急性髓系白血病患者SALL4基因的甲基化改变及其临床意义

目的:探讨急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者婆罗双树样基因4(Sal-like 4,SALL4)启动子的甲基化状况和临床意义。方法:分别应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)技术和实时定量PCR(RQ-PCR)技术检测45例初发AML患者和20例缺铁性贫血患者骨髓标本的SALL4甲基化状态和SALL4表达水平;同时,对AML患者的SALL4甲基化改变与临床特征相关性进行分析。结果:9例(20.0%)AML患者存在SALL4基因启动子低甲基化改变,而20例对照均无SALL4基因低甲基化,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。SALL4启动子低甲基化改变与AML患者年龄、性别、血红蛋白含量、血小板计数均无相关性(P>0.05),但低甲基化患者的白细胞计数明显高于甲基化患者(P=0.027)。SALL4表达水平和SALL4低甲基化明显相关(P<0.05)。按WHO分型,本研究中共有7类亚型,亚型间SALL4低甲基化频率差异无统计学意义(P>0.05)。中危和高危组核型患者中SALL4低甲基化频率明显高于低危组患者(P<0.05)。结论:SALL4低甲基化是AML患者中一个常见分子事件,可能与AML患者中高危核型相关。

慢性骨髓增殖性肿瘤患者钙网蛋白基因突变及其临床意义

目的:研究慢性骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者钙网蛋白(CALR)基因突变并探讨其临床意义。方法:采集患者外周血,提取基因组DNA,PCR扩增CALR基因第9号外显子和人血小板生成素受体(MPL)基因片段,应用直接测序法检测CALR及MPL基因突变;采用等位基因特异性PCR检测JAK2 17F突变。结果:共检出CALR基因突变13例(23.6%);44例原发性血小板增多症(ET)患者中,检出CALR基因突变10例,发生率为22.7%,其中Ⅰ型(c.1092_1143del52bp)5例、Ⅱ型(c.1154_1155ins5bp)4例、Ⅲ型(c.1094_1139del46bp)1例;11例原发性骨髓纤维化(PMF)患者中,检出CALR突变3例,发生率为27.2%,其中Ⅰ型2例、Ⅱ型1例;共检出JAK2 V617F突变32例(58.1%),包括ET患者26例(59.1%),PMF患者6例(54.5%)。在所有标本中均未检测到MPL W515基因突变,也未检测到任何两种突变共存。ET患者中CALR基因突变者的中位年龄48岁,明显低于JAK2 V617F突变者的中位年龄(64岁);CALR突变者的血小板水平较JAK2 V617F突变者更高,而白细胞和血红蛋白水平更低,差异具有统计学意义(P<0.05)。有效随访35例患者,其中4例发生深静脉血栓,均为JAK2 V617F突变者,无1例CALR突变者发生血栓并发症。对48例患者分析了染色体核型,仅1例CAKR基因I型突变的PMF患者核型异常,未发现特异性染色体异常。结论:CALR突变在JAK2 V617F及MPL W515K突变阴性的ET及PMF患者中有较高的检出率,与JAK2 V617F突变相比,存在CALR突变的ET患者的中位年龄、白细胞和血红蛋白水平更低,而血小板水平更高,但较少出现血栓并发症。

miR-93在急性髓系白血病中的表达及其与miR-378表达的相关性

目的:探讨微小RNA-93(miR-93)在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中的表达特点及其与miR-378表达的相关性。方法:用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RQ-PCR)检测84例AML患者及16例健康对照骨髓单个核细胞中miR-93成熟体的表达水平。分析miR-93高表达对AML患者预后的影响及其与miR-378表达的相关性。结果:84例AML患者中有14例过表达miR-93(16.7%)。miR-93高表达组患者除白细胞数(3.11×109/L)明显低于低表达组(14.55×109/L,P=0.003)外,其他参数如性别、年龄、血红蛋白和血小板等均无明显差异。与其他核型分组[10/38(26.3%)]比较,中等预后核型分组中miR-93高表达的频率明显下降[4/46(8.7%),χ2=4.652,P=0.041]。Spearman相关系数分析显示,miR-93表达率与miR-378表达率呈正相关(r=0.321,P<0.01)。结论:miR-93在AML中表达率明显增加,且与miR-378表达率呈正相关。miR-93联合miR-378的表达可能作为AML诊断的参考依据。