miRNA-155靶向Wnt5a调控转录激活子3信号通路在支气管哮喘发生发展中的作用

目的 miRNA-155在支气管哮喘中的作用及其机制研究较少,文章拟探讨miRNA-155通过靶向Wnt5a调控转录激活子3(STAT3)信号通路在大鼠支气管哮喘发生发展中的作用。方法将SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、阴性对照组和miRNA-155表达抑制组,每组12只,正常对照组大鼠腹腔注射等渗盐水,阴性对照组大鼠在支气管哮喘模型建立后转染NC拮抗物;miRNA-155表达抑制组大鼠在支气管哮喘模型建立后转染miRNA-155拮抗物;分别于转染后7 d麻醉处死,采用HE染色法观察肺组织损伤情况;采用qRT-PCR法检测各组大鼠肺组织miRNA-155、Wnt5a mRNA表达水平;采用双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-155与Wnt5a的靶向关系;采用Western blot法检测各组大鼠肺组织Wnt5a、STAT3、p-STAT3的蛋白表达水平;采用ELISA法分别检测肺组织匀浆IL-6、TNF-α表达水平。结果与正常对照组比较,阴性对照组大鼠肺功能指标FVC、FEV1及PEF均降低而FEV1/FVC升高(P<0.05),且miRNA-155表达水平升高,Wnt5a基因mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05);与阴性对照组相比,miRNA-155表达抑制组大鼠肺功能均有不同程度的提高(P<0.05),miRNA-155表达水平降低(P<0.05),Wnt5a基因mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验分析结果显示,miRNA-155和Wnt5a能够靶向结合;与正常对照组大鼠肺组织STAT3、p-STAT3的蛋白表达水平[(0.20±0.05)、(0.22±0.05)]相比,阴性对照组[(1.35±0.05)和(1.11±0.05)]和miRNA-155表达抑制组大鼠[(1.01±0.06)、(0.52±0.07)]均升高(P<0.05),miRNA-155表达抑制组大鼠肺组织STAT3、p-STAT3蛋白表达水平较阴性对照组降低(P<0.05);与正常对照组大鼠肺组织IL-6、TNF-α表达水平[(95.92±8.78)、(88.99±8.12)pg/mL]相比,阴性对照组[(206.11±18.63)、(177.54±13.12)pg/mL]和miRNA-155表达抑制组[(156.17±9.55)、(131.94±9.25)pg/mL]均升高(P<0.05);与阴性对照组相比,miRNA-155表达抑制组大鼠肺组织IL-6、TNF-α表达水平降低(P<0.05)。结论 miRNA-155通过靶向Wnt5a激活STAT3信号通路促进支气管哮喘的发生发展。