基于流浸膏物料性质的中药口服液体制剂剂型设计与优化关键技术研究

中药口服液体制剂具有显效迅速、服用方便等优点,但仍存在有效成分损失、澄明度降低和特殊患群(儿童)口服顺应性差的共性瓶颈问题。中药提取物流浸膏作为口服液体制剂生产过程的中间体,其部分性质很大程度上决定口服液体制剂的性质。该文构建中药流浸膏物料性质表征体系,挖掘出与制剂性质密切相关的物料性质:溶解性、酸碱性和味道,在此基础上,建立基于溶解性能的中药口服液体制剂有效性提升技术、基于酸碱性的稳定性提高技术以及基于味道性能的中药口服液体制剂口感改善技术,从而提升产品的内在品质。总结基于流浸膏物料性质的中药口服液体制剂剂型设计与优化技术的研究思路,以期为中药口服液体制剂的研究开发提供理论指导和技术支撑。

药材品种与受热时间对淫羊藿饮片中主要黄酮类成分的影响规律研究

目的:研究药材品种与受热时间两因素对淫羊藿饮片中主要黄酮类成分含量的影响规律。方法:设定温度为170℃,不同品种共39批淫羊藿饮片加热炮制0 min、5 min、10 min,高效液相色谱仪测定其主要黄酮类成分朝藿定A、B、C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ的含量,并采用方差分析研究药材品种与受热时间2因素对5种主要黄酮类成分含量变化的影响。结果:朝藿定A、B、C的含量受药材品种影响极显著(P<0.01),宝藿苷Ⅰ影响显著(P<0.05);朝藿定A、朝藿定B、淫羊藿苷和宝藿苷Ⅰ的含量受加热时间影响极显著(P<0.01);但5种黄酮类成分不受品种和受热时间互作效应的影响(P>0.05)。结论:药材品种与受热时间是影响淫羊藿黄酮类成分含量的2个重要因素,柔毛淫羊藿中朝藿定A、C含量丰富,淫羊藿中朝藿定B、宝藿苷Ⅰ的含量相对较高;受热后朝藿定A、B、C含量减少,淫羊藿苷和宝藿苷Ⅰ含量增加。本研究为淫羊藿的饮片品种鉴别、炮制工艺制定、炮制机理探索以及临床合理用药提供科学依据。

哈萨克药骆驼蓬草的质量标准研究

目的:建立哈萨克药骆驼蓬草药材的质量标准。方法:以新疆哈萨克地区采集的10批骆驼蓬草药材为研究对象,考察其性状;采用薄层色谱(TLC)法对药材中骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱进行定性鉴别;采用2015版《中国药典》(四部)相关方法检查其水分、总灰分、酸不溶性灰分和醇浸出物含量;采用高效液相色谱(HPLC)法测定药材中骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的含量,色谱柱为X-bridgeC1(8250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-醋酸铵缓冲液(冰醋酸调节pH至6),梯度洗脱,检测波长为267nm,柱温为25℃,流速为1mL/min,进样量为5μL。结果:TLC法鉴别结果显示,10批药材在骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱对照品相同位置处均显示清晰斑点;水分、总灰分、酸不溶性灰分分别不得高于12%、22%、2%,醇浸出物不得低于16%。HPLC法考察结果显示,骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱分别在15.22~301.40、15.09~301.80μg/mL质量浓度范围内线性关系良好,精密度、重复性、稳定性试验的RSD均小于4%,平均回收率分别为100.22%、100.94%(RSD均小于2%);含量测定结果显示,该药材总生物碱含量(以骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱合计)不得少于6.5mg/g。结论:本研究在原标准基础上增加了检查项,建立了TLC法鉴别骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬和HPLC法测定两者含量的方法。所建质量标准可用于全面控制新疆哈萨克地区骆驼蓬草药材的质量。

