生存素与细胞分裂周期相关蛋白5在胃癌及胃间质瘤中的表达及其临床意义

目的:检测生存素与细胞分裂周期相关蛋白5(cell division cycle associated protein 5,CDCA5)在胃癌及胃间质瘤中的表达,分析两者相关性及其对临床病理学参数的评估价值。方法:首先通过GEPIA数据库分析生存素的编码基因BIRC5 mRNA与CDCA5 mRNA在胃癌中的表达及相关性;采用免疫组化检测76例胃癌和63例胃间质瘤中生存素与CDCA5表达,应用Spearman相关检验分析两者相关性,并分析其与患者临床病理特征的相关性。接着,通过PROMO数据库分析可能作用于BIRC5与CDCA5启动子的转录因子。最后,利用HDOCK预测生存素与CDCA5的相互作用。结果:GEPIA数据库分析显示,BIRC5 mRNA和CDCA5 mRNA在胃癌组织中表达均明显高于正常胃组织(P<0.01),且两者在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.79,P<0.01);免疫组化结果显示,在胃癌和胃间质瘤中,生存素与CDCA5均在细胞核与细胞质中表达,两者表达量均明显高于对应癌旁/瘤旁组织(P均<0.001),且两者在胃癌、胃间质瘤组织中的表达呈一定的正相关(r_(胃癌)=0.410,r_(胃间质瘤)=0.347,P均<0.05)。胃癌中,生存素与肿瘤直径、淋巴管侵犯及TNM分期相关(P<0.05);CDCA5表达与肿瘤分化程度、TNM分期相关(P<0.05);两者共阳性表达与肿瘤直径、肿瘤分化程度、淋巴管侵犯及TNM分期相关(P<0.05)。胃间质瘤中,生存素与核分裂象及NIH危险度分级相关(P<0.05);CDCA5与肿瘤直径及NIH危险度分级相关(P<0.05);两者共阳性表达与肿瘤直径、核分裂象及NIH危险度分级相关(P<0.05)。另外,PROMO发现有13个转录因子可同时调控CDCA5与BIRC5启动子;HDOCK预测发现,生存素蛋白与CDCA5蛋白之间存在多对相互作用。结论:在多种转录因子的共同作用下,生存素与CDCA5在胃癌与胃间质瘤中均呈高表达,且呈正相关;两者均与胃癌、胃间质瘤的部分临床病理学参数相关,且联合检测临床价值大于单个分子的检测。

老年性骨质疏松症与细胞自噬关联性的研究进展

随着老龄化社会的到来,老年性骨质疏松症(osteoporosis,OP)已经成为威胁老年人健康的常见疾病。OP是一种以全身性骨量的丢失、骨微观结构的退行性改变为特征的骨骼疾病,成骨细胞和破骨细胞的动态平衡失调是引起骨质疏松症的主要原因。自噬能够通过影响成骨细胞的矿化和破骨细胞的分化过程而改变两者之间的平衡关系。这就提示可以从调控自噬的角度对骨质疏松症的病情发展进行干预。本文作者就自噬与骨细胞、成骨细胞、破骨细胞、间充质干细胞等方面关系的研究进行综述。

硫化物对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

硫是人体内蛋白质的重要组成元素,参与机体众多代谢与催化过程,为生命所必需。近年来,随着科学家们对骨髓间充质干细胞相关研究的不断深入,含硫化合物对骨髓间充质干细胞的影响日益受到关注。含硫化合物主要包含有机硫化物、无机硫化物、天然含硫化合物以及S-非甾体抗炎药复合体等,这些化合物可能通过影响细胞信号通路、细胞周期或氧化应激反应等,调节人骨髓间充质干细胞的成骨分化能力。因此含硫化合物或许能对后续更好地利用骨髓间充质干细胞分化进行疾病治疗以及干细胞的应用提供新思路。本文作者综述了相关硫化物与骨髓间充质干细胞成骨分化的关系,并对其机制和生物学应用进行了探讨。

