医学院校教育教学现状及改进策略的思考——以《生理学》课程为例

随着经济社会发展,人们对医疗卫生服务工作提出了更高、更新和更全面的需求。新形势下,需要医学院校培养一支专业理论知识扎实、实践技能过硬,在疾病防控、诊疗、康复养生、健康教育等方面具有一定工作能力,同时具备良好人文职业素养及沟通执行能力的复合应用型医疗卫生专业人才队伍。由此,医学院校需实事求是、与时俱进,积极开展教育教学改革,不断提升教育教学层次和综合质量。本文以《生理学》课程为例,深入分析当前医学院校教育教学工作现状,坚持问题导向、聚焦人才培养,务实提出相应的改进策略以推进教改工作不断深化。

结肠癌中Nup107的表达与临床病理特征及预后的关系

目的:检测Nup107在结肠癌组织中的表达并探究其与患者临床病理特征及预后的关系。方法:通过Ualcan数据库和实时定量PCR观察Nup107 mRNA在结肠癌组织中的表达水平;选取南京医科大学附属淮安第一医院结肠癌患者226例,采用免疫组织化学染色检测Nup107蛋白在结肠癌组织和正常结肠黏膜中的表达水平;结合临床资料分析Nup107表达水平与患者临床特征及预后的关系;通过基因富集分析初步探讨Nup107在结肠癌中的作用机制。结果:与正常结肠黏膜组织相比,结肠癌组织中Nup107的m RNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);Nup107表达与肿瘤大小(P=0.004)、淋巴结转移(P=0.002)、远处转移(P=0.007)、AJCC分期(P=0.003)、Ki67表达(P=0.001)显著相关;Nup107高表达的结肠癌患者总体生存率低于Nup107低表达的结肠癌患者(P<0.001)。Nup107在结肠癌中可能参与基础转录因子、错配修复、同源重组、核糖体、剪接体、RNA降解等途径。结论:Nup107是影响患者预后的独立危险因素,有望为结肠癌患者的诊断和治疗提供新的策略。

miR-186-5p对冠心病大鼠血管内皮细胞损伤及FGF2/FGFR1信号通路的影响

目的探究微小RNA-186-5p(miR-186-5p)对冠心病(CHD)大鼠血管内皮细胞损伤的影响,以及对成纤维细胞生长因子2(FGF2)/成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)信号通路的作用。方法48只雄性SD大鼠均分成对照组、模型组、miR-186-5p抑制剂组和miR-186-5p抑制剂NC组。除对照组外,其余组大鼠均构建CHD模型,并给予相应干预4周。测定大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(LVFS)以及血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α、一氧化氮(NO)和内皮素(ET)-1水平;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠冠状动脉组织的病理学变化;Western blot法检测大鼠冠状动脉组织中FGF2、FGFR1蛋白相对表达水平;双荧光素酶验证miR-186-5p与FGF2的靶向关系。结果对照组大鼠冠状动脉血管管壁形态均匀,无炎性细胞浸润;模型组和miR-186-5p抑制剂NC组血管内皮细胞排列紊乱,炎性细胞浸润明显;miR-186-5p抑制剂组较模型组病理变化程度减轻,炎性细胞浸润减少。与对照组比较,模型组LVEF、LVFS、HDL-C、NO水平及FGF2、FGFR1蛋白相对表达水平降低,而TC、TG、LDL-C、IL-1β、IL-6、TNF-α、ET-1水平升高(P<0.05)。与模型组和miR-186-5p抑制剂NC组比较,miR-186-5p抑制剂组大鼠LVEF、LVFS、HDL-C、NO水平及FGF2、FGFR1蛋白相对表达水平升高,而TC、TG、LDL-C、IL-1β、IL-6、TNF-α、ET-1水平降低(P<0.05)。模型组和miR-186-5p抑制剂NC组各指标差异无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告实验结果证实,miR-186-5p与FGF2存在靶向结合位点。结论miR-186-5p的下调可减轻CHD大鼠的炎症反应和血管内皮细胞损伤,该作用与激活FGF2/FGFR1信号通路有关。