牛耳枫的高效液相色谱指纹图谱研究

目的:采用HPLC法对广西荔浦地区的牛耳枫药材进行指纹图谱研究。方法:利用Agilent HP 1260,测定同一地区的12批牛耳枫药材。Waters XBridge^(TM)C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长254 nm。结果:建立了广西荔浦地区的牛耳枫药材的HPLC指纹图谱,标定了11个共有峰,指认了2个峰,各指纹图谱的相似度均达到0.85以上;利用系统聚类分析,将同一地区的牛耳枫分为3类;利用主成分分析,确定3个主成分,累计贡献率为81.980%;以两个主成分作二维散点图,将不同批次的牛耳枫分为3大类。结论:运用这3种统计分析方法均能够较好的对指纹图谱进行识别,为牛耳枫的鉴别、质量控制等提供了新的科学依据。

基于模式生物斑马鱼创立中药壮骨效应评价新模型的思路与方法

中药治疗骨质疏松的功效正日益受到重视,但壮骨中药及其成分特别是量微成分的活性评价却难以高效开展。新模型、新方法的建立有益于丰富中药壮骨效应评价的思路与方法。模式生物斑马鱼是一种极好的、热门的药学研究工具,根据其骨骼发育的生理、遗传学特点和优势,将斑马鱼用于中药复杂体系及其成分的壮骨效应评价,具有合理性和可行性。本文概述了中药壮骨效应评价的现状及不足,分析了斑马鱼中药壮骨效应评价模型建立的依据,提出了斑马鱼中药壮骨效应评价模型的建立方法,并对该模型的前景进行展望。

维甲酸对早期发育斑马鱼的心脏与骨骼毒性研究

目的：研究维甲酸对早期发育斑马鱼心脏及骨骼的毒性。方法：将受精后24 h的斑马鱼胚胎作为毒性模型,分别暴露于含维甲酸0.1、1、10、25、100μmol/L的培养基中,分别于培养24、48 h后观察胚胎和幼鱼心脏形态的变化,并计算半数致死浓度（LC50）;将受精后4 d的斑马鱼幼鱼作为骨骼致畸模型,分别暴露于含维甲酸0.1、1、10、25、50μmol/L的培养基中,5 d后处死,采用茜素红对各组斑马鱼骨骼染色,并以显微镜采集图像,观察骨骼染色区域差异。结果：维甲酸对斑马鱼胚胎的孵化能力造成了明显不利影响,且胚胎在维甲酸暴露过程中均产生了明显的心脏致畸现象。1~100μmol/L维甲酸均对胚胎和幼鱼产生心脏致畸效应,胚胎和幼鱼表现出的主要畸形特征有心脏形态线性化、心包水肿、卵黄囊肿胀、血细胞在心区堆积。100μmol/L维甲酸可抑制胚胎的孵化能力,且对胚胎和幼鱼造成致死效应,暴露24、48 h后LC_（50）分别为36.44、23.69μmol/L。0.1~50μmol/L维甲酸均使斑马鱼幼鱼脊柱提前骨化,且骨化程度与维甲酸浓度呈正相关。结论：维甲酸对斑马鱼胚胎和幼鱼具有心脏和骨骼毒性,且与维甲酸的浓度呈正相关。

接骨汤抗泼尼松龙诱导斑马鱼骨丢失的作用研究

目的:本文采用泼尼松龙诱导的斑马鱼骨质疏松模型,研究临床优效方接骨汤防止骨丢失,促进骨生成的作用。方法:将受精后5天的斑马鱼幼鱼暴露在含25μmol·L-1泼尼松龙的不同浓度接骨汤(0.025、0.25、2.5、25、100 mg生药·L-1)溶液中,同时设25μmol·L-1泼尼松龙模型药物组,含25μmol·L-1泼尼松龙的依替膦酸二钠(15、30 mg·L-1)阳性药物组及0.5%DMSO溶媒对照组。28.5°C下在24孔板中培养,每天换液培养至第10天处死。采用茜素红对培养10天的各组斑马鱼幼鱼骨骼染色,并以显微检测、数码成像方法定量分析骨骼染色区域。结果:与溶媒阴性对照组相比,25μmol·L-1浓度泼尼松龙组(模型组)的斑马鱼骨骼染色面积和染色光密度值显著减少;与模型组比,依替膦酸二钠(15、30 mg·L-1)和接骨汤(2.5、25、100 mg生药·L-1)组的鱼骨染色矿化面积和累积光密度值显著增加,且呈一定量效关系。结论:用泼尼松龙诱导的斑马鱼骨质疏松模型成功评价了接骨汤防止骨丢失,促进骨生成的作用,为该模型的合理性与可靠性提供依据。

