标本类型和离心时间对临床常用心肌损伤标志物检测结果的影响

目的探讨肝素锂抗凝血浆、乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝血浆、血清等3类标本和缩短离心时间对肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌红蛋白(Myo)等心肌损伤标志物检测结果的影响。方法使用VITROS 5600生化免疫分析仪检测28例3类标本的心肌损伤标志物,并进一步行cTnI的EDTA-K2干扰试验;将21例肝素锂抗凝标本在4 000r/min分别离心2和10min后检测心肌损伤标志物。采用SigmaPlot 11.0统计软件进行分析。结果 EDTA-K2抗凝组cTnI比肝素锂抗凝组低约15%,血清组CK-MB比肝素锂抗凝组高出大概7%,差异均有统计学意义(P<0.05)。干扰试验证实EDTA-K2对检测cTnI存在负干扰。将肝素锂抗凝标本离心2min与10min的心肌损伤标志物比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论肝素锂抗凝血浆、EDTA-K2抗凝血浆和血清的心肌损伤标志物检测结果间存在不一致性;缩短离心时间既不影响检测结果,又能缩短标本周转时间,使临床和患者获益。

缺血修饰白蛋白检测在胸痛病人中的临床应用

目的:探讨缺血修饰白蛋白(IMA)对急性心原性胸痛的早期诊断价值。方法:研究91例急诊胸痛病人,分为ACS组(胸痛<6h)、AM I组(胸痛>6h)。分别测定IMA、肌钙蛋白(cTnI)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-M B)及记录ECG。结果:ACS组(胸痛<6h)、AM I组(胸痛>6h)IMA区间范围分别为84.6±4.2ABSU/m l,81.9±2.4ABSU/m l,与健康对照组62.0±5.5ABSU/m l相比,有显著性差异(P<0.05)。结论:IMA与常规检测方法相比,是诊断心原性胸痛的灵敏指标,但不能很好区分缺血与梗死。其灵敏度高,特异性较差,故其阴性预测价值更大。

高效毛细管电泳分离氨基酸对肝癌肝硬化的诊断价值

目的:建立高效毛细管电泳分离氨基酸的方法探讨肝癌肝硬化患者血清氨基酸变化, 方法:用毛细管电泳法对17种常见氨基酸的2,4-二硝基氟苯(DNFB)衍生物进行了分离研究,优化缓冲液浓度、pH、有机溶剂及表面活性剂对分离影响的条件,对正常人, 肝癌及肝硬化患者各20例的血浆游离氨基酸进行测定. 结果:在优化条件下,17种氨基酸除亮氨酸,异亮氨酸外均达到基线分离.9 min内分离18种氨基酸,线性在20- 1 000μmol/L范围,回收率为77.5-113.3%,批内精密度2.6-11.4%,批间精密度5.8-19.7%.肝硬化组酪氨酸、丝氨酸、色氨酸明显升高,丙氨酸明显下降;肝癌组酪氨酸、半胱氨酸、缬氨酸明显升高,脯氨酸明显下降. 结论:以浓度为30 mmol/L pH9.9的硼砂溶液含150 g/L异丙醇为运行缓冲液,分离氨基酸DNFB衍生物效果最佳,分离时间30 min, 出峰17个.毛细管电泳测定血浆游离氨基酸对肝癌肝硬化诊断和治疗有一定指导意义.

超敏肌钙蛋白Ⅰ在心肌炎诊断中的临床意义

目的旨在通过超敏肌钙蛋白Ⅰ(TropI)和传统肌钙蛋白I(cTnI)检测方法的比较,探讨其在心肌炎诊断中的临床意义。方法收集2009～2010年30例门诊和住院患者血液标本,检测血清肌钙蛋白值,比较两种方法的精密性、相关性、阳性率以及离散率。结果 TropI的变异系数(CV)(6.948%)明显低于cTnI(18.190%),两种方法检测肌钙蛋白的均值与相应的质控靶值比较差异无统计学意义(P>0.05)。对这两种方法检测的结果进行回归分析显示相关性良好(r2=0.981 2);两种方法检测患者血清cTnI组平均CV值(7.655%)高于TropI组平均CV值(2.116%),差异有统计学意义(P<0.01)。结论两种方法在检测血清肌钙蛋白的作用上基本一致,但是Tropi在重复性方面优于传统的cTnI检测,可能更有利于心肌炎的诊断。

