Livin基因与泌尿系肿瘤的研究进展

Livin是新近发现的IAP家族成员之一,在多种肿瘤组织中特异性高表达,而在正常组织中不表达或者低表达,发挥着广泛的抗凋亡作用,在肿瘤的发生发展中起着重要的作用,体内外研究发现降低其表达可以增加肿瘤细胞的凋亡,增加肿瘤细胞对化疗的敏感性。已经逐渐成为肿瘤治疗的新靶点。本文对就Livin的结构、功能及其在诊断治疗中的研究进展作一综述。

聚合酶链反应检测淋病后尿道炎患者衣原体及解脲支原体的意义

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对６４例淋病后尿道炎患者衣原体及解脉支原体进行了检测，结果：衣原体检出率为４３．７５％，解脲支原体检出率为２９．６９％，经治疗后．其转阴率分别为７５．０％及８４．２％，提示对淋病后尿道炎患者衣原体及解脉支原体检测要予以重视，并建议将ＰＣＲ技术作为衣原体及解脲支原体检测的首选方法。

经尿道膀胱肿瘤电切术术后护理

目的:总结经尿道膀胱肿瘤电切术术后护理经验。方法:对150例经尿道膀胱肿瘤电切术后给予精心的护理并积极预防并发症的发生。结果:150例患者中147例坚持完成全程膀胱灌注化疗,随访2～5年,其中27例复发,有效率达81%。结论:做好各项护理工作及膀胱灌注的健康教育可提高护理质量,防止并发症的发生,预防膀胱肿瘤术后复发,使患者顺利完成全程治疗。

循证护理在泌外老年患者安全措施中的应用

目的:探讨循证护理在老年患者安全措施中的应用。方法:遵循循证实践步骤,提出问题,收集相关最好的研究证据,结合泌尿外科老年患者具体情况,做出护理决策,实施正确安全护理。结果:300例患者得到及时对症处理,跌倒2例,静脉用药副反应26例,其余无不良反应。结论:循证护理有效的提高了临床护理质量,增强了护理工作的科学性,值得临床推广和应用。

洁悠神喷雾剂预防尿道下裂术后感染的疗效观察

目的探讨洁悠神喷雾剂预防尿道下裂术后感染的疗效。方法选择146例行尿道成形术患儿,行常规尿道成形手术护理的86例患者作为对照组,60例在常规护理基础上喷洒洁悠神长效抗菌剂的患者作为观察组。结果观察组术后感染发生率为8.3%,对照组为19.8%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论洁悠神喷雾剂预防尿道下裂术后感染具有良好效果,值得临床推广。

幼儿肾、输尿管结石体外冲击碎石治疗的护理

目的对幼儿肾及输尿管结石体外冲击碎石治疗的护理。方法对31例肾、输尿管结石幼儿实施体外冲击波碎石(ESWL)治疗,针对幼儿恐惧心理,无法表达或表达不清,不配合等特点,做好ESWL治疗前、治疗中、治疗后的护理工作。结果31例患儿共做ESWL治疗47次,其中17例做ESWL治疗1次,14例做ESWL治疗2～3次。经随访3个月～1年,结石排净31例(100%)。结论ESWL是治疗幼儿肾、输尿管结石安全、有效的首选方法,做好ESWL治疗的护理配合,对确保治疗效果,促进患儿康复,具有重要意义。

钬激光治疗输尿管结石的临床护理

目的总结护理干预在钬激光治疗输尿管结石中的应用效果。方法对70例实施钬激光治疗的输尿管结石患者采取综合护理干预措施,观察护理效果。结果本组患者均顺利完成手术,未发生输尿管穿孔、腹腔感染等并发症。护理满意度100.00%。结论对实施钬激光治疗输尿管结石患者给予综合护理干预措施,可提高手术效果,降低并发症发生率,提高护理满意度。

