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HIV TAT蛋白研究进展
被引量:
3
1
作者
宗扬勇
邵启祥
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2008年第3期263-266,共4页
关键词
人免疫缺陷病毒反式激活蛋白
蛋白转导
药物治疗
下载PDF
职称材料
小鼠GITR真核表达载体的构建及表达
2
作者
沈培
郑东
+9 位作者
刘艳
田洁
赵银霞
刘青玲
朱晨露
马洁
苏兆亮
马斌
许化溪
王胜军
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2011年第4期329-332,共4页
目的:构建小鼠GITR(mGITR)的真核表达载体,转染COS-7细胞表达小鼠GITR蛋白。方法:用TRIzol试剂抽提小鼠脾细胞总RNA,经RT-PCR扩增出GITR全长基因,构建真核重组载体pIRES2-EGFP-mGITR,经鉴定后采用脂质体介导DNA法转染COS-7细胞。结果:...
目的:构建小鼠GITR(mGITR)的真核表达载体,转染COS-7细胞表达小鼠GITR蛋白。方法:用TRIzol试剂抽提小鼠脾细胞总RNA,经RT-PCR扩增出GITR全长基因,构建真核重组载体pIRES2-EGFP-mGITR,经鉴定后采用脂质体介导DNA法转染COS-7细胞。结果:从小鼠脾细胞中成功扩增得到GITR全长基因。重组载体pIRES2-EGFP-mGITR转染COS-7细胞后,经荧光显微镜观察可见绿色荧光,提取蛋白后经蛋白质印迹鉴定有目的蛋白mGITR。结论:成功构建了小鼠GITR基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-mGITR,转染COS-7细胞后mGITR蛋白获得成功表达。
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关键词
mGITR
真核表达
转染
COS-7细胞
下载PDF
职称材料
次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型EL/4细胞系的建立
3
作者
龚文
禚娅
+2 位作者
蒋砚秋
潘晓园
邵启祥
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2011年第4期285-288,共4页
目的:建立稳定的次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine guanine phosphoribosyltransferase,HG-PRT)缺陷型EL/4细胞系,为小鼠T细胞杂交瘤的制备奠定基础。方法:通过乙基甲磺酸(ethyl methanesulfonate,EMS)提高EL/4细胞的基础突...
目的:建立稳定的次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine guanine phosphoribosyltransferase,HG-PRT)缺陷型EL/4细胞系,为小鼠T细胞杂交瘤的制备奠定基础。方法:通过乙基甲磺酸(ethyl methanesulfonate,EMS)提高EL/4细胞的基础突变率,用8-氮杂鸟嘌呤(8-Azaguanine,8-AG)从5μg/ml到80μg/ml浓度逐渐筛选出对8-AG有稳定抗性的细胞株EL/4,并对其生物性状与基因表型进行鉴定。结果:通过筛选获得能够耐受高浓度(80μg/ml)8-AG的EL/4细胞,并能长期在20μg/ml 8-AG培养液中正常生长,但不能耐受次黄嘌呤-氨甲蝶呤-胸腺嘧啶(hypoxanthine-aminopterin-thymidine,HAT)培养基(3 d全部死亡),RT-PCR未能从该EL/4细胞中检测出HGPRT基因的表达,由此可见该EL/4细胞的HGPRT基因发生突变或者缺失。将该细胞经克隆后获得单克隆细胞株,并命名为突变的EL/4(mutant EL/4,mEL/4)。该细胞株能与磁珠分离的小鼠脾脏来源的CD4+T细胞在PEG作用下顺利进行融合。结论:成功建立了HGPRT缺陷型EL/4细胞系mEL/4,为制备T细胞杂交瘤奠定了基础。
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关键词
乙基甲磺酸
8-氮杂鸟嘌呤
次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶
突变
EL/4淋巴瘤细胞
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职称材料
题名
HIV TAT蛋白研究进展
被引量:
3
1
作者
宗扬勇
邵启祥
机构
江苏大学基础医学与医学技术学院免疫研究室
出处
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2008年第3期263-266,共4页
关键词
人免疫缺陷病毒反式激活蛋白
蛋白转导
药物治疗
分类号
R373.9 [医药卫生—病原生物学]
R512.91 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
