抗大肠埃希氏菌F41粘附素特异单克隆抗体的研制及其初步应用

应用杂交瘤技术获得7株能稳定分泌 F41特异单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为L10、B10、C32、B1、E7、E40和 B49。在直接凝集试验、酶联免疫吸附试验和间接荧光试验中,这7株单克隆抗体对所试的31株肠道菌中所有 F41阳性菌株都发生反应,与 F41阴性菌株则无反应性。抗原竞争 ELISA 试验结果发现,这些单克隆抗体是针对 F41粘附素上相同或十分相近的抗原决定簇。采用胶体金标记技术和免疫电镜证实,这些抗原决定簇在 F41粘附素的每条纤毛上多次重复出现。体外肠吸附抑制试验表明,7株 F41特异单克隆抗体对 B41M 菌株具有很强的抑制能力,对 B41菌株则必须用 F41和 K99单克隆抗体同时作用才具有完全的肠吸附抑制效果。本文用直接酶标单克隆抗体建立的酶联免疫斑点试验具有高度的特异性和灵敏性,可广泛用于现场快速诊断。

沙门氏菌鞭毛抗原的快速提纯及其单抗反应性测定

在改良M-肉汤中培养3株不同血清型沙门氏菌,离心沉淀后细菌悬浮于少量生理盐水中,用1N盐酸将pH调至2.0,室温30分钟,离心去细菌,上清用67％饱和硫酸铵沉淀,然后过Sephacry1 S-300柱,这三种鞭毛经电子显微镜。