外源性硫化氢通过Wnt/β-catenin信号通路促进衰老BMSCs的成骨分化

目的:探讨外源性硫化氢供体GYY4137对D-半乳糖(D-Gal)诱导的衰老骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨能力的影响及潜在机制。方法:应用不同浓度的D-Gal诱导BMSCs的衰老,CCK8法检测细胞活性及β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老的程度,确定D-Gal的最佳诱导浓度;应用不同浓度GYY4137进行干预后,检测GYY4137对正常BMSCs及衰老BMSCs细胞活性的影响,确定GYY4137最佳干预浓度。实验设CON组、GYY4137组、D-Gal组、D-Gal+GYY4137组,作相应处理后对各组BMSCs进行β-半乳糖苷酶染色,qRT-PCR法检测衰老相关基因(P16、P21、P53)和衰老相关炎症因子(IL-6、IL-8、TNF-α)的mRNA相对表达。对各组细胞进行成骨诱导分化,qRT-PCR法检测成骨分化相关因子碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、人骨形态发生蛋白2(BMP2)的mRNA表达,通过茜素红染色法检测钙结节形成数量,ALP染色法检测ALP的生成。通过转录组测序检测D-Gal组、D-Gal+GYY4137组两组细胞的差异表达基因,根据测序结果,qRT-PCR对差异基因进行验证。应用Dickkopf相关蛋白1(dickkopf Wnt signaling pathway inhibitor 1,DKK1)抑制Wnt10b的表达后,检测各组衰老BMSCs的成骨分化能力。结果:D-Gal的最佳诱导浓度为30 g/L,GYY4137的最佳干预浓度为10μmol/L,D-Gal组β-半乳糖苷酶阳性细胞比例显著增加,衰老相关基因(P16、P21、P53)及衰老相关炎症因子(IL-6、IL-8、TNF-α)mRNA的表达量显著升高(P<0.05或P<0.01),应用GYY4137干预后,以上细胞衰老相关指标显著降低(P<0.05或P<0.01)。在成骨分化过程中,D-Gal+GYY4137组ALP、OCN、RUNX2、BMP2的mRNA表达,钙结节阳性比例显著高于D-Gal组(P<0.05或P<0.01);测序结果发现Wnt/β-catenin信号通路中的Wnt10b表达有显著差异,qRT-PCR结果显示GYY4137可增加衰老细胞Wnt10b及其下游基因β-catenin的表达(P<0.05或P<0.01),与测序结果一致。应用100μg/L DKK1抑制Wnt10b的表达后,GYY4137处理的衰老BMSCs成骨分化相关基因ALP、OCN、RUNX2、BMP2的mRNA表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:GYY4137可以缓解D-Gal诱导的BMSCs衰老进程,并且可能通过Wnt/β-cantenin信号通路促进衰老BMSCs的成骨分化。

