野生与养殖刀鲚肌肉营养成分的比较分析

为了比较野生与养殖刀鲚(Coilia nasus)肌肉营养成分差异,利用常规方法对野生(捕自长江靖江段)和养殖刀鲚(以活饵为食)肌肉的一般营养成分和氨基酸含量进行测定。结果表明,野生刀鲚肌肉鲜样中粗蛋白质和灰分含量均显著低于养殖刀鲚(P<0.05),而粗脂肪含量为则显著高于养殖刀鲚(P<0.05),两者的水分含量无显著差异(P>0.05)。野生和养殖刀鲚肌肉鲜样中均测出18种氨基酸,但在含量上养殖刀鲚绝大多数氨基酸均显著高于野生刀鲚(P<0.05)。其中,养殖刀鲚氨基酸总量高出野生刀鲚11.97%,鲜味氨基酸总量高出野生刀鲚14.12%。根据氨基酸评分(ASS)和化学评分(CS),野生和养殖刀鲚的第一限制性氨基酸均为色氨酸,而养殖刀鲚的必需氨基酸指数(EAA I)显著高于野生刀鲚(P<0.05)。由此得出,以活饵为食的养殖刀鲚,其营养品质不会降低,完全可以替代野生刀鲚。

家蝇抗菌肽的抑菌动力学研究及其机理初探

利用鼠伤寒沙门氏菌针刺诱导家蝇幼虫表达抗菌肽,对抗菌肽的抑菌动力学进行研究,并通过抗菌肽对不同细菌动力学特性的研究出发对抗菌肽抑菌作用机制进行了探讨。研究发现抗菌肽样品的活性与作用时间有关,24h内出现一到两个活性峰,同一抗菌肽样品对不同细菌的抑菌动力学有差异,抗菌肽的抑菌动力学机制应该与它的抑菌作用机制有关。通过电镜观测、细胞磷代谢、紫外吸收物测定以及抗菌肽与细菌DNA相互作用结果可知,微生物诱导家蝇表达的抗菌肽样品不仅能够造成细菌细胞的快速坍塌破裂而且能够破坏细胞核心,与DNA结合。抗菌肽抑菌动力学的解释:微生物诱导产物中含有两部分抗菌肽,一部分抗菌肽能造成细胞膜的快速坍塌破裂形成第一个活性峰;另一部分抗菌肽可进入细胞,破坏细胞核心,造成紫外吸收物大量外泄形成第二个活性峰。

低聚蔗果糖及其5-羟甲基糠醛抗氧化能力研究

目的:研究微波辅助合成低聚蔗果糖(W-FOS)及其在合成过程中产生的5-HMF(5-hydroxymethylfurfural)抗氧化能力。方法:测定W-FOS及5-HMF清除DPPH、ABTS+能力;清洁级昆明小鼠60只,随机分6组:对照组、高脂组(脂肪含量20%)、高脂+0.5%E-FOS(酶法合成低聚果糖)组、高脂+0.5%W-FOS+5-HMF组(5-HMF含量分别为0.20%、0.02%、0.0%)。饲喂5w后测定机体抗氧化指标水平。结果:W-FOS具有清除DPPH、ABTS+能力,且5-HMF能提高其清除力;E-FOS、W-FOS+5-HMF组能使高脂日粮小鼠血脂水平得到显著恢复(P<0.05);W-FOS+5-HMF组能使高脂日粮小鼠血脂水平显著降低(P<0.05);添加含中低、高水平5-HMF的W-FOS分别能显著恢复高脂日粮小鼠血浆T-AOC、CAT、MDA、ROS和CAT、ROS水平;含中低水平5-HMF的W-FOS对高脂日粮小鼠肝脏GSH-Px、MDA、ROS的保护作用优于高水平5-HMF的W-FOS。结论:W-FOS和5-HMF都具有清除DPPH、ABTS+的能力;0.5%W-FOS及其5-HMF水平为0.00%～0.02%时,对高脂日粮小鼠的血脂水平、血浆、肝脏的抗氧化能力均具有良好的保护作用。