小鼠GITR真核表达载体的构建及表达
2
作者
沈培
郑东
刘艳
田洁
赵银霞
刘青玲
朱晨露
马洁
苏兆亮
马斌
许化溪
王胜军
机构
江苏
大学
基础医学
与医学
技术
学院
免疫
学
研究室
出处
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2011年第4期329-332,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(81072453
30972748
+3 种基金
30871193
30910103087)
江苏省自然科学基金资助项目(08KJB320002)
江苏省医学科研基金资助项目(200952)
文摘
目的:构建小鼠GITR(mGITR)的真核表达载体,转染COS-7细胞表达小鼠GITR蛋白。方法:用TRIzol试剂抽提小鼠脾细胞总RNA,经RT-PCR扩增出GITR全长基因,构建真核重组载体pIRES2-EGFP-mGITR,经鉴定后采用脂质体介导DNA法转染COS-7细胞。结果:从小鼠脾细胞中成功扩增得到GITR全长基因。重组载体pIRES2-EGFP-mGITR转染COS-7细胞后,经荧光显微镜观察可见绿色荧光,提取蛋白后经蛋白质印迹鉴定有目的蛋白mGITR。结论:成功构建了小鼠GITR基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-mGITR,转染COS-7细胞后mGITR蛋白获得成功表达。
关键词
mGITR
真核表达
转染
COS-7细胞
Keywords
mGITR
eukaryotic expression
transfection
COS-7 cells
分类号
R393 [医药卫生—基础医学]
下载PDF
职称材料
题名
次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型EL/4细胞系的建立
3
作者
龚文
禚娅
蒋砚秋
潘晓园
邵启祥
机构
江苏
大学
基础医学
与医学
技术
学院
免疫
学
研究室
出处
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2011年第4期285-288,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30671984)
江苏省自然科学基金资助项目(BK2008231)
文摘
目的:建立稳定的次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine guanine phosphoribosyltransferase,HG-PRT)缺陷型EL/4细胞系,为小鼠T细胞杂交瘤的制备奠定基础。方法:通过乙基甲磺酸(ethyl methanesulfonate,EMS)提高EL/4细胞的基础突变率,用8-氮杂鸟嘌呤(8-Azaguanine,8-AG)从5μg/ml到80μg/ml浓度逐渐筛选出对8-AG有稳定抗性的细胞株EL/4,并对其生物性状与基因表型进行鉴定。结果:通过筛选获得能够耐受高浓度(80μg/ml)8-AG的EL/4细胞,并能长期在20μg/ml 8-AG培养液中正常生长,但不能耐受次黄嘌呤-氨甲蝶呤-胸腺嘧啶(hypoxanthine-aminopterin-thymidine,HAT)培养基(3 d全部死亡),RT-PCR未能从该EL/4细胞中检测出HGPRT基因的表达,由此可见该EL/4细胞的HGPRT基因发生突变或者缺失。将该细胞经克隆后获得单克隆细胞株,并命名为突变的EL/4(mutant EL/4,mEL/4)。该细胞株能与磁珠分离的小鼠脾脏来源的CD4+T细胞在PEG作用下顺利进行融合。结论:成功建立了HGPRT缺陷型EL/4细胞系mEL/4,为制备T细胞杂交瘤奠定了基础。
关键词
乙基甲磺酸
8-氮杂鸟嘌呤
次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶
突变
EL/4淋巴瘤细胞
Keywords
ethyl methanesulfonate
8-Azaguanine
HGPRT
mutation
EL/4
分类号
R393 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HIV TAT蛋白研究进展
宗扬勇
邵启祥
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2008
3
下载PDF
职称材料
2
小鼠GITR真核表达载体的构建及表达
沈培
郑东
刘艳
田洁
赵银霞
刘青玲
朱晨露
马洁
苏兆亮
马斌
许化溪
王胜军
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2011
0
下载PDF
职称材料
3
次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型EL/4细胞系的建立
龚文
禚娅
蒋砚秋
潘晓园
邵启祥
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2011
0
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