Toll样受体家族介导疼痛和痒觉信号的分子机制

疼痛和瘙痒是两种主观体验不同的躯体感觉,两者存在密切联系,又有其独特的机制。尤其是在慢性疾病的条件下,疼痛和瘙痒共享一些病理机制。神经系统和免疫系统的互作网络在慢性疼痛和瘙痒的发病机制中发挥关键的作用。位于神经免疫界面的Toll样受体(TLRs)作为一类研究较为深入的模式识别受体,负责识别病原体相关分子模式和危险相关分子模式,启动针对感染或组织损伤的天然或适应性免疫应答反应。外周组织感染或损伤后,表达在免疫细胞或者中枢神经系统中胶质细胞中的多种TLRs被激活,进而诱导细胞因子和趋化因子产生,间接的调节疼痛和瘙痒信号的产生和处理,并参与外周和中枢敏感化的形成。TLR家族成员还表达于背根神经节和三叉神经节的初级感觉神经元中,这些TLRs被激活后导致特定离子通道开放,诱导内向电流并启动动作电位的发放,进而直接激活感觉神经元或者增强其对致痛或致痒物质的敏感性。在慢性疼痛或瘙痒的病理条件下,TLRs的内源性配体可以被合成和释放,进而激活不同的TLR,最终促进慢性疼痛或瘙痒的外周或中枢敏化。总之,靶向TLR家族成员进行干预,有可能成为一种有前景的镇痛或止痒的新策略。

预注右美托咪定对老年患者静吸复合麻醉下腹腔镜胆囊切除术后早期认知功能的影响

目的探讨术前预注右美托咪定对老年患者静吸复合麻醉下腹腔镜胆囊切除术后早期认知功能障碍的影响。方法选取择期全麻行腹腔镜胆囊切除手术的44例老年患者，年龄60～78岁，体质量48～82 kg，美国麻醉医师协会（ASA）分级Ⅰ～Ⅲ级，将受试对象随机分为试验组和对照组。试验组在全麻诱导开始前30 min，微量泵输注1 μg/kg剂量的盐酸右美托咪定注射液（艾贝宁，输注浓度为4 μg/ml），输注时间为30 min；对照组微量泵输注氯化钠注射液，剂量为0.25 ml/kg，输注时间为30 min。术中监测并记录两组心率（HR）、脉搏血氧饱和度（SpO2）、无创血压（NIBP）、呼气末二氧化碳分压（PETCO2）数值，由神经内科主治医师评估并记录术前、术后第1天和第3天的简易精神状态量表（MMSE）评分和术后认知功能障碍（POCD）的发生率。结果①MMSE评分：术后第1天两组的MMSE评分均较术前显著降低，差异有统计学意义（P〈0.05）；术后第1天对照组的MMSE评分较试验组显著降低，差异有统计学意义（P〈0.05）。②POCD发生率：本试验POCD总的发生率为9.1%，试验组术后出现l例轻度POCD患者，发生率为4.5%；对照组出现2例轻度认知障碍，1例中度认知障碍，发生率为13.6%，两组间POCD的发生率差异未见统计学意义（P〉0.05）。结论术前预注右美托咪定能够提高老年患者静吸复合麻醉下腹腔镜胆囊切除术后的MMSE评分，是否能降低POCD发生尚需进一步研究。

右美托咪定对甲醛炎性疼痛小鼠免疫功能的影响

目的观察右美托咪定对甲醛炎性疼痛小鼠免疫功能的影响。方法28只雄性C57BL/6健康小鼠随机均分为四组:NS组腹腔内注射生理盐水;D1、D2和D3组腹腔内分别注射右美托咪定10、20和30μg/kg。30min后,在小鼠右后掌皮下注射2%甲醛20μl(溶于生理盐水中)。评估右美托咪定的镇痛效果。检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率(效靶比取80∶1、40∶1和20∶1)。溴脱氧尿苷(BrdU)掺入法检测脾淋巴细胞对植物血凝素(PHA)刺激诱导的增殖水平。结果与NS组比较,D1、D2和D3组对急性疼痛和痛觉过敏两个阶段都有相似的镇痛作用(P<0.01)。与NS组相比,D3组自然杀伤(NK)细胞的活性降低(P<0.05),D1、D2组NK细胞活性无统计学差异(P>0.05)。D1、D2和D3组对脾淋巴细胞的增殖反应差异无统计学意义(P>0.05)。结论右美托咪定30μg/kg能降低NK细胞毒性,但对淋巴细胞增殖功能没有明显影响。

鞘内联合应用曲马多和右美托咪定对大鼠炎性疼痛的作用和细胞因子、免疫功能的影响

目的:观察鞘内联合应用曲马多和右美托咪定对炎性疼痛大鼠的镇痛作用以及对细胞因子、免疫功能的影响。方法:雄性SD大鼠24只,随机分为对照组(C组)、右美托咪定组(D组)、曲马多组(T组)和小剂量右美托咪定联合曲马多组(F组)4组各6只。甲醛炎性致痛模型制备成功后,鞘内给药C组生理盐水10μl、D组右美托咪定10μg、T组曲马多10μg、F组右美托咪定5μg加曲马多5μg,评估各组的镇痛效果,检测大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和T淋巴细胞亚群CD4^+、CD8^+的水平。结果:与C组比较,D组、T组、F组镇痛效果较好,F组最佳(P<0.05),D组、T组、F组间无明显差异(P>0.05);D组、T组、F组血清TNF-α、IL-6水平较C组降低,F组降低更明显(P<0.05);CD4^+、CD8^+表达水平在4组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:鞘内联合应用小剂量右美托咪定和曲马多不仅对炎性疼痛大鼠具有较好的协同镇痛作用,还能够抑制细胞因子的释放,对大鼠淋巴细胞亚群CD4^+、CD8^+的表达无影响。