马鹿茸血酶解肽体内免疫功能及抗氧化功能关系的研究

本文分别选用由木瓜蛋白酶水解天山马鹿茸血获得的肽Ⅰ、肽Ⅱ以及原血为受试样品,研究天山马鹿茸血及其酶解肽对小鼠免疫功能和抗氧化功能的影响,其中肽Ⅰ、肽ⅡDH分别为18.1%、12.2%时,清除OH.能力最强,清除率为50.8%。分别测定了脏器指数,脾细胞增殖实验,血清中溶血素和抗体生成细胞的含量以及小鼠血清总抗氧化能力、SOD活力和MDA含量。结果表明:与对照组相比较,肽Ⅱ组能极显著提高小鼠体液和细胞免疫功能,加强小鼠的抗氧化功能(P<0.01或P<0.05)。此外,具有较强抗氧化活性的肽显示出了很强的免疫活性(P<0.05)。

微波固相合成葡-半乳低聚糖的工艺研究

在微波辐射条件下,以乳糖为原料,固相合成低聚糖。考察了微波功率、反应时间、催化剂用量、引发剂用量等因素对反应的影响,通过实验得出最佳工艺条件为:微波功率1000W,微波处理时间3min,催化剂的添加量3.5%,引发剂水的添加量20%,产率为82.71%。并经高效液相色谱分析,确定合成产物中三糖占6.99%、四糖占5.06%、五糖及其以上占61.67%。

丹酚酸B对高脂日粮小鼠抗氧化与淋巴细胞亚群免疫功能调节的研究

本文研究了丹酚酸B(Salvianolic acid B,Sal B)对饲喂高脂日粮小鼠抗氧化及淋巴细胞亚群免疫功能调节的影响。选取4w龄雄性C57BL/6小鼠40只,随机平均分成4组:即正常对照组(正常日粮),高脂日粮组(高脂日粮),Sal B低剂量组(高脂日粮+0.002%Sal B)和Sal B高剂量组(高脂日粮+0.004%Sal B)。八周后测定血脂、全血和脾脏活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、抗氧化酶活性及MDA含量;采用FACSAria流式细胞仪分析小鼠外周血及脾脏淋巴细胞亚群。结果表明:Sal B可显著降低高脂日粮小鼠血脂水平,全血及脾脏ROS水平,提高抗氧化能力,提高CD4+/CD8+T细胞比例及CD19+细胞百分率(P<0.05)。低剂量Sal B组抗氧化与免疫调节功能好于高剂量Sal B组。

硫酸锌和蛋氨酸锌对小鼠早期生长的影响研究

目的:研究硫酸锌(ZnSO4)、蛋氨酸锌(Zn-Met)两种锌补加形式对断奶小鼠早期生长的影响及其机制。方法:选取21d断奶的雄性小鼠90只(KM种)随机分3组,每组设三个重复,每重复10只。对照组饲喂玉米淀粉—酪蛋白半纯合基础日粮(含锌11.67mg/kg),ZnSO4组、Zn-Met组分别在基础日粮中添加ZnSO4、Zn-Met30mg/kg(以锌计)。饲喂10d,测定小鼠体重、血浆生长激素含量、生长激素受体基因及胰岛素样生长因子1(IGF-1)基因mRNA表达水平。结果:两种锌源均能提高小鼠体重及血清锌含量,且Zn-Met促长效果优于ZnSO4。两种锌源对生长激素水平、生长激素受体基因表达无显著影响,但均能显著提高IGF-ImRNA表达水平;Zn-Met处理小鼠IGF-ImRNA表达量显著高于ZnSO4处理。结论:ZnSO4和Zn-Met对生长激素水平、生长激素受体基因表达无影响,但均上调IGF-ImRNA表达量。Zn-Met较ZnSO4更能有效提高小鼠体重和上调IGF-ImRNA表达。

抗乙肝病毒卵黄IgY理化特性研究

用ELISA技术研究了抗乙肝卵黄免疫球蛋白(抗HBV-IgY)对温度、酸碱度、胃蛋白酶、胰蛋白酶及反复冻融的稳定性。在大于75℃的高温条件下,抗HBV-IgY是极不稳定的;在pH4.0～10.0范围内,抗HBV-IgY活性相对稳定;对胃蛋白酶具有良好的抵抗能力(pH>4.0),对胰蛋白酶非常敏感,经2h酶解处理,抗HBV-IgY的结合活性完全丧失;抗HBV-IgY具有很好的耐反复冻融的特性。

