1株猪繁殖与呼吸综合征病毒云南株的遗传演化分析

将2008年云南某猪场送检的疑似猪繁殖与呼吸综合征病例的病料处理后,接种Marc-145细胞,并对其进行病毒分离和鉴定,将分离株命名为Yunnan-08株。根据GenBank中PRRSV的基因序列进行设计。合成了针对ORF5和ORF7基因的引物,将RT-PCR扩增目的基因克隆入pGEM-Teasy载体中进行测序,再将测序结果提交给GenBank。应用DNAstar软件包分析,将该毒株的ORF5和ORF7基因序列及其推断氨基酸序列分别与PRRSV欧洲型代表株Lv、美洲型代表株VR2332和中国参考株CH-1a(AY032626)等毒株相应基因序列进行核苷酸比对,并与ATCC-VR2332(U87392)株、Lv(M96262)株等毒株进行氨基酸同源性比较,绘制系统的进化树,确定遗传演化关系。结果表明,该分离株的ORF7与VR2332的ORF7基因同源性为56.9%,与Lv株的ORF7基因同源性为41.7%;该分离株的ORF5与VR2332的ORF5基因同源性为87.1%,与Lv株的ORF5基因同源性为63.8%。表明新分离到的PRRSV Yunnan-08株仍属北美型,但存在很大变异,该分离株的ORF5与中国标准株CH-1a的ORF5基因同源性为93.4%,而ORF7与中国标准株CH-1a的ORF7基因同源性仅为56.6%。同一个毒株不同的开放阅读框架遗传演化的差异如此之大,这在以往未见报道,该病毒的变异为我国对该病的防控设置了障碍,毒株遗传监测显得十分重要。

鸭源新城疫病毒单克隆抗体的研制

新城疫（Newcastle disease，ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）引起的禽类的一种高度接触性、烈性传染病，给世界养禽业造成严重的经济损失和危害。以往文献报道水禽为NDV的自然贮存宿主，可以感染但不发病。

一起实验鸡发生鸡白痢沙门氏菌感染

从某实验鸡场购回1周龄SPF雏鸡200羽准备进行试验,饲养1周后爆发疾病,疑似鸡白痢,取病鸡肝脏经过前增菌,鉴别培养,细菌菌落形态观察,染色镜检、生化试验、血清学鉴定及16S rRNA基因序列测定,分离鉴定到了1株鸡白痢沙门氏菌,菌体型为O1,9,12,动力学试验显示该菌株不具有运动能力。结果提示,加强实验鸡场的沙门氏菌净化和接雏后的饲养管理对于保障实验动物的安全和动物实验的质量十分重要。

猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的研制和初步应用

Marc-145细胞扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TZ1株,制备免疫原来免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞融合。间接ELISA(iELISA)筛选杂交瘤细胞。亚克隆后获得了3株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名4B6-F2、8E5-C3、3F8-A3,其中4B6-F2、8E5-C3抗体亚类为IgG2a,3F8-A3为IgG1。iELISA试验结果表明,3株抗体均能与15株临床分离的PRRSV发生特异性反应,而与其它常见猪病原体如PPV、PRV、HCV及PCV2均无反应性;间接荧光抗体试验(IFAT)结果表明,所得到的3株抗体均能与PRRSV反应产生特异性荧光,这些结果为进一步开展PRRSV检测奠定了基础。