IL-33促进非小细胞肺癌EMT的研究

目的探讨IL-33参与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的过程及临床意义。方法生物信息学分析IL-33在非小细胞肺癌中的生物学行为。https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/网站下载非小细胞肺癌芯片GSE5843和GSE102287进行生存分析。免疫组织化学评估非小细胞肺癌中蛋白IL-33、ST2的表达,免疫荧光法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的组织定位和分布。体外CCK-8法检测IL-33刺激下A549、SK-MES-1细胞的细胞活力,划痕实验和Transwell实验检测IL-33促进A549、SK-MES-1细胞迁移和侵袭能力。免疫印迹实验检测最佳浓度IL-33处理下ST2、E-cadherin、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-9(Matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)蛋白的表达。结果生物信息学分析发现IL-33可通过EMT参与NSCLC的进展和转移,生存分析提示IL-33与非小细胞肺癌预后有关,IL-33高表达者,预后差(P<0.05)。免疫组化结果显示与癌旁组织相比,非小细胞肺癌中IL-33、ST2高表达,E-cadherin表达下降,Vimentin明显增多(P<0.05),且在肺腺癌与肺鳞癌之间的表达无明显差异(P>0.05)。IL-33可促进A549、SK-MES-1细胞增殖、迁移和侵袭。与HPAEpiC细胞相比,A549、SK-MES-1细胞高表达ST2、Vimentin、MMP-9、E-cadherin(P<0.05),IL-33刺激下A549、SK-MES-1细胞ST2、Vimentin、MMP-9表达明显升高,E-cadherin明显下降(P<0.05)。结论非小细胞肺癌中IL-33通过ST2促进EMT过程,促进非小细胞肺癌进展。

NKD1促进结肠癌细胞迁移的机制研究及临床意义

目的:探讨NKD1在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌患者临床病理特征因素间的相关性,以及研究其在结肠癌细胞迁移中的作用,并明确其调控上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白ZEB1的具体机制,为转移性结肠癌提供新的治疗靶点。方法:使用生物信息学初步分析NKD1在结肠癌细胞中的表达情况及其与临床病理特征因素间的相关性。通过收集98对来自常州市武进人民医院的结肠癌患者组织样本及相关临床信息验证生物信息学结果,绘制生存曲线。划痕实验、Transwell实验证明NKD1促进结肠癌细胞迁移。qPCR、western blot实验验证NKD1在蛋白水平调控ZEB1。Western blot、免疫沉淀等实验深入研究NKD1调控ZEB1的具体机制。结果:NKD1在结肠癌组织中高表达,其表达水平与分化程度、肿瘤T分期及是否远处转移等临床病理特征因素具有相关性;NKD1高表达与结肠癌患者的不良预后相关;过表达NKD1后促进结肠癌细胞的迁移,敲除NKD1后则结果相反;NKD1在蛋白水平调控ZEB1,并能够维持ZEB1的蛋白稳定性;高表达NKD1通过调控ZEB1与自噬相关蛋白LC3的结合抑制ZEB1的自噬降解。结论:NKD1与结肠癌患者的不良预后相关,并且可以通过调控ZEB1与自噬相关蛋白LC3的结合抑制ZEB1的自噬降解,从而促进结肠癌细胞的迁移。

四阴性乳腺癌的研究现状

三阴性乳腺癌(TNBC)通常在年轻女性群体中被发现,是最具有侵袭性的一种乳腺癌亚型。随着对TNBC临床研究的逐渐深入,雄激素受体(AR)显示出其作为治疗靶点的重要作用。而目前对于AR阴性的TNBC,即四阴性乳腺癌(QNBC)的研究有限,缺乏明确的治疗标准。将QNBC作为乳腺癌的独立亚型对于提高精准治疗的疗效具有十分重要的意义。本文综合阐述了近年来对于QNBC的研究进展,简要介绍了QNBC的流行病学,总结了AR的检测方法,梳理了其潜在的治疗靶点,以期为QNBC患者提供更为有效的治疗方案。

NKD1可促进结肠癌细胞的葡萄糖吸收:基于激活YWHAE基因的转录活性

目的通过研究NKD1与YWHAE调控关系,分析NKD1促进肿瘤细胞增殖的新作用机制。方法实验分组:(1)对照组:转染pcDNA3.0质粒的HCT116细胞、转染NC-siRNA的SW620细胞、正常HCT116细胞、正常SW620细胞;(2)实验组:转染pcDNA3.0-NKD1质粒的HCT116细胞、转染NKD1 siRNA的SW620细胞、HCT116-NKD1细胞、SW620-nkd1-/-细胞、转染pcDNA3.0-YWHAE质粒的SW620-nkd1-/-细胞。采用Western blot及qRT-PCR实验检测结肠癌细胞中过表达或敲除NKD1对YWHAE的蛋白及mRNA水平变化的影响。采用染色质免疫共沉淀(ChIP)技术检测NKD1是否结合YWHAE基因启动子区域。通过双荧光素酶报告基因实验分析NKD1对YWHAE基因启动子活性的调控作用。此外,采用免疫荧光实验分析NKD1与YWHAE相互作用情况。葡萄糖检测实验分析NKD1对肿瘤细胞吸收葡萄糖的调控作用。结果与对照组相比,过表达(或敲除)NKD1不仅在蛋白水平增强(或降低)YWHAE的表达,还在mRNA水平增加(或降低)其表达(P<0.001)。ChIP实验显示NKD1蛋白能够结合YWHAE启动子序列,双荧光素酶报告基因实验表明在结肠癌细胞中过表达(或敲降)NKD1能显著增强(或降低)YWHAE启动子的转录活性(P<0.05)。此外,免疫荧光结果显示NKD1蛋白与YWHAE蛋白在结肠癌细胞内相互结合。葡萄糖水平分析实验表明,敲除NKD1明显降低结肠癌细胞对葡萄糖的吸收水平(P<0.01),而在敲除NKD1的细胞中过表达YWHAE,则细胞对葡萄糖吸收能力得到恢复(P<0.05)。结论结肠癌细胞中NKD1蛋白通过激活YWHAE基因的转录活性,促进其表达,从而促进肿瘤细胞对葡萄糖的吸收。

隐藏在“隐源性机化性肺炎”中的肺腺癌1例

一名60岁女性患者出现咳嗽咳痰和双侧肺部病变。经皮经胸CT引导肺穿刺活检后,诊断为隐源性机化性肺炎(cryptogenic organizing pneumonia,COP),患者接受皮质类固醇治疗。尽管治疗反应良好,但她在三个月内出现了肺部孤立性结节,为明确肺部结节性质,再次肺穿刺确诊为肺腺癌。我们认为机化性肺炎(OP)是继发性机化性肺炎(SOP),由原发性肺癌继发引起。笔者报道隐藏在“隐源性机化性肺炎”中的肺腺癌1例。

以软组织肿块及骨转移为首发症状的分化型甲状腺癌诊治1例

一位72岁老年女性因发现左胸部及右臀部无痛性肿块3年来院就诊。体格检查中未发现甲状腺异常,常见肿瘤标志物无明显异常,遂根据臀部磁共振检查结果初步诊断为神经源性肿瘤,但经穿刺病理活检明确为转移性甲状腺滤泡状癌。后行手术切除甲状腺原发灶,术后病理明确为甲状腺滤泡状癌合并甲状腺乳头状癌,术后患者拒绝行靶向治疗,在外院给予放射性碘治疗及局部放射治疗,转移灶保持稳定,未出现新发病灶,至最近随访时间患者生存期已经超6年。