Ki67基因RNA干扰增殖型腺病毒对肺癌细胞增殖的抑制作用

目的探讨Ki67基因小干扰RNA(Ki67-siRNA)增殖型腺病毒对肺癌细胞的杀伤作用及Ki67的表达情况。方法提取重组腺病毒的DNA,PCR鉴定正确后,大量扩增,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度。ZD-Ki67感染人肺癌细胞系(A549),通过荧光显微镜下观察和结晶紫染色法检测细胞病作用、MTT法检测细胞存活、Western印迹法检测E1A、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Ki67表达。结果PCR鉴定表明ZD55-Ki67包含目的基因且无野生型腺病毒的污染;ZD55-Ki67滴度为4.5×1010PFU/ml;免疫印迹法证实ZD55-Ki67在肿瘤细胞中表达E1A;ZD55-Ki67抑制Ki67表达及肺癌细胞生长的作用显著优于Ad-Ki67。结论ZD55-Ki67能够有效抑制Ki67基因的表达,降低肺癌细胞的增殖能力,为肺癌研究和抗肿瘤基因治疗提供新的策略。

自身γδT细胞联合阿司匹林治疗晚期胃癌的实验研究和临床疗效观察

目的探讨阿司匹林对人γδT细胞功能影响,评估自身γδT细胞联合阿司匹林治疗晚期胃癌的疗效。方法按常规方法培养γδT细胞,收集培养第9天的γδT细胞用不同浓度的阿司匹林诱导24h 后收集上清液用于细胞因子 IFN_(-γ)、TNF—α、IL—12检测,沉淀细胞用于穿孔素、粒酶 B 和 NKG2D 流式细胞测定。17例晚期胃癌患者入院后接受阿司匹林0.1～0.3克/日,口服,3次/日,每4周为1周期,同时采集患者外周血单个核细胞(PBMC),经6～13天培养后分6次输注给患者,回输细胞总数为(2.1～6)×10^(10)个。17例患者中接受1个疗程治疗2例,2个疗程治疗6例,3个疗程治疗6例,4个疗程治疗以上有3例。结果经阿司匹林诱导后γδT细胞穿孔素、粒酶 B、NKG2D 受体表达量明显高于对照组,尤其在阿司匹林浓度为0.8mmol/L时最显著。经0.4～0.8mmol/L 阿司匹林诱导的γδT细胞分泌 IFN_(-γ)量明显高于对照组;分泌的 TNF-α和 IL-12含量与对照组比较无明显差异;当阿司匹林浓度高至3.2mmol/L 时,可以显著抑制 TNF-α的分泌。17例患者用γδT细胞联合阿司匹林治疗后,全组病例均可评价疗效:其中 CR 2例,PR 6例,NC 8例,PD 1例;近期客观有效率47.1%(8/17),中位生存期为12个月。其中有2例患者化疗后接受手术治疗。细胞免疫治疗后大多数患者食欲增加、疼痛减轻、睡眠改善、体重增加。经γδT细胞和阿司匹林联合治疗后患者 CEA 有10例减低,3例增加。结论经阿司匹林诱导后γδT细胞的穿孔素、粒酶 B、NKG2D 受体明显高于对照组,其培养上清液中 IFN_(-γ)含量也明显高于对照组。晚期胃癌经γδT细胞联合阿司匹林治疗后能提高患者生存期,改善患者临床体征,且无毒性不良反应,对晚期胃癌是一种安全有效的治疗方法。

RNA干扰对肾癌细胞端粒酶活性及增殖、凋亡的影响

目的探讨针对人端粒酶RNA(hTR)及其催化亚基(hTERT)的小干扰RNA(siRNA)对肾癌细胞端粒酶活性及其增殖、凋亡的影响。方法将hTR-siRNA、hTERT-siRNA(100nmol/L)单独或联合转染人肾癌786-0细胞,采用RT-PCR法检测hTR、hTERTmRNA表达,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性,MTT法检测细胞增殖,免疫组化TUNEL法检测细胞凋亡。结果(1)hTR-siRNA可显著降低786-0细胞hTRmRNA表达(P<0.01),hTERT-siRNA可显著降低hTERTmRNA表达(P<0.01),但彼此互不影响。(2)二者均能显著抑制端粒酶活性(P<0.01,P<0.01),并增加786-0细胞增殖抑制率及凋亡细胞阳性率(P<0.01,P<0.01)。二者联合应用与单独应用差异亦无显著性(P>0.05)。结论hTR、hTERTsiRNA通过抑制各自基因表达,抑制人肾癌细胞端粒酶活性,进而抑制增殖、促进凋亡。