内质网蛋白驻留受体2蛋白对胰腺癌恶性生长的影响及机制研究

目的:探讨赖氨酸-天冬氨酸-谷氨酸-亮氨酸(KDEL)内质网蛋白驻留受体2(endoplasmic reticulum protein retention receptor 2,KDELR2)对胰腺癌细胞恶性生长的影响,并初步探究相关作用分子机制。方法:通过癌症基因组学数据分析平台(UCSC XENA)分析KDELR2 mRNA在泛癌和人胰腺癌组织中的表达水平;通过癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas, TCGA)分析其表达水平与胰腺癌患者临床病理特征及生存预后的关系;采用基因本体功能富集分析(Gene Ontology, GO)、京都基因和基因组数据库富集分析(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)探索KDELR2相关差异表达基因参与调节的信号通路;通过ssGSEA算法分析KDELR2免疫浸润情况。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹实验检测不同胰腺癌细胞系(BXPC-3、MIA PaCa-2、PANC-1、PaTu 8988-T)以及正常人胰腺导管上皮细胞(HPNE)中KDELR2的mRNA和蛋白表达水平,并检测人胰腺癌组织及对应癌旁组织中KDELR2的蛋白表达水平。通过慢病毒转染构建KDELR2过表达和敲减的稳转细胞株(PaTu 8988-T和PANC-1)及其对照空载体细胞株(“KDELR2-OE”和“Vec”、“shKDELR2-S1/S2”和“shNC”),利用CCK8、EdU、Transwell、细胞克隆形成实验观察KDELR2过表达及敲低后稳转细胞株的生物学行为变化;使用JC-1、MitoSOX和DCFH-DA染色实验以及检测ATP水平观察PaTu 8988-T和PANC-1细胞KDELR2敲低后的线粒体功能。通过构建裸鼠皮下荷瘤模型观察KDELR2敲低对胰腺癌PANC-1细胞在体生长的影响。结果:KDELR2在人胰腺癌组织及细胞中显著高表达,其高表达水平与胰腺癌患者的病理特征及不良预后密切相关。GO功能和KEGG富集分析表明,KDELR2可能通过调控细胞能量代谢调节胰腺癌细胞生长。敲低KDELR2显著抑制胰腺癌细胞的增殖和迁移能力,过表达KDELR2显著促进胰腺癌细胞的增殖和迁移能力;KDELR2敲低后,胰腺癌细胞线粒体膜电位明显下降,活性氧水平明显升高,ATP水平明显降低(P均<0.05)。裸鼠皮下荷瘤模型证实KDELR2敲低显著抑制胰腺癌细胞的在体生长。结论:KDELR2在胰腺癌中显著高表达且与患者不良预后密切相关,KDELR2可能参与调控线粒体的功能影响癌细胞能量代谢。

昆山市外来务工家长对儿童意外伤害知识认知现状分析

目的:了解昆山市外来务工家长对儿童主要意外伤害的认知现状,为开展针对性的干预措施,降低儿童意外伤害发生率提供依据。方法:选择昆山市10所小学,采用分层整群抽样方法调查1 000名外来务工家长及100名本地家长关于儿童跌落、溺水、交通事故和药品误服方面的知识。结果:外来务工家长对各类意外伤害的认知水平均低于本地家长。结论:昆山市外来务工家长对意外伤害的知晓率偏低,看护质量不高,看护意识亟待提高。

抗血栓治疗对急诊胆囊切除术后并发症的影响

目的:评估抗血栓治疗(ATT)对急诊胆囊切除患者围手术期及术后并发症的影响。方法:回顾性分析148例急性胆囊炎行急诊胆囊切除患者临床资料,其中接受抗血栓治疗67例为ATT组,未接受抗血栓治疗81例为非ATT组。比较两组围手术期相关指标及术后出血并发症发生率。结果:ATT组行开放胆囊切除术占比高于非ATT组(64.2%vs 46.9%),非ATT组行腹腔镜手术占比高于ATT组(53.1%vs 35.8%),腹腔镜转为开放手术率高于ATT组(14.8%vs 14.8%),差异均有统计学意义(P<0.05)。ATT组术中出血量多于非ATT组[(98(4,600)mL vs 50(1,70)mL],输血率(16.6%vs 3.7%)高于非ATT组,术后住院时间长于非ATT组[(11(1,76)d vs 9(2,20)d],差异均有统计学意义(P<0.05),但两组手术时间、术中大量出血发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。ATT组发生术后显著并发症12例(17.9%),严重并发症7例(10.4%),分别高于非ATT组的4例(4.9%)和1例(1.2%),差异均有统计学意义(P<0.05)。非ATT组未发生术后出血并发症,ATT组有4例(6.0%)发生出血并发症,分别为小肠出血、肝包膜下血肿、引流管口出血和病因不明的腹腔出血,均予以保守治疗。该4例患者均同时接受抗血小板和抗凝治疗,其中2例服用二联抗血小板药物。结论:单药抗血小板治疗患者行急性胆囊切除术较安全,二联、多联抗血小板药物或联合抗凝治疗患者需谨慎处理,以免发生术后出血并发症。

