氯霉素-BSA和氯霉素-OVA偶联物的制备与鉴定

目的:制备氯霉素(CAP)-牛血清白蛋白(BSA)及氯霉素(CAP)-卵清白蛋白(OVA)的偶联物并进行鉴定。方法:分别采用混合酸酐法和重氮化法制备CAP-BSA及CAP-OVA的偶联物,前者是将CAP先与琥珀酸酐反应生成CAP-半琥珀酸酯(CAP-HS),再进行混合酸酐反应。将反应产物CAP-HS与BSA结合,合成CAP-HS-BSA偶联物;后者是将CAP分子中的苯环上的硝基还原为氨基后,进行重氮化处理,然后分别与BSA和OVA连接,合成CAP-BSA和CAP-OVA复合物。结果:紫外图谱分析表明,CAP-BSA、CAP-OVA和CAP-HS-BSA的紫外最大吸收峰分别是262nm、213nm和275nm;计算得CAP与载体蛋白BSA、OVA及HS的偶联比分别为5∶1、12∶1和22∶1。结论:成功的制备CAP-BSA及CAP-OVA的偶联物,为免疫动物制备抗CAP的抗体奠定了基础。

己烯雌酚免疫原的合成及其抗血清制备

目的: 制备人工合成的己烯雌酚 (DES)的多克隆抗体。方法: 采用碳二亚胺法将DES与牛血清白蛋白 (BSA)交联, 经紫外扫描估算其交联比为 22, SDS- PAGE实验初步表明DES与BSA发生交联。用双向免疫琼脂扩散实验检测经DES -HS- BSA多次免疫新西兰白兔的抗血清。结果: 合成的DES- HS- BSA复合物, 具有免疫原性, 并产生了针对小分子DES的抗体。结论: DES免疫原的合成是成功的, 为其试剂盒的研制提供了条件。