绿色荧光蛋白在环磷酰胺处理小鼠胸腺中表达的研究

目的:探讨绿色荧光蛋白(GFP)在环磷酰胺(CY)处理小鼠胸腺中的表达。方法:将质粒pEGFP-c3和梭华SofastTM基因转染试剂按一定比例配制成转染液,经腹腔注入3组小鼠(每组15只)进行转染。转染24h后分别注射0.5、1、2mg/只的CY,并设对照组(15只)。18h后称小鼠体质量,然后处死动物,无菌取胸腺并称重,用PBS洗出细胞,制成单细胞悬液,于荧光显微镜下观察GFP的表达情况。结果:GFP可在小鼠胸腺中表达,且GFP+细胞数与CY的剂量相关。高剂量的CY处理可导致胸腺明显萎缩、胸腺细胞总数及GFP+细胞数的减少。结论:转染质粒pEGFP-c3并经CY处理的小鼠及正常对照组小鼠的胸腺中均可表达GFP,但CY处理的小鼠胸腺中GFP的表达情况明显低于对照组小鼠。

槲皮素对高脂日粮小鼠学习记忆能力的影响研究

探讨槲皮素对高脂日粮小鼠学习记忆的影响及可能机制。4周龄C57B/L雌性小鼠45只,随机分为三组:对照组(基础日粮),高脂组(约20%脂肪),槲皮素组(高脂日粮+0.01%槲皮素)。第26周进行Morris水迷宫实验,实验结束后取小鼠大脑皮层和海马组织测定氧化应激指标,荧光定量PCR检测海马组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、核转录因子Nrf2及血红素单加氧酶(HO-1)的基因表达。结果显示,高脂组小鼠学习记忆能力显著下降,脑组织出现明显的氧化应激,Nrf2、HO-1和BDNF基因表达显著下调;槲皮素干预后,大脑氧化应激程度减轻,Nrf2、HO-1和BDNF基因表达上调,学习记忆能力得到显著改善。槲皮素改善高脂日粮小鼠学习记忆,可能与上调Nrf2/HO-1通路及BDNF的基因表达有关。

乳酸杆菌通过定植和提供免疫信号调节宿主免疫反应

提取了Lactobacillussp.的肽聚糖,用AffymetrixMOE430A基因芯片研究了肽聚糖对机体免疫细胞基因表达的影响。结果发现,乳酸杆菌肽聚糖可以刺激免疫细胞Th1型免疫反应相关基因的表达,可能激活TLR-NF-κB相关信号通路,同时,不同剂量的肽聚糖可能通过调节Tollip的表达,影响TLR-NF-κB信号通路的激活,从而调节细胞因子的表达。

不同微生物诱导家蝇幼虫表达抗菌肽的特性

研究不同微生物诱导家蝇幼虫表达的抗菌肽特性。用3种不同的病源菌通过针刺感染的方法诱导家蝇幼虫表达抗菌肽,通过Sephadex G25分离,用Hult mark改进法和抑菌圈测定法作抑菌试验,用毛细管电泳(CE)分析不同微生物诱导得到的抗菌肽样品差异,检测抗菌肽的热稳定性和酸碱耐受性。发现不同微生物诱导产生的家蝇抗菌肽具有广谱抑菌性,但不同样品对不同病源菌抑菌活性有差异,不同测定抑菌效果的方法对抑菌结果有影响,各种抗菌肽样品CE蛋白谱具有明显不同。抗菌肽样品都具有热稳定性和酸碱耐受性。说明不同微生物诱导产生的家蝇抗菌肽类型以及抗菌肽含量与诱导源有关,抗菌肽为家蝇幼虫体内固有成分,诱导增加了抗菌肽的表达量同时刺激新抗菌肽的产生。用志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌诱导家蝇幼虫可产生较多含量高活性好的抗菌肽。