脂肪间充质干细胞来源外泌体miR-126-3p对人脐静脉内皮细胞糖脂毒性的作用

背景:脂肪间充质干细胞衍生外泌体(adipose-derived mesenchymal stem cells released exosomes,AMSC-Exos)中miR-126-3p可作为糖尿病的一种潜在生物标志物,但其对人脐静脉内皮细胞糖脂毒性的作用及其相关机制研究较少。目的:探究AMSC-Exos中miR-126-3p对人脐静脉内皮细胞糖脂毒性的效用及作用机制。方法:①以30 mmol/L葡萄糖与100μmol/L棕榈酸诱导人脐静脉内皮细胞糖脂毒性体外模型;②收集第4代脂肪间充质干细胞上清液提取外泌体,透射电镜观察其形态,纳米颗粒跟踪分析外泌体粒径分布范围;③AMSC-Exos处理糖脂毒性人脐静脉内皮细胞,流式细胞术检测活性氧水平及细胞凋亡率,ELISA检测培养上清中炎症因子水平;④RT-qPCR分析AMSC-Exos、与脂肪间充质干细胞共培养后正常人脐静脉内皮细胞中miR-126-3p mRNA相对表达水平;⑤miR-126-3p转染糖脂毒性人脐静脉内皮细胞,CCK-8检测细胞增殖情况,Western blot检测凋亡蛋白的表达量;⑥生物信息学软件预测和分析miR-126-3p靶基因,双荧光素酶报告基因实验进行验证,并预测信号通路;⑦CRK转染糖脂毒性人脐静脉内皮细胞,Western blot检测凋亡蛋白及p-AKT的表达量;⑧AKT通路抑制剂RG7440与miR-126-3p过表达/AMSC-Exos共处理糖脂毒性人脐静脉内皮细胞,Western blot检测凋亡蛋白的表达量,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果与结论:①AMSC-Exos为形态一致的圆形或椭圆形膜性囊泡,粒径范围30-200 nm;②与模型组相比,AMSC-Exos可明显降低白细胞介素1β、白细胞介素6和白细胞介素8的表达量(P<0.05,P<0.001),并能显著降低活性氧水平和细胞凋亡率(P<0.05);③与单纯脂肪间充质干细胞相比,AMSC-Exos内miR-126-3p的mRNA相对表达量显著升高(P<0.001),与单纯人脐静脉内皮细胞相比,与脂肪间充质干细胞共培养可明显提高人脐静脉内皮细胞中miR-126-3p表达量(P<0.001);④miR-126-3p过表达可明显促进糖脂毒性人脐静脉内皮细胞增殖,降低细胞凋亡率,同时显著降低Cleaved caspase 3,9蛋白表达量(P<0.01,P<0.001);⑤生物信息学分析及双荧光素酶报告基因实验证实CRK为miR-126-3p靶基因,同时确认AKT途径作为下一步研究对象;⑥CRK过表达可激活AKT途径并上调Cleaved caspase 3,9蛋白表达量;与外泌体组相比,外泌体+AKT抑制剂组细胞凋亡率显著升高(P<0.001);⑦结果表明,来源于AMSC-Exos的miR-126-3p能够改善人脐静脉内皮细胞的糖脂毒性,推测其机制可能是miR-126-3p通过靶向CRK基因调节AKT途径而发挥作用。

木聚糖酶重组毕赤酵母合成培养基的Plackett-Burman法优化

目的:筛选合成培养基中影响重组毕赤酵母高效表达木聚糖酶的关键成分。方法:首先通过单因素实验和t检验筛选重组毕赤酵母表达木聚糖酶的最佳初始诱导培养基,其次利用Plackett-Burman设计及逐步回归建立培养基成分和响应值间的多元线性回归模型,并筛选出关键培养基成分,最后利用相关系数分析,对非关键成分含量的选取做出合理的取舍。结果:筛选出甘油磷酸钠、硫酸钙、PTM1和硫酸铵是影响重组酵母表达木聚糖酶的关键培养基成分,且当培养基组合为甘油磷酸钠20 g/L,(NH4)2 SO42.0 g/L,CaSO4·2H2O 2.0 g/L,K2 SO420.0 g/L,MgSO4·7H2O 6.0 g/L,PTM18.0 mL/L,甲醇10.0 mL/L,吐温802.0 g/L时,木聚糖酶的酶活力和比酶活分别达到2298.4 U/mL和9926.3 U/mg,分别是优化前的3.055倍和3.889倍。结论:Plackett-Burman设计不仅可以显著提升培养基优化目标,还能筛选出关键培养基成分,从而为进一步优化奠定了基础。