不同检测系统常用血清酶测定结果对比及偏倚评估

目的通过对不同检测系统进行方法学比对分析,探讨各检测系统之间测定临床常用血清酶是否具有可比性。方法依据美国临床和实验室标准化研究所EP9-A2文件要求,每天随机从临床样本中抽取8份不同浓度的血清样本,分别用两种检测系统进行相关血清酶测定,共测定5d,记录检测结果,并进行相关回归分析。根据直线方程计算在某医学决定水平处的预期偏倚(B^c)和预期偏倚的95%可信区间,并判断偏倚性是否可以接受。结果除天门冬氨酸氨基转移酶在低值处的预期偏差(绝对值)大于1/4允许总误差外,不同检测系统对常用血清酶测定结果的偏差在允许误差范围内,其检测结果具有可比性。结论当用2个以上检测系统检测同一检验项目时,应进行方法学比对和偏倚评估,判断其临床可接受性能,以保证检验结果的可比性。

应用参考方法对血清γ-谷氨酰基转移酶的测量不确定度评定

目的 探讨临床实验室对测量不确定度的评定方法和程序.方法 应用国际临床化学联合会（IFCC）公布的参考方法对参考实验室外部质量评价计划（RELA）样本进行γ-谷氨酰基转移酶（GGT）催化活性浓度测定,明确反映整个过程测量不确定度分量的来源,按A,B两类不确定度的计算方式对各分量分别进行评定,计算合成标准不确定度,最后取95%置信区间,计算出扩展不确定度.结果 GGT催化活性浓度均值为3.492 μkat/L,合成标准不确定度为0.032 μkat/L,取95%置信区间,包含因子k=2,则扩展不确定度（U）为0.064 μkat/L.结论 临床实验室的测量不确定度与传统的测量误差相比,更能反映测量的水平,对临床检验工作有一定的指导意义.

高血压病患者血清中CNP水平的变化

目的:探讨单纯高血压病与高血压伴左心肥厚患者血中C型利钠肽(CNP)的变化。方法:用EL ISA法测定56例单纯高血压病组(Ⅱ级以上)、48例高血压伴左心肥厚组患者血清CNP及B型利钠肽(BNP),并与96例健康对照组比较。结果:单纯高血压病组和高血压伴左心肥厚组与健康对照组CNP浓度有显著差异(P<0.01);而单纯高血压病组与高血压伴左心肥厚组差异亦有显著性(P<0.01);另外64例伴并发症组与40例无并发症组CNP值亦有显著差异(P<0.01);血清CNP的P25为9.35ng/L,P50为11.75ng/L,P75为18ng/L,血清各组CNP在各百分位点的分布与正常对照组在各百分位点的分布相比有显著性差异。结论:血清CNP在高血压病时增高,可作为临床监测治疗的一个良好指标。

两种试剂测定血清磷的方法对比及偏差评估

目的探讨在生化分析仪上使用A试剂和B试剂检测血清磷(Phosphor)的可行性。方法按照EP 9-A文件提供的方法,每天取临床标本8份,分别用两种试剂测定样本磷,共测定5 d,记录检测结果,并对两种试剂进行偏差评估。结果采用两种试剂测定的血清磷结果的相关系数为0.99,无方法间的离群点,测定结果的偏差在允许误差范围内。结论经过方法对比及偏差评估确定在该实验室使用B试剂代替A试剂是可行的。

新的心肌缺血标志物——缺血修饰白蛋白

最近研究认为,缺血修饰白蛋白(IMA)是评价心肌缺血较好的生物标志物,临床可用于急性心肌缺血的早期诊断,排除诊断急性冠脉综合征及其危险分层,我国目前关于IMA的研究报道尚不多见。现对IMA发现、形成机制及其临床应用研究进展作一综述。

基质金属蛋白酶与急性冠状动脉综合征

炎症在急性冠状综合征中起着重要的作用,冠脉病变的严重程度主要是由斑块的稳定性及其组成而非大小决定的,近年来人们对基质金属蛋白酶的结构和功能有了一定的了解,现就这方面的研究作一综述。

不同检测系统胆固醇、三酰甘油的偏倚分析

目的通过不同检测系统的方法学比对分析,探讨各检测系统之间测定血清胆固醇、三酰甘油是否具有可比性。方法依据美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)EP9-A2文件要求,每天随机从临床样本中抽取8份不同浓度的血清样本,分别用两种检测系统进行胆固醇、三酰甘油的测定,共测定5d,记录实验结果,将结果进行相关回归分析,计算在医学决定水平处的预期偏倚(B^c)和预期偏倚的95%可信区间,并判断偏倚是否可以接受。结果不同检测系统对胆固醇、三酰甘油测定结果的偏倚在允许误差范围内,两者结果具有可比性。结论当用两个以上的检测系统检测同一检验项目时,应进行方法比对和偏倚评估,判断其临床可接受性能,以保证检验结果的可比性。

