Y-box结合蛋白1通过沉默信息调节因子1 mRNA稳定性调节抑制人颗粒细胞凋亡在早发性卵巢功能不全中的作用与机制

目的:探讨Y-box结合蛋白1(YBX1)调节沉默信息调节因子1(SIRT1)对颗粒细胞增殖和凋亡的影响,研究YBX1和SIRT1在早发性卵巢功能不全(POI)患者及卵巢功能正常患者间表达水平差异及临床意义。方法:留取2022年6月至2023年7月于江苏大学第四附属医院生殖医学中心进行体外受精(IVF)/卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕的POI患者(POI组)及卵巢储备功能正常患者(对照组)的颗粒细胞和血清,利用免疫印迹(WB)检测YBX1蛋白表达水平;利用实时荧光定量核酸扩增法(RT-qPCR)检测YBX1及SIRT1 mRNA表达水平,并分析血清中其与卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_(2))、抗苗勒管激素(AMH)、窦卵泡数(AFC)的相关性;利用5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)、细胞计数试剂8(CCK8)检测细胞增殖、原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡;RT-qPCR检测细胞内增殖细胞核抗原(PCNA)、B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达情况;RNA免疫沉淀(RIP)实验检测YBX1与SIRT1的相互作用。结果:与对照组患者相比,POI组患者颗粒细胞和血清中YBX1蛋白及SIRT1 mRNA的表达降低(P<0.05);血清中YBX1、SIRT1 mRNA表达与FSH、LH负相关(r<0,P<0.05),与E_(2)、AMH、AFC正相关(r>0,P<0.05);在颗粒细胞中上调YBX1后SIRT1蛋白表达量、SIRT1 mRNA的稳定性、EdU阳性率、细胞活性、PCNA mRNA表达量、Bcl2/BAX比值均增加(P<0.05),Caspase-3 mRNA表达量、TUNEL阳性率均降低(P<0.05)。结论:YBX1和SIRT1在POI患者中表达水平显著下调,且其表达水平与临床卵巢功能指标相关;YBX1结合SIRT1 mRNA增强其稳定性,可能促进颗粒细胞增殖,抑制细胞凋亡,提示YBX1和SIRT1有望成为POI诊疗的新靶点。

蚕蛹补肾胶囊联合胰激肽原酶对少弱精子症患者精子质量的改善作用观察

目的:观察蚕蛹补肾胶囊联合胰激肽原酶治疗少弱精子症的临床效果,为男性不育症治疗提供可选择的方案。方法:根据入选标准收集少弱精子症不育患者62例,随机分为观察组31例和对照组31例,观察组患者给予蚕蛹补肾胶囊(1 g/次,2次/日)联合胰激肽原酶(240 U/次,3次/日)治疗,对照组患者单纯接受胰激肽原酶进行治疗,治疗3个月后观察两组患者的精子质量参数,包括精子密度、总活动率、前向活动率、畸形率、精液量、液化时间、pH值。结果:观察组治疗后精子密度、总活动率、前向活动率、畸形率较治疗前显著改善(P<0.05),其中精子密度、总活动率、前向活动率方面的改善程度显著高于对照组(P<0.05)。结论:蚕蛹补肾胶囊联合胰激肽原酶,能够显著改善少弱子精症患者的精子质量。

hCG和u-FSH序贯治疗低促性腺激素性腺功能减退症疗效和安全性分析

目的:探究低促性腺激素性腺功能减退症应用尿促卵泡素(u-FSH)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)序贯治疗的效果。方法:本次实验对象均需选自2017年1月至2018年6月期间在本院进行治疗的12例低促性腺激素性腺功能减退症患者,全部开展u-FSH和hCG序贯治疗,总结患者治疗后的效果。结果:患者治疗三个月后的睾酮、促黄体生成素、促卵泡成熟激素水平以及精液质量、第二性征发育情况均优于治疗前。同时用药后也未产生较严重的不良反应。结论:低促性腺激素性腺功能减退症应用尿促卵泡素(u-FSH)和绒毛膜促性腺激(hCG)序贯治疗的效果较好且安全性较高,有助于第二性征发育。