后腹腔镜手术治疗巨大肾上腺肿瘤

目的:探讨后腹腔镜肾上腺切除术治疗巨大肾上腺肿瘤的可行性。方法:对21例巨大肾上腺肿瘤患者进行后腹腔镜切除手术,男8例,女13例,年龄20～70岁,左侧9例,右侧12例,肿瘤大小6.0cm×3.5cm×3.3cm～9.5cm×8.5cm×8.5cm。结果:19例手术经后腹腔镜完成,2例术中转开放手术。所有患者均顺利恢复,无并发症。病理报告嗜铬细胞瘤12例,肾上腺囊肿3例,节细胞神经瘤1例,神经纤维瘤1例,髓性脂肪瘤3例,无功能腺瘤1例。随访3～72个月,未见肿瘤复发和转移。结论:对于腹腔镜操作熟练者,后腹腔镜肾上腺切除术治疗巨大肾上腺肿瘤是可行的。

膀胱癌术后羟喜树碱膀胱内灌注的护理

膀胱癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤之一,其术后2年内复发率较高,达60%～90%。术后膀胱内灌注化疗药物可杀伤残余肿瘤细胞,降低复发率,防止肿瘤向深层浸润及肌层或发生转移，具有重要意义。我科2005年1月～2006年8月采用羟喜树碱对166例浅表性膀胱癌患者术后行膀胱内灌注，效果良好，有效预防术后肿瘤复发，延长患者生存期。现将护理体会报道如下。

循证护理在持续膀胱冲洗患者中的应用

循证护理，又称实证护理或求证护理，是指护理人员在计划护理活动过程中，将科研理论与临床经验、患者需求相结合，获取实证，作为临床护理决策依据的过程。其核心是强调证据，要求在严格的科学证明的基础上开展护理工作。持续膀胱冲洗，即通过留置导尿管或耻骨上膀胱造瘘管，将药液输注膀胱内，然后再经导管排出体外，如此反复多次将膀胱内残渣、血液、脓液等冲出防止感染或堵塞尿路，是前列腺增生与膀胱肿瘤病人术后必需的护理操作技术。针对持续膀胱冲洗患者常见的护理问题进行循证，从中国期刊全文数据库（CJFD）检索出相关文章49篇，将收集到的文献应用科学的评价方法，对证据的真实性，可靠性并结合临床实际情况做出具体的评价，最后从10篇文章中，获得最佳研究实证，制定措施并应用于实践。现将循证护理在临床持续膀胱冲洗患者中的应用总结如下。

人组织激肽释放酶6在前列腺癌中的表达和意义

目的初步探讨人组织激肽释放酶6(Kallikrein 6,KLK6)在前列腺癌中的表达和意义。方法搜集徐州医学附属医院泌尿外科2010-06—2013-10行前列腺根治手术患者组织标本共65例,其中40例前列腺癌(Prostate Cancer,PCa),25例为前列腺增生组织,应用免疫组织化学两步法,检测组织中KLK6蛋白表达情况。结果 PCa患者组织中KLK6阳性表达率为75%,前列腺增生(Hyperplasia of prostate,BPH)组织KLK6阳性表达率为24%,两者比较癌组织显著高于增生组织(P<0.01);前列腺癌中低危患者KLK6阳性表达率为58.25%,中高危患者为75%,两者比较中高危患者明显高于低危患者(P<0.05)。结论 KLK6在前列腺癌组织表达明显高于前列腺增生,中高危患者明显高于低危患者,KLK6基因可能在前列腺癌诊断和预后判断中存在一定价值。

Ki-67基因siRNA表达质粒的构建、鉴定及功能研究

目的构建肿瘤增殖基因Ki-67小干扰RNA(siRNA)表达质粒,研究其对人肾癌细胞Ki-67基因表达的阻抑作用,探索肾癌基因治疗新的途径。方法设计有小发夹机构的2条Ki-67siRNA对应模板DNA序列,煺火处理后克隆至pSliencer3.1质粒,构建重组质粒pSliencer-Ki-67。将pSliencer-Ki-67转染人肾癌786-0细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Westernblot检测Ki-67表达。结果酶切及测序证实质粒pSliencer-Ki-67构建成功。其可显著抑制786-0细胞Ki-67mRNA、Ki-67蛋白表达。结论成功构建的Ki-67siRNA表达质粒pSliencer-Ki-67能抑制人肾癌786-0细胞Ki-67基因表达。

