脂肪干细胞旁分泌功能在面部抗衰老领域的研究应用与进展

背景:脂肪干细胞是从脂肪组织中获得的间充质干细胞,具有旁分泌功能,已成为当前研究的热点。目的:就脂肪干细胞旁分泌功能的基础研究及其在抗面部衰老方面的应用进展做一综述。方法:分别以"adipose-derived stem cells,paracrine,anti-aging"和"脂肪干细胞,旁分泌,抗衰老"为检索词,由第一作者检索2001年1月至2016年5月Pub Med数据库和中国期刊全文数据库相关文章。排除重复性及缺乏原创性的文献,计算机初检得到176篇文献,最终保留66篇进行归纳总结。结果与结论:脂肪干细胞具有旁分泌功能,可分泌多种生长因子(如表皮生长因子、转化生长因子β、血小板衍生生长因子、血管内皮生长因子、胶原蛋白和纤维粘连蛋白等)及炎性因子(干扰素γ、白细胞介素1β、白细胞介素8、白细胞介素9及肿瘤坏死因子α等),在抑制皮肤老化、美白肌肤、辅助脂肪移植、促进毛发再生等诸多抗衰老方面均有较显著的效果。

比较两种酶消化法对真皮成纤维细胞的影响

背景:目前真皮成纤维细胞研究应用广泛、需求量大、分离方法多,但是用于细胞分离培养的酶消化法尚未有对比研究。目的:比较两种酶消化方法分离的真皮成纤维细胞的细胞产量、形态、迁移、增殖4个方面的差异。方法:分别使用中性蛋白酶+胶原酶或胰蛋白酶分离消化真皮成纤维细胞,并进行细胞计数,原代培养并观察细胞形态学差异,采用细胞划痕实验观察细胞迁移能力并使用CCK-8检测细胞增殖活力。结果与结论:(1)采用中性蛋白酶+胶原酶消化的成纤维细胞在接种后六七天后融合,通过胰蛋白酶消化分离的成纤维细胞在八九天后融合,两种酶消化法都可获得真皮成纤维细胞;(2)与胰蛋白酶消化组相比,中性蛋白酶+胶原酶消化组的细胞产量显著增加;(3)划痕实验结果显示,胰蛋白酶消化的真皮成纤维细胞迁移速度较中性蛋白酶+胶原酶消化的细胞显著减慢;(4)两种酶消化方法分离的真皮成纤维细胞生长曲线均显示细胞数与培养时间呈正相关关系,在第3,4和5天,中性蛋白酶+胶原酶组的成纤维细胞的吸光度均显着高于胰蛋白酶组细胞的吸光度;(5)结果表明,与胰蛋白酶消化相比,用中性蛋白酶+胶原酶消化的细胞产量、迁移、增殖能力均更高;提示中性蛋白酶+胶原酶消化法优于胰蛋白酶消化法。

连续多次注射富血小板血浆对脂肪移植成活率及移植质量的影响

目的探讨连续多次注射富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对脂肪移植成活率及移植质量的影响,为临床应用提供实验依据。方法取接受吸脂手术的1名25岁健康女性自愿捐赠的大腿后外侧区脂肪,采用静置法纯化脂肪颗粒;抽取其外周静脉血,经两次200×g离心10 min收集PRP;将PRP与10%CaCl2溶液以10∶1混合。选取5周龄雌性裸鼠24只,体重(20±3)g,随机分为实验组与对照组(n=12)。实验组于裸鼠左、右侧背部皮下各注射脂肪颗粒与PRP(10∶2)混合物0.8 mL,对照组注射相同剂量脂肪颗粒与生理盐水(10∶2)混合物。在首次移植后5、10 d,两组再次分别注射PRP与生理盐水0.14 mL。移植后观察裸鼠存活情况;于首次移植后15、30、90、180 d,两组取标本进行大体观察,测定组织块重量与体积;组织学观察组织与细胞形态特征,计算坏死面积比与微血管计数。结果裸鼠均成活至实验完成,两组移植部位均未出现感染及破溃。各时间点实验组组织块表面血管生成以及横切面液化、坏死情况均好于对照组。首次移植后15、30、90 d实验组组织块重量及体积均显著大于对照组(P<0.05),180 d时两组组织块重量及体积相似(P>0.05)。组织学观察示实验组各时间点脂肪细胞形态结构均清晰,中心区空泡逐渐增大,无明显坏死物质及钙化发生;对照组脂肪细胞形态结构逐渐紊乱,且出现大量坏死物质,钙化明显。实验组15、180 d时坏死面积比均小于对照组,微血管计数均多于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 180 d内连续多次注射PRP辅助脂肪移植能促进脂肪成活并提高移植质量。