基于均匀设计和逐步回归的热纤梭菌发酵产糖的培养基优化研究

以滤纸为主要原料,以葡萄糖和可溶性总糖为优化目标,利用均匀设计和逐步回归法对培养基中重要成分影响热纤梭菌发酵产糖的规律进行了研究。结果表明当实验水平分别取滤纸20.0 g/L,酵母粉3.50 g/L,氯化镁2.0 g/L,半胱氨酸0.788 g/L,磷酸氢二钾8.0 g/L,磷酸二氢钾1.4 g/L,尿素4.0 g/L和氯化钙0.05g/L和滤纸20 g/L,酵母粉5.74 g/L,氯化镁0.424 g/L,半胱氨酸0.996 g/L,磷酸氢二钾7.99 g/L,磷酸二氢钾4.99 g/L,尿素1.17 g/L和氯化钙0.072 g/L时,可溶性总糖和葡萄糖的得率分别为77.26%和45%,浓度分别可达15.452 g/L和8.996 g/L,分别比优化前的浓度提高35.75%和58.0%。

需求分析理论视域下的人体生理学课程教学资源建设及应用效果

目的:基于需求分析理论,建设人体生理学课程教学资源,探讨其应用效果。方法:选取2018级三年制护理专科在校生作为研究对象,按随机化原则,将其按所在班级纳入观察组(97人)和对照组(99人)。观察组学生采用需求分析理论视域下一体化教学资源进行教学,对照组学生则应用传统课程资源进行教学。课程结束后,比较两组学生的理论与实践考核成绩、教学感受的差异性。采用SPSS 20.0进行t检验。结果:观察组学生的理论[(73.67±8.76)vs.(70.48±8.36)]和实践技能成绩[(84.41±4.83)vs.(83.63±4.27)]与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);在对学习探究意识、自主学习能力、评判思维能力等9个教学效果分项目及总体的评分上高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:基于需求分析理论进行人体生理学教学资源建设,可提高资源建设的有效性和针对性,将其运用于教学可显著提升教学效果、激发学生主观能动性、培养其综合能力、提高课堂效率。