外源核苷酸对小鼠消化道抗氧化作用的影响

目的:研究断奶小鼠在受到微生物刺激时,日粮核苷酸的抗氧化作用,并探讨其可能机制。方法:用脂多糖(LPS)构建氧化应激模型,检测外源核苷酸对小肠组织中谷胱甘肽(GSH)、超氧化歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)以及髓过氧化物酶(MPO)的变化。结果:在LPS刺激后的4h和18h,日粮核苷酸均能升高肝脏和小肠组织的GSH水平和SOD、GSH-PX活性,降低肠道MDA、MPO含量以及血清ALT。结论:日粮核苷酸有助于增强氧化应激小鼠的抗氧化能力,降低组织NO含量与NO合成酶活性,保护机体免受氧化损伤,外源核苷酸可以减少核苷酸从头合成时与GSH争夺前体物质,增加了GSH水平,进一步增加了SOD、GSH-PX等抗氧化酶的活性。

猪油与椰子油对小鼠抗氧化能力及血脂代谢的影响

目的通过给小鼠灌胃不同油脂和长期饲喂添加不同油脂的饲料,研究高脂情况下猪油与椰子油对小鼠氧化应激及血脂代谢的影响。方法选取8w龄,体重为20～24克的健康昆明种小鼠24只,分为3组,灌胃生理盐水、猪油、椰子油,用化学发光法检测灌胃后0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5h血液中自由基生成情况。24只同样的昆明种小鼠分别饲喂正常饲料、高脂饲料(添加猪油组、添加椰油组),6w后屠宰,保留血浆及组织用于抗氧化及血脂等指标的测定。结果正常饲料组与猪油饲料组、正常饲料组与椰子油饲料组、猪油饲料组与椰子油饲料组的自由基水平;血浆及肝脏抗氧化能力;血脂代谢水平;血浆脂蛋白脂肪酶和肝脂酶的活性;动脉粥样硬化指数都有显著差异(P<0.05)。结论猪油比椰油能够显著降低小鼠的抗氧化能力且升高血脂。

硫辛酸对高脂饮食小鼠肠道氧化还原状态及消化吸收功能的影响

目的:探讨抗氧化剂硫辛酸(LA)对高脂饮食小鼠肠道氧化还原状态调节及消化吸收功能的影响。方法:24只C57BL/6雄性小鼠,随机分为3组:即对照组(正常饮食)、高脂组(高脂饮食)、LA组(高脂饮食+0.1%LA),6周后测定活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和总抗氧化能力(TAC)以及脂肪酶、淀粉酶、胰蛋白酶等消化酶指标,同时用Affymetrix MOE430A基因芯片分析肠道抗氧化、消化吸收相关功能基因的表达。结果:与高脂组相比,LA组MDA和ROS含量显著降低(P<0.05),SOD和TAC明显升高,消化酶活力有所恢复。抗氧化剂LA上调高脂饮食小鼠肠道抗氧化相关功能基因的表达水平,恢复物质消化、吸收和转运等相关功能基因的表达水平。结论:高脂引发氧化-抗氧化系统失衡,硫辛酸通过直接清除自由基以及提高抗氧化通路相关功能基因的表达水平解除氧化应激而有助于防治高脂引发的肠道功能损伤。

硫辛酸对高脂日粮小鼠肠道氧化还原状态与微生物菌群的影响

目的:研究高脂饲粮条件下,添加不同剂量硫辛酸(LA)对小鼠肠道自由基及微生物菌群的影响。方法:将40只昆明种雄性小鼠随机分成4组,设置正常组、高脂组(16·1%猪油),高脂饲粮中分别添加0·05%和0·1%LA每组,饲喂六周,观察对小鼠血浆组织自由基、抗氧化能力及肠道乳杆菌、大肠杆菌数量的影响。结果:高脂饲料可导致小鼠氧化应激,显著升高血浆、肠道组织自由基水平,降低总抗氧化能力,并降低肠道内乳杆菌数量,增加大肠杆菌数量(P<0·05);而高脂添加LA能显著降低小鼠血浆和肠道自由基水平及MDA含量(P<0·05),提高肠组织SOD活性和肠道与血浆总抗氧化能力(P<0·05),达到接近正常组水平。高脂日粮添加LA使肠道乳杆菌数量显著高于高脂组(P<0·05),大肠杆菌数量显著降低(P<0·05),并与LA添加量呈显著量效关系(P<0·05)。结论:小鼠消化道氧化应激引起肠道微生物区系的紊乱,调整肠道氧化还原状态能够使微生物区系恢复正常。