长链非编码RNA调控肿瘤细胞自噬的研究进展

肿瘤的发生是一个多因素参与的复杂过程，通常与癌基因的激活或抑癌基因的失活有关。长链非编码RNA（lncRNA）在肿瘤的形成过程中发挥了重要的生物学作用，而自噬作为细胞内的一种代谢过程．也在肿瘤细胞分化、转移及耐药等方面扮演了重要角色，成为近年来的研究热点。深入研究和了解lncRNA与自噬的关系以及具体作用机制，有助于揭示肿瘤发生、发展，为肿瘤的诊断和治疗提供新的思路。

竞争性内源性RNA与胃癌发病机制研究进展

最近研究认为长链非编码RNA（1ncRNA）、假基因（pseudogenes）、环状RNA（circRNA）等可以作为竞争性内源性RNA（ceRNA），结合微小RNA（miRNA），调控靶蛋白水平。这一新型的网络调控模式，优化了传统意义上的“由miRNA到RNA”线性作用方式，已然成为非编码RNA领域的研究热点。ceRNA网络调控异常，则会影响机体正常的生命活动，导致疾病的发生乃至肿瘤的形成。本文综述了ceRNA的主要成员及其参与胃癌发生机制的研究进展，以期为胃癌研究及临床诊断、治疗等提供新思路。

miR-202对多发性骨髓瘤细胞中B细胞活化因子表达的调节作用及其机制

目的研究miR-202对多发性骨髓瘤U266细胞中B细胞活化因子（BAFF）的调节作用及其机制。方法通过生物信息学软件预测miR-202与BAFF的潜在结合位点，构建荧光素酶报告基因载体。将人类miR-202—3P模拟物（has—miR-202—3P—mimics）、人类miR-202—3P抑制物（has—miR-202，inhibitor）、siBAFF及各自阴性对照转染U266细胞，采用实时荧光定量PCR和Westernblot法验证miR-202对BAFF的调控作用，采用细胞增殖实验和流式细胞仪检测转染后U266细胞的增殖能力和凋亡情况。结果未转染组、has—miR-202-3P—mimics转染组、has—miR-202—3P-inhibitor转染组和siBAFF转染组U266细胞中BAFFmRNA的相对表达量分别为1．0404-0．057、0．5734-0．073、1．205±0．097和0．368±0．052。与未转染组比较，has—miR-202-3P—mimics转染组和siBAFF转染组U266细胞中BAFFmRNA的表达明显下调（P〈0．05）。Westernblot法检测BAFF蛋白的表达结果与mRNA基本一致。未转染组、has．miR-202．3P．mimics转染组、has—miR-202-3P—inhibitor转染组和siBAFF转染组U266细胞的A450。。值分别为1．063±0．052、0．7144-0．045、0．9364-0．066和0．764±0．053。与未转染组比较，has—miR-202—3P-mimics转染组和siBAFF转染组U266细胞的A450nm值明显降低（P〈0．05）。未转染组、has-miR-202-3P-mimics转染组、has—miR-202-3P—inhibitor转染组和siBAFF转染组U266细胞的凋亡率分别为26．2％、49．6％、21．1％和30．7％。与未转染组比较，has．miR-202．3P—mimics转染组U266细胞的凋亡率明显增加（P〈0．05）。has—miR-202-3P—mimics转染组U266细胞中p-JNK蛋白的表达水平降低。结论miR-202通过调节BAFF的表达对U266细胞发挥抑制增殖和诱导凋亡的作用。JNK／SAPK信号通路参与了miR-202对BAFF的调控作用。

毛细管电泳法分离血清中乳酸脱氢酶同工酶

目的利用还原型辅酶I(NADH)在340nm波长处特异性吸收峰,建立用毛细管区带电泳在线检测人血清中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的方法。方法实验中采用未涂层毛细管,长60cm,内径75μm,pH9.4(23℃)二氨基二甲基1,3丙二醇(AM2P)缓冲液含20mmol/L氧化型辅酶I(NAD+)、51.6mmol/L乳酸锂。结果在25min内完成电泳分离,乳酸脱氢酶同工酶1(LDH1)、乳酸脱氢酶同工酶5(LDH5)纯品各自均可得到较好峰形,而且LDH1、LDH5纯品的混合物亦可得到完全分离,在分析正常人血清与肝癌患者血清时,其结果与美国Helena公司REP全自动琼脂糖电泳结果一致,取得满意效果。结论该法快速、低耗,具有较好的推广应用价值。