Actin蛋白质的复合物的三维结构。通过分析白藜芦醇分子与Ac-tin蛋白活性氨基酸残基结合模式发现,残基Val30,Phe31,Pro32,Thr203,Ala204,Glu205,Pro243,Asp244,等对两者的结合都有重要贡献。白藜芦醇是通过作用于肿瘤细胞的骨架结构蛋白来干扰细胞的有丝分裂过程,从而导致肿瘤细胞的体外增殖受到抑制。

大孔吸附树脂分离纯化合欢皮总皂苷的工艺研究

目的:优化大孔吸附树脂分离纯化合欢皮总皂苷的工艺,探讨有效纯化总皂苷的途径。方法:以静态吸附率,静态洗脱率为考察标准,优选大孔树脂型号,然后以合欢皮总皂苷洗脱率为考察标准,建立合欢皮总皂苷的制备工艺参数。结果:D101型大孔吸附树脂对合欢皮总皂苷吸附、解析能力较强,制备工艺参数为:层析柱径高比为1∶5,上样吸附时间为2h,洗脱流速1.5BV/h,洗脱体积3BV,收集和70%乙醇洗脱部位。结论:重复该工艺得70%乙醇洗脱率相对稳定,平均达到86.06%(n=3),浸膏得率为43.71%,流份中总皂苷含量为51.67%。

合欢皮中抗肿瘤血管新生有效物质的筛选

目的明确合欢皮抗肿瘤血管新生有效部位的有效物质。方法采用有机溶剂萃取、大孔树脂洗脱得到有效组分;常规理化方法进行定性检测,摇瓶法测油水分配系数,SRB法在HMEC-1细胞上进行活性评价。结果 (1)从合欢皮抗肿瘤血管新生有效部位的苷类物质中初步分离得到木质素苷与皂苷,酸水解、三氯甲烷萃取得其苷元。(2)细胞活性检测结果表明,皂苷能明显抑制HMEC细胞的生长,IC50为3.36μg/mL;而苷元和木质素苷不能抑制细胞生长。(3)组分1的油水分配系数logP为-0.79,而组分2的油水分配系数logP为-1.56,组分3的油水分配系数logP为-1.69。结论合欢皮抗肿瘤新生血管有效部位中主要有效物质为皂苷类。根据油水分配系数推测其不能透过细胞膜。

白藜芦醇生物素酯的制备与药效学评价

以DCC为催化剂,首次采用低温化学催化法合成白藜芦醇生物素酯。产物采用Resourse RPC反相色谱柱分离、纯化,并且运用液-质联用进行分析验证。MTT法测定产物体外对HepG2、MCF-7肿瘤细胞的抑制作用。实验结果显示:通过HPLC-MS、紫外扫描分析鉴定证实,分离得到的产物确实是白藜芦醇生物素酯,它保留了白藜芦醇原有的体外抗肿瘤活性。此种化学合成方法反应条件温和,容易控制,操作方便。合成得到的白藜芦醇生物素酯,为下一步探讨白藜芦醇的结合蛋白提供简单有效的分子工具。

合欢皮总皂苷对大鼠循环系统的影响

目的观察合欢皮总皂苷低剂量组(5.25mg·kg-1)和高剂量组(26.25mg·kg-1)对大鼠血液循环系统及血液常规的影响。方法SD雄性大鼠,实验分为低剂量组(5.25mg·kg-1)、高剂量组(26.25mg·kg-1)及生理盐水(NS)对照组,生物信号记录系统记录给药后1h的血压、心电图(ECG)、脉搏及血常规的变化。动脉插管测定血压针式电极测定Ⅱ导联心电图,尾动脉记录脉搏波,细胞计数法测定血液常规。结果(1)血压:与正常对照组相比,低剂量组无显著变化,高剂量组明显升高。(2)脉搏:与正常对照组相比,低剂量组搏动频率、幅值和上升斜率均无显著差异;高剂量均增加。(3)心电图:与正常对照组相比,低剂量组无显著变化,高剂量组P-R间期和Q-T间期延长,P波、QR波S和T波幅值升高。(4)血液常规:低剂量对血常规无显著影响,高剂量使白细胞计数、血小板计数和血红蛋白含量明显下降。结论高剂量合欢皮总皂苷对大鼠血液及循环系统有一定的毒性作用。

生物素化白藜芦醇的分离纯化与药效学评价

以DCC为催化剂,采用低温化学催化法合成生物素化白藜芦醇。产物采用Resourse RPC反相色谱柱分离、纯化,并且运用液质联用进行分析验证。MTT法测定产物体外对HepG2、MCF-7肿瘤细胞的抑制作用。实验结果显示:通过HPLC-MS、紫外扫描分析鉴定证实,分离得到的产物确实是生物素化白藜芦醇,其保留了原有的体外抗肿瘤活性。此种化学合成方法反应条件温和,容易控制,操作方便。合成得到的白藜芦醇的生物素化衍生物,为下一步探讨白藜芦醇的结合蛋白提供简单有效的分子工具。

王不留行提取物抑制血管生成的药效学研究

目的探讨王不留行提取物对肿瘤新生血管生成的抑制作用。方法采用鸡胚尿囊膜血管生成模型分析王不留行提取物对新生血管生成的影响,用免疫组化染色法检测荷瘤小鼠C51结肠癌细胞中CD31表达的变化。观察王不留行提取物对小鼠Lewis肺癌转移模型的影响。结果王不留行提取物具有明显抑制鸡胚尿囊膜血管新生成的作用,能够明显降低荷瘤小鼠C51结肠癌细胞中的CD31表达,显著抑制Lewis肺癌肿瘤细胞的生长、转移,稳定病灶。结论王不留行提取物具有明显抑制肿瘤新生血管生成的作用,提示其有可能成为新的血管生成抑制剂。