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1对胃癌细胞生物学行为的影响及相关机制

目的:探讨磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1,PCK1)在胃癌中的表达、与胃癌患者预后的关系及其潜在机制。方法:利用TCGA数据库、HPA数据库及Oncomine 4.5数据库中胃癌以及癌旁组织的相关数据与图片,分析PCK1表达水平与胃癌患者临床病理学特征和总生存期的关系,采用基因功能富集分析(GSEA)预测PCK1调控胃癌潜在的信号通路。体外细胞学实验采用慢病毒转染胃癌HGC-27和AGS细胞,分别敲低与过表达PCK1,采用细胞功能学实验检测PCK1对胃癌细胞生长、增殖、迁移等影响,同时采用蛋白质免疫印迹检测相关蛋白的表达。结果:与癌旁组织相比,PCK1在胃癌组织中表达明显上调(P<0.05);ROC曲线提示PCK1对胃癌患者预后具有良好的预测效能;通过GSEA富集分析提示原发性免疫缺陷、细胞黏附分子、趋化因子信号通路、全身性红斑狼疮、产生IgA的肠道免疫网络及RIGⅠ样受体信号通路相关的基因集在PCK1基因低表达表型中差异富集;敲低PCK1后,胃癌HGC-27和AGS细胞生长、克隆形成能力、迁移能力显著下降,同时p-AKT(Ser473)、p-mTOR、p-S6和p-4EBP1表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01);过表达PCK1则与之作用相反。结论:PCK1在胃癌中呈高表达且与患者预后相关,其可能通过活化AKT-mTOR信号通路促进胃癌细胞生长、增殖与迁移。

基于铁死亡的抗肝癌药物的研究进展

肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,其早期症状较为隐匿,大部分患者一经确诊即为晚期,失去手术机会,多选择药物治疗。然而,现有治疗肝癌的药物并不能明显延长肝癌患者的总生存期,急需新型的药物改善肝癌预后。铁死亡是新发现的一种细胞程序性死亡方式,其可通过影响脂质代谢、铁代谢等相关途径诱导肝癌细胞死亡,从而抑制肝癌的进展。同时,大量新型的铁死亡诱导药物在基础实验中显示出了可观的抗肝癌效果。因此,铁死亡诱导药物有望成为新型抗肝癌药物,但还需要进一步的动物实验及临床研究证明其可行性。

前馈控制在降低小儿留置针导致的并发症中的应用效果

目的探讨前馈控制在降低小儿留置针引发的并发症中的应用效果。方法将562例使用留置针静脉输液患儿分为对照组与观察组,对照组采用常规护理,观察组采用前馈控制干预,比较2组患儿静脉输液并发症的发生情况。结果观察组护士穿刺成功率高于对照组,导管堵塞、静脉炎、液体渗出和外渗等并发症发生例数少于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论前馈控制可有效减少患儿静脉留置针引发的并发症。

腹腔镜胆囊切除术中运用胆道镜经胆囊管途径治疗胆总管结石

目的总结腹腔镜下胆囊切除术（1aparoscopic cholecystectomy,LC）＋腹腔镜经胆囊管胆道探查术（laparoscopic transcystic common bile duct exploration,LTCBDE）治疗胆囊结石合并胆总管结石的经验。方法回顾性分析我院2012年3月至2015年10月49例采用LC＋LTCBDE治疗胆囊结石合并胆总管结石的临床资料。结果所有病例手术情况良好,手术时间39~221 min,术中出血量10~50 m L,术中取出胆道结石2~5枚,直径2~15 mm;术后2~3 d拔除腹腔引流管,术后住院时间4~6 d;全组术后胆漏1例（1/49,2.04%）,经腹腔引流3 d后愈合,术后6 d出院。结论 LC＋LTCBDE术式治疗胆囊结石合并胆总管结石安全、可靠,值得临床推广应用。

