非小细胞肺癌中miR-320a靶向PD-L1对肿瘤免疫调节的影响

目的探讨miR-320a对EGFR突变型非小细胞肺癌细胞中PD-L1的表达以及免疫抑制的影响。方法采用qRT-PCR、western blot和flow cytometry法检测EGFR野生型的H460和A549细胞以及EGFR突变型的HCC827和H1975细胞中miR-320a和PD-L1的表达水平。运用生物信息学工具TargetScan和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-320a与PD-L1的3’UTR结合。采用Annexin V-FITC/PI双染法检测T细胞的凋亡率以及采用MTT法检测H1975细胞的存活率。结果EGFR突变型的HCC827和H1975细胞中,miR-320a呈较低表达,而PD-L1呈较高表达。miR-320a mimics可下调PD-L1的表达、抑制PD-L13’UTR的荧光素酶活性以及缩短PD-L1 mRNA的半衰期。此外,miR-320a mimics还可抑制T细胞的凋亡和降低H1975细胞的存活率。结论miR-320a与PD-L13’UTR结合可促进PD-L1 mRNA的降解,下调PD-L1的表达,进而减弱肿瘤免疫抑制。miR-320a有望成为EGFR突变型非小细胞肺癌患者使用免疫治疗的新型分子标志物。