α-眼镜蛇神经毒素对小鼠的镇痛作用及脊髓背根神经节蛋白激酶A活性的影响

目的研究α-眼镜蛇神经毒素(α-cobratoxin,α-CbTX)对小鼠的镇痛作用及脊髓背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)内蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)活性的影响。方法健康雄性ICR小鼠(n=102)采用随机数字表法分为α-CbTX低、中、高剂量组(剂量分别为1 mg/kg、3 mg/kg、9 mg/kg,灌胃,每组n=21)、溶剂对照组(等体积0.9%氯化钠溶液,灌胃,n=21)和吗啡阳性对照组(3 mg/kg,腹腔注射,n=6)或阿司匹林阳性对照组(300 mg/kg,灌胃,n=12)。采用热板实验、醋酸扭体实验及福尔马林舔足实验评价α-CbTX的镇痛效应。采用福尔马林足底注射诱发疼痛30 min后,取L4~L6背根神经节,采用Western blot检测各组小鼠DRG内PKA C-α表达变化。采用SPSS 16.0进行统计分析,热板实验数据采用重复测量方差分析,其他实验数据用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果在热板实验中,小鼠舔爪潜伏期的组别和时间的交互作用显著(F=8.902,P<0.05);小鼠给药后0.5 h,α-CbTX中剂量组[(11.83±1.47)s]、高剂量组[(14.33±12.1)s]舔爪潜伏期均长于溶剂对照组[(8.17±0.75)s](t=4.461,7.053,均P<0.05),α-CbTX中剂量组药效持续到给药后1.5 h(均P<0.05),α-CbTX高剂量组药效持续到给药后2 h(均P<0.05)。在醋酸扭体实验中,α-CbTX低、中、高各剂量组小鼠扭体次数[(34.50±3.62)次、(26.17±2.40)次、(13.83±3.76)次]均明显低于溶剂对照组[(42.50±4.59)次](t=3.938,8.040,14.112,均P<0.05)。在福尔马林实验Ⅱ相时间段,α-CbTX低、中、高各剂量组小鼠舔爪总时间[(71.17±6.46)s、(54.67±6.41)s、(40.50±3.89)s]均明显短于溶剂对照组[(98.67±11.50)s](t=6.950,11.120,14.700,均P<0.05)。在Western blot检测实验中,与溶剂对照组[(0.22±0.01)]比较,α-CbTX低、中、高各剂量组小鼠DRG中PKA C-α[(0.31±0.02)、(0.41±0.03)、(0.44±0.02)]表达均上调(t=3.140,6.471,7.492,均P<0.05)。结论α-CbTX具有明显的镇痛作用,其镇痛机制可能与激活蛋白激酶A的活性有关。

miR⁃33⁃5p对糖尿病肾脏疾病大鼠肾纤维化影响机制的研究

目的探讨miR‐33‐5p对DKD大鼠肾纤维化的影响机制。方法选取60只SD大鼠中未经任何处理的15只为正常对照(NC)组,其余45只建立DKD大鼠模型,造模成功后随机分为DKD模型组(DKD)、miR‐33‐5p拮抗剂组(miR‐33‐5p antagomir)及其阴性对照(antagomir‐NC)组,每组各15只。antagomir‐NC、miR‐33‐5p antagomir组尾静脉注射antagomir‐NC或miR‐33‐5p antagomir,每周1次,持续12周。检测各组FPG、24 hUAlb、BUN和血肌酐(Scr)含量。Masson染色观察各组肾纤维化程度。qRT‐PCR检测肾组织中miR‐33‐5p、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)mRNA表达水平。Western blot检测肾组织中TGF‐β1、Smad同源物3(Smad3)、Smad2、p‐Smad3、p‐Smad2、平滑肌肌动蛋白α(α‐SMA)等蛋白表达水平。结果与DKD组比较,miR‐33‐5p antagomir组肾脏间质胶原纤维减少,24 hUAlb、FPG、BUN、Scr含量降低[(36.22±2.41)vs(19.24±1.25)mg/24 h,(29.15±1.53)vs(14.25±1.76)mmol/L,(18.33±3.16)vs(13.73±0.68)mmol/L,(60.17±2.37)vs(39.42±1.74)μmol/L,P<0.05],肾组织中miR‐33‐5p、CollagenⅠmRNA、CollagenⅢmRNA降低[(5.19±0.20)vs(1.88±0.27),(3.44±0.21)vs(1.28±0.08),(4.71±0.32)vs(2.06±0.12),P<0.05],TGF‐β1、p‐Smad3/Smad3、p‐Smad2/Smad2、α‐SMA等蛋白表达水平降低(P<0.05)。antagomir‐NC、DKD组各指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论抑制miR‐33‐5p表达可改善DKD大鼠肾纤维化,其作用机制可能与阻断TGF‐β/Smad信号通路有关。

解剖学教学与临床应用有机结合的策略探析

人体解剖学课程的质量和水平高低,事关护理专业学生的课程学习、临床应用、就业行医等许多问题。因此,高职护理专业在进行人体解剖学教学过程中,必须有效结合临床应用去科学遴选教学内容,多元优化教学方法,不断创新教学模式,这样做既可以增强解剖学课程的实用性和趣味性,也可以大幅提升学生对本门学科的学习兴趣,培养和提升学生的综合素养。本文就解剖学教学与临床应用有机结合问题进行科学分析,提出几点个人看法,以为广大同仁提供理论借鉴。