内镜下乳头括约肌小切开术联合球囊扩张术治疗胆总管结石的临床价值

目的探讨采用内镜下乳头括约肌小切开术联合球囊扩张术(sEST+EPBD)治疗胆总管结石的临床疗效及可能存在的机制。方法选取2013年1月-2017年12月因胆总管结石入住该院的200例患者,分为单纯内镜下乳头括约肌切开术(EST)组和sEST+EPBD组,每组100例。对两组患者的手术时间、住院时间、总费用、并发症以及炎症指标进行比较分析。结果两组患者术后均未发生胰腺炎,所有患者均治愈。其中,sEST+EPBD组患者平均手术时间、住院时间、出血量及术后胆道感染均明显少于EST组(P<0.05)。两组患者总费用和胆道穿孔比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后1及24 h,sEST+EPBD组白细胞(WBC)、环氧化酶-2(Cox-2)、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)以及肿瘤坏死因子(TNF-α)水平均明显低于EST组(P<0.01),而sEST+EPBD组的血淀粉酶水平明显升高(P<0.01);术后72 h,sEST+EPBD组WBC及Cox-2水平均明显低于EST组(P<0.05),PCT、CRP、淀粉酶以及TNF-α水平则差异无统计学意义(P>0.05)。结论sEST+EPBD是治疗胆总管结石的一种有效、安全的方法,能减少手术时间、住院时间,有效控制术后胆道感染的发生,并且能明显降低炎症反应。

全腔镜食管癌根治术的临床应用

目的总结全腔镜食管癌根治手术的临床经验。方法2008年5月至2011年7月采用全腔镜技术对31例食管癌患者行根治术,胸腔镜下游离胸段食管,清扫胸部区域淋巴结,腹腔镜下游离胃,清扫腹部区域淋巴结,胃制成管状在颈部与食管吻合重建消化道。结果手术时间平均(213±48)min,术中估计失血量平均(220±59)ml。1例术后腹腔迟发性出血,2例术后乳糜胸,无死亡病例。结论全腔镜食管癌根治术技术上安全可行,具有一定的临床应用优势,但对术者要求较高。

Cockett综合征继发下肢静脉曲张或下肢肿胀25例

目的探讨Cockett综合征继发下肢静脉曲张或下肢肿胀的治疗方法及疗效。方法 2014年3月~2015年3月我科对25例经血管造影明确诊断的Cockett综合征（继发下肢静脉曲张22例,下肢肿胀3例）行髂静脉经皮腔内血管成形术（percutaneous transluminal angiography,PTA）,19例支架置入,22例静脉曲张二期行大隐静脉高位结扎联合点式剥脱术。结果 25例均行髂静脉PTA,下肢静脉曲张17例行髂静脉支架置入,下肢肿胀2例行髂静脉支架置入。22例下肢静脉曲张介入术后1个月行下肢大隐静脉高位结扎联合点式剥脱术。术后无明显下肢肿胀、下肢感染、深静脉血栓形成等并发症。术后1个月随访下肢肿胀治愈20例,好转5例。25例随访3~15个月,平均12.4月,无一例出现下肢明显肿胀、下肢静脉曲张复发及下肢深静脉血栓形成。结论 Cockett综合征行髂静脉PTA,根据髂静脉狭窄情况决定是否行支架置入,术后下肢肿胀能够明显缓解,对于继发下肢静脉曲张的患者1个月后再行大隐静脉高位结扎联合点式剥脱术,手术效果显著。

游戏式功能锻炼在儿童肱骨髁上骨折康复锻炼中的应用

目的：探讨游戏式功能锻炼方法在儿童肱骨髁上骨折康复锻炼中的应用和效果。方法：肱骨髁上骨折患儿90例，随机分为干预组和对照组各45例。干预组采用游戏式功能锻炼，对照组进行常规功能锻炼，比较2组患儿对功能锻炼配合的依从性和肘关节功能恢复情况。结果：训练5～6周后，干预组患儿对功能锻炼的依从性及依从率均显著高于对照组（均 P＜0．05）。2组肘关节功能锻炼Mayo评分均较干预前明显下降（均 P＜0．01），且干预组Mayo评分更低于对照组（P＜0．01）。结论：肱骨髁上骨折患儿应用游戏式功能锻炼方法，有利于增加患儿对功能锻炼的配合度、促进肘关节功能的恢复，减少术后并发症，值得在小儿骨科广泛开展。