Ki67基因短发夹状RNA表达载体对肾癌细胞生长的抑制作用

目的研究针对Ki67基因的短发夹状RNA(shRNA)表达载体pSilencer-Ki67对人肾癌细胞生长的抑制作用。方法将pSilencer-Ki67转染人肾癌786-0细胞,24、48、72、120、144 h后分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot技术检测Ki67 mRNA、蛋白表达,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,原位末端标记法检测细胞凋亡。结果pSilencer-Ki67转染后48 h 786-0细胞Ki67mRNA表达(34．1±1．7)%、蛋白表达(42．6±1．7)%降低最明显,与空质粒对照组[(97．7±0．9)%、(97．3±1．6)%]比较差异均有统计学意义(P＜0．01)。pSilencer-Ki67处理后48 h细胞增殖抑制率(76．7±3．2)%最高,72 h凋亡细胞阳性率(74．3±5．9)%最高,与空质粒对照组[(7．0±0．5)%、(8．4±1．1)%]比较差异有统计学意义(P＜0．01)。pSilencer-Ki67的这些作用可持续144 h。结论pSilencer-Ki67能有效、持续抑制人肾癌786-0细胞生长,有望成为肾癌基因治疗的有效工具。

^(125)I偶联Ki-67反义核酸对人肾癌细胞生长及凋亡的调控作用

目的 探讨12 5I偶联Ki 67基因反义寡核苷酸 (12 5I ASODN)对人肾癌细胞生长及凋亡的调控作用。方法 采用氯胺 T法将 10 μmol/L浓度的Ki 67反义寡核苷酸 (ASODN)与12 5I偶联 ,12 5I ASODN放射浓度为 2 .5 9MBq/L ,脂质体包装后转导肾癌 786 0细胞系。采用免疫组织化学、Western印迹技术检测Ki 67表达 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法检测细胞增殖 ,免疫组织化学脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记 (TUNEL)法检测细胞凋亡。结果 12 5I ASODN处理组肾癌细胞Ki 67表达阳性率 (2 1.5± 1.2 ) %降低 ,Ki 67蛋白 (4 9.9± 4.5 ) %降低 ,与ASODN处理组(2 9.9± 0 .4) %、(82 .1± 1.9) %比较差异有非常显著性 (P均 <0 .0 1)。细胞增殖抑制率12 5I A SODN处理组 (4 7.9± 3 .6) %与ASODN处理组 (2 1.8± 2 .5 ) %比较差异有非常显著性 (P <0 .0 1)。凋亡细胞阳性率12 5I ASODN处理组 (2 8.9± 1.3 ) %与ASODN处理组 (15 .7± 0 .5 ) %比较差异有非常显著性 (P <0 .0 1)。结论 12 5I ASODN较之ASODN具有更强的抑制肾癌细胞增殖、促进凋亡作用。

RNA干扰对肾癌细胞端粒酶基因表达和活性的抑制作用及其增殖、凋亡的影响

目的探讨小干扰RNA(siRNA)对人肾癌细胞端粒酶基因表达、活性的抑制作用及对肾癌细胞增殖、凋亡的影响。方法将针对人端粒酶RNA(hTR)模板区的siRNA(100nmol/L)转染肾癌7860细胞,采用RTPCR检测7860细胞端粒酶mRNA表达,端粒重复序列扩增酶联免疫吸附法检测端粒酶活性,MTT法检测细胞增殖,免疫细胞化学TUNEL法检测细胞凋亡。结果hTRsiRNA处理组7860细胞端粒酶mRNA表达(40.7±1.5)%降低,端粒酶活性(32.7±2.3)%降低,细胞增殖抑制率(63.6±1.6)%增加,凋亡细胞阳性率(39.4±0.6)%增加。分别与阴性siRNA对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论siRNA能抑制人肾癌细胞端粒酶mRNA表达及活性,进而抑制其增殖、促进其凋亡,有望成为肾癌基因治疗的有效工具。