LncAC079944.2通过miR-149-5P/EFNA1轴调控子宫内膜容受性

目的筛选并鉴定与子宫内膜容受性(endometrial receptivity,ER)密切相关的lncRNA:lncAC079944.2,并进一步探究其调节ER的作用与机制。方法根据对GEO数据库的两个数据集共71个子宫内膜组织样本转录组数据的加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA),筛选出与ER显著相关的RNAs。对2021年10月至2022年10月期间在江苏大学第四附属医院生殖中心就诊患者的子宫内膜样本分析验证生物信息学筛选的RNAs与其临床表达的一致性。应用细胞功能学实验分析筛选的lncAC079944.2对Ishikawa细胞(子宫内膜癌细胞,替代子宫内膜细胞)增殖、迁移和侵袭等功能的影响。通过双荧光素酶报告基因、qRT-PCR、免疫印迹实验等验证lncAC079944.2、EFNA1的表达模式以及和筛选的miRNA之间的相互作用关系,并验证三者在细胞功能上的影响。结果LncAC079944.2在分泌中期表达较分泌早期明显上调(P<0.001),反复种植失败(recurrent implantation failure,RIF)患者分泌中期表达较正常患者分泌中期明显降低(P<0.001)。在干扰lncAC079944.2的表达后,Ishikawa细胞的增殖(P=0.004)、迁移(P=0.001)与侵袭(P<0.001)能力均有不同程度的减弱。qRT-PCR结果显示lncAC079944.2的表达后,EFNA1的表达也呈现下降趋势(P=0.030),而加入miR-149-5p inhibitor后,EFNA1的表达有所恢复(P=0.034)。同样地,在加入miR-149-5p inhibitor后,Ishikawa细胞因lncAC079944.2的表达受到干扰而减弱的增殖(P<0.001)、迁移(P=0.001)与侵袭(P=0.008)能力有所恢复。在胚胎黏附实验中,干扰lncAC079944.2的表达会抑制JAR细胞球体(模拟胚胎)和Ishikawa细胞之间的黏附(P<0.001),而加入miR-149-5p inhibitor后,胚胎和Ishikawa细胞之间的黏附程度回升(P<0.001)。结论LncAC079944.2与ER相关,下调lncAC079944.2可显著降低ER。LncAC079944.2可作为miR-149-5p的分子海绵,调节EFNA1的表达,影响Ishikawa细胞的增殖、迁移与侵袭能力,并影响胚胎与Ishikawa细胞的黏附,从而影响ER。LncAC079944.2可通过miR-149-5p/EFNA1轴调控ER,有望成为ER评估的新指标,为寻找新的改善ER的策略提供实验依据。

非编码RNA调节子宫内膜容受性的研究进展

子宫内膜容受性是胚胎着床的关键要素,评估并改善子宫内膜容受性有助于提高胚胎着床率。随着分子生物学及基因测序技术的发展,非编码RNA在机体生理和病理过程中的调控作用已被众多研究证实,在辅助生殖领域的研究也备受关注,非编码RNA通过调控相关基因、细胞因子的表达,或作为竞争性内源RNA,在子宫内膜容受性的形成过程中发挥重要作用。本文对近年来非编码RNA中的微小RNA、长链非编码RNA、环状RNA对子宫内膜容受性的调控作用及分子机制的研究进展进行了阐述。

补肾活血汤对特发性男性不育症精子质量和VEGF的影响

目的探讨补肾活血汤对特发性男性不育症患者精子质量及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。方法根据入选标准,搜集特发性男性不育症患者120例,随机分成对照组(60例)和治疗组(60例)。对照组患者口服胰激肽原酶,240u/次,3次/日,治疗组服用中药补肾活血汤治疗,200ml/次,2次/日。两组分别在治疗前和治疗3个月后检测精液量、精子浓度、前向运动精子比率、精子形态、精子碎片DNA率(DFI)、精浆VEGF,以及配偶妊娠情况。结果治疗3个月后,对照组在精子浓度、前向运动精子活动率、精浆VEGF较治疗前有明显改善(P<0.05);治疗组的精液量、精子浓度、前向运动精子比率、正常精子形态、DFI、精浆VEGF较治疗前均有显著改善(P<0.05),并优于对照组(P<0.05)。结论补肾活血汤可以提高特发性男性不育症患者的精子质量和微循环因子表达。补肾活血汤可能是通过改善睾丸微循环,提高精子质量,治疗特发性男性不育症。