右美托咪定镇痛对小鼠脾自然杀伤细胞活性及淋巴细胞增殖功能的影响

目的探讨右美托咪定镇痛对小鼠脾自然杀伤（natural killer，NK）细胞活性及淋巴细胞增殖功能的影响。方法28只雄性健康小鼠随机分为甲醛致痛对照组（甲醛组）、盐酸右美托咪定治疗甲醛组（右美托咪定＋甲醛组）、生理盐水治疗对照组（对照组）和盐酸右美托咪定治疗对照组（右美托咪定组），每组7只。甲醛组和右美托咪定＋甲醛组腹腔内注射30μg／kg右美托咪定＋等量生理盐水30min后，在小鼠右后掌皮下注射体积分数2％甲醛20μL（溶于生理盐水中），评估右美托咪定镇痛效果；对照组和右美托咪定组腹腔内注射30μg／kg右美托咪定＋等量生理盐水30min后，在小鼠右后掌皮下注射同等剂量的生理盐水。4组处死小鼠后无菌取脾，制备脾细胞，均通过检测乳酸脱氢酶释放率来反映NK细胞毒性，效应细胞与靶细胞浓度比取80：1、40：l和20：1；采用溴脱氧尿苷掺入法检测脾T淋巴细胞对植物血凝素刺激诱导的增殖水平；体外应用不同浓度右美托嘧定作用于脾细胞，测量吸光度值。结果右美托咪定十甲醛组在第一阶段（注射甲醛后0-10min）和第二阶段（注射甲醛后〉10-30min）小鼠舔舐右后掌时间[（1．1±0．3）、（24．5±8．2）s]明显短于甲醛组[（39．7±20．7）、（251．7±89．8）s]（P〈0．01）；靶细胞浓度为80：1、40：1和20：1时，甲醛组小鼠乳酸脱氢酶释放率明显高于右美托咪定＋甲醛组、对照组和右美托咪定组（P〈0.05），右美托咪定＋甲醛组明显高于对照组和右美托咪定组（P〈O．05），对照组与右美托咪定组比较差异无统计学意义（P〉0．05）；甲醛组和右美托咪定＋甲醛组刺激指数[（26．3±11．7）％、（24．7±5．6）％]明显高于对照组[（16．1±4．o）％]和右美托咪定组[（9．8±2．5）％]（P〈0.05），甲醛组与右美托咪定＋甲醛组比较差异无统计学意义（P〉0．05），对照组与右美托咪定组比较差异无统计学意义（P〉0．05）；右美托咪定10μmol／L时在570nm处吸光度值（0．44±0．02）明显高于0、0．1、1、5μmol／L时（0.55±0．05、0．55±0．09、0．54±0．06、0．52±0．12）（P〈0.05）。结论右美托咪定可有效减轻甲醛引起的疼痛，抑制NK细胞毒性，对脾淋巴细胞增殖无影响，可用于免疫力低下患者的镇痛。

右美托咪定对脂多糖诱导单核巨噬细胞炎症反应的影响

目的 探讨右美托咪定（dexmedetomidine,Dex）对脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）诱导单核巨噬细胞RAW264.7炎性因子释放及血红素氧合酶（heme oxygenase,HO）-1表达的影响. 方法 离体培养小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7,用含有1×106个/ml的细胞样本接种于6孔培养板（2 ml/孔）.采用随机数字表法将其分为5组（每组6孔）：正常对照组（C组）、Dex 10 μg/L组（Dex组）、LPS 1 mg/L组（LPS组）、LPS 1 mg/L＋Dex 10 μg/L组（LPS＋Dex组）及HO-1抑制剂ZnPPⅨ10 μmol/L＋LPS 1 mg/L＋Dex 10 μg/L组（ZnPPⅨ＋LPS＋Dex组）.分别于孵育3、6、12、24 h时点收集细胞培养上清液,采用ELISA法测定TNF-α、IL-6、高迁移率族蛋白1（high mobility group box-1 protein,HMGB-1）的浓度;在6 h和12 h时点收集细胞沉淀,提取蛋白成分,利用Western blot法测定HO-1表达. 结果 与C组比较,LPS组各时间点TNF-α、IL-6、HMGB-1浓度均明显升高（P〈0.05）,在6、12 h时点细胞HO-1的表达上调（P〈0.05）;与LPS组比较,LPS＋Dex组各时间点的TNF-α、IL-6、HMGB-1浓度降低（P〈0.05）,培养细胞6、12 h时点HO-1表达升高;与LPS＋Dex组比较,ZnPPⅨ＋ LPS＋Dex组各时间点的TNF-α、IL-6、HMGB-1浓度升高（P〈0.05）,培养细胞6、12 h时点HO-1表达降低（P〈0.05）. 结论 Dex可以抑制LPS诱导的单核巨噬细胞炎症因子释放,其机制与上调HO-1表达有关.