腹腔镜辅助下胃癌根治术脾损伤及处理方法

自1994年Kitano等首次报道腹腔镜胃癌根治术,目前腹腔镜胃癌根治手术在临床上得到广泛开展,手术指征也从当时早期胃癌扩展到进展期胃癌,而与之相应的医源性脾损伤也不断报道。鉴于医源性脾损伤自身的特点,目前尚无统一的分级方法,本研究按照其损伤特点,将其归纳为3类,Ⅰ类：损伤脾脏的表面,损伤深度≤1 cm,且损伤面积≤1cm^2;

缺氧诱导因子1α在胃癌中的表达及临床意义

目的:探讨缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在胃癌发生发展中的作用及临床意义。方法:构建93例胃癌、癌旁组织及正常组织的组织芯片,应用免疫组化技术检测HIF-1α的表达水平,并分析其与临床病理学特征之间的关系。结果:HIF-1α在胃癌组织和癌旁组织中的表达率分别为80.6%(75/93)和11.8%(11/93),正常组织无表达。HIF-1α表达与肿瘤的浸润程度、淋巴结转移、TNM分期等相关(P<0.05)。结论:HIF-1α在胃癌组织中高表达,且与临床病理有一定的联系,提示在胃癌的发生发展过程中,HIF-1α起一定的作用。

颞肌外钛网修补额颞区颅骨缺损

目的探讨颞肌外钛网修补额颞区颅骨缺损的临床疗效。方法对173例额颞区颅骨缺损颞肌外钛网修补患者的临床资料和随访结果进行回顾性分析。结果173例中167例切口一期愈合，随访3—6个月，未发现新的并发症或原有症状加重；2例颅内出现血肿；2例脑表面多处点状出血；1例术后感染，摘除钛网后痊愈；1例癫痫于术后消失。结论颞肌外修补法操作简便，手术时间短，术后修补区外型满意，是额颞区颅骨修补的首选方法。

腹腔镜辅助远端胃癌根治术30例分析

目的:探讨腹腔镜辅助行远端胃癌根治术的可行性。方法:2007年6月—2008年8月行腹腔镜远端胃癌根治术30例。结果:30例均在腹腔镜下完成远端胃癌根治术,无中转开腹手术病例。平均手术时间:312(256～450)min。术中出血量:145(60～250)mL,术中均未输血。平均清扫淋巴结21.1(16～35)枚。术后患者平均胃肠功能恢复时间44(36～56)h,下床活动时间56(24～96)h。常规置空肠营养管,术后肠内营养开始时间36(24～48)h,进流质时间2.6(2～4)d。术后近期生活质量良好。结论:早期及较早的远端进展期胃癌经腹腔镜辅助行D2根治术是安全可行的,根治效果与开腹手术相近,且具有创伤小、术后恢复迅速等优点。

姜黄素通过内质网应激信号通路诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用研究

目的:检测姜黄素对肝癌SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响,并进一步探讨内质网应激反应在其中的作用。方法:应用2.5μM、5μM、10μM、20μM、50μM的姜黄素处理肝癌SMMC-7721细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性;Western Blot检测内质网应激相关蛋白GRP78、caspase-12、CHOP的表达;流式细胞术检测姜黄素对肝癌细胞凋亡的影响。结果:与对照组比较,2.5μM、5μM、10μM、20μM、50μM的姜黄素对肝癌SMMC-7721细胞增殖均有抑制作用,并随作用时间的增加,增殖抑制作用更加显著(均P<0.05);姜黄素能够诱导肝癌SMMC-7721细胞GRP78(P<0.05)、caspase-12(P<0.05)、CHOP(P<0.01)的表达,其表达量具有剂量依赖性;姜黄素能够诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡,与对照组比较(P<0.05),呈现出剂量依赖关系。结论:姜黄素通过内质网应激信号通路诱导肝癌细胞凋亡,抑制其增殖。