三种植物蛋白质酶解物对自发性高血压大鼠降血压效应的比较

目的:观察体外具有抑制血管紧张素转化酶(ACE)活性的绿豆、花生和大米分离蛋白的碱性蛋白酶alcalase酶解物的降血压效应。方法:通过模拟体内消化道环境研究经胃肠道消化酶处理对绿豆、花生和大米分离蛋白alcalase酶解物抑制ACE活性的影响,并利用自发性高血压大鼠(SHR)评定三种酶解物的体内降血压作用。结果:花生分离蛋白和大米分离蛋白alcalase酶解物经不同消化酶处理后活性均显著下降,绿豆分离蛋白酶解物经不同消化酶处理后其活性均有不同程度的提高。以600mg/kg bw的剂量灌胃后三种蛋白质酶解物对SHR均显示出降血压作用,绿豆最强,而花生最弱。三种蛋白质酶解物对SHR的心率均无影响。结论:绿豆、花生和大米分离蛋白质alcalase酶解物均具有降血压作用,但其体外抑制ACE活性与体内降血压效应不一致。

高脂日粮对小鼠消化系统自由基水平与物质消化、吸收的影响

选取6周龄雄性昆明种小鼠40只,按体质量随机分成4组:即对照组(正常日粮),高脂日粮组(粗脂肪含量18%),LA组(高脂日粮+0.05%LA和高脂日粮+0.1%LA)。小鼠预饲1周后正式饲喂,饲喂5周后进行代谢试验。6周后测定小鼠消化系统自由基水平和肠道黏膜脂肪酶、蛋白酶和淀粉酶活性。结果表明,长期饲喂高脂日粮可显著提高小鼠消化系统自由基水平(P<0.05),降低肠道淀粉酶和蛋白酶活性(P<0.05),但肠道脂肪酶活性显著提高(P<0.05);小鼠对粗脂肪和粗蛋白消化率降低(P<0.05),蛋白沉积率降低(P<0.05)。添加0.05%LA后,能显著降低高脂饲喂小鼠消化系统自由基水平(P<0.05),提高小鼠对粗脂肪、粗蛋白消化率(P<0.05),和蛋白沉积率(P<0.05);添加0.1%LA可使小鼠全血及系统自由基水平恢复到接近正常水平。由此得出:高脂摄入,增加小鼠消化系统自由基生成,降低消化酶活性、降低机体对营养物质的消化吸收。适宜的LA添加可有效清除小鼠消化系统自由基,提高消化酶活性,提高营养物质的利用率,缓解营养性氧化应激。

高蛋白日粮可诱导小鼠消化系统产生氧化应激

试验选用30只C57BL/6J雄性小鼠,随机分成3组,分别饲喂对照日粮(20%酪蛋白)、高蛋白日粮(60%酪蛋白)和添加半胱胺的高蛋白日粮(60%酪蛋白+60mg/kg半胱胺)。饲养2周后屠宰。结果表明:与对照组比,高蛋白组消化系统中超氧阴离子和丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05);而超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)含量以及总抗氧化能力(T-AOC)则显著下降(P<0.05);添加半胱胺后,氧化和抗氧化平衡状态有所改善。上述结果表明,高蛋白日粮能够诱导小鼠消化系统产生氧化应激。

丹酚酸B对高糖日粮小鼠消化系统自由基水平的影响

本文研究了丹酚酸B(salvianolic acid B,SalB)对灌注及长期摄食高糖小鼠活性氧自由基(reactive oxy-gen species,ROS)的影响。结果表明:灌胃高糖使小鼠全血ROS于1.5h达到最大值,灌胃葡萄糖的ROS释放量显著高于蔗糖(P<0.05);灌胃高糖使小鼠血糖浓度于0.5h达到最高,灌胃葡萄糖的小鼠血糖浓度有高于灌胃蔗糖的小鼠血糖浓度的趋势(P>0.05);添加SalB后并没有改变灌胃高糖小鼠的全血ROS释放和血糖浓度变化趋势,但有降低血糖趋势(P>0.05),显著减少了ROS的释放量(P<0.05);添加SalB后显著降低长期高糖膳食小鼠的全血、肝脏、胰腺、胃、十二指肠、空肠和回肠的ROS释放量。