药理效应法测定淫羊藿生品及不同炮制品的药动学参数

目的:采用药理效应法测定淫羊藿生品及清炒与油炙两种炮制品的药动学参数。方法:采用小鼠肾阳虚模型,以氧化应激反应水平为观察指标,测定淫羊藿生品及不同炮制品的药物动力学参数。结果:淫羊藿生品及不同炮制品口服给药后的主要药物动力学参数为:淫羊藿生品AUC(0-t)=184.77(g/kg).h,AUC(0-∞)=342.30(g/kg).h,MRT(0-t)=5.95 h,MRT(0-∞)=28.58 h,Tmax=0.75 h,Cmax=57.67 g/kg;淫羊藿清炒品AUC(0-t)=208.08(g/kg).h,AUC(0-∞)=523.95(g/kg).h,MRT(0-t)=5.86 h,MRT(0-∞)=22.55 h,Tmax=1 h,Cmax=62.53 g/kg;淫羊藿油炙品AUC(0-t)=232.17(g/kg).h,AUC(0-∞)=629.96(g/kg).h,MRT(0-t)=5.28 h,MRT(0-∞)=19.62 h,Tmax=1.5 h,Cmax=81.84 g/kg。结论:淫羊藿生品、清炒品、油炙品3者的达峰浓度Cmax、药时曲线下面积AUC等药动学特征参数均具有显著性差异,且油炙品>清炒品>生品。

泼尼松龙诱导斑马鱼骨质疏松模型的建立

本文首次采用斑马鱼为模型动物,以糖皮质激素泼尼松龙为造模用药,建立一种快速、高效的骨质疏松新动物模型。选用受精后4 d或5 d的幼鱼暴露于不同浓度泼尼松龙溶液中,同时设0.5%DMSO溶媒阴性对照组,28.5℃下在24孔板中培养5 d,至斑马鱼颅骨形成。采用茜素红对培养至9 d或10 d的斑马鱼骨骼进行染色,以显微检测、数码成像方法定量分析骨骼染色区域。与溶媒阴性对照组相比,2.5,10,25μmol.L-1泼尼松龙组的斑马鱼骨骼染色面积和染色光密度值显著减少,提示泼尼松龙使斑马鱼骨骼矿化量和骨密度显著降低,成功诱导斑马鱼骨质疏松。并用该模型成功验证鲑鱼降钙素和依替膦酸二钠防治骨质疏松的作用。

淫羊藿生品及羊脂炙品中主成分淫羊藿苷的吸收差异比较

目的:考察淫羊藿生品与炮制品中主成分淫羊藿苷的吸收差异。方法:采用Caco-2细胞模型,用高效液相色谱法测定药物浓度,计算其表观渗透系数,研究淫羊藿生品与羊脂炙品中淫羊藿苷及单体在模型中的双向转运。结果:在淫羊藿苷浓度相同的条件下,羊脂炙品所含淫羊藿苷的吸收渗透系数明显大于生品及单体化合物。结论:初步说明淫羊藿经过羊脂加热炮制以后,能促进有效成分淫羊藿苷的吸收,这可能和炮制时加入的羊脂有关。

UPLC同时测定灯心草中绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸和木犀草素的含量

目的:建立灯心草中绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸和木犀草素UPLC含量测定方法。方法:采用AgilentPoroshell 120 EC-C18色谱柱(100 mm×3.0 mm,2.7μm),以乙腈-0.1%的甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL/min,检测波长325和350 nm,柱温30℃。结果:绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸和木犀草素分别在0.65～64.96μg/mL(r1=0.9997)、0.16～16.32μg/mL(r2=0.9999)、0.33～32.64μg/mL(r3=0.9999)和0.41～40.60μg/mL(r4=0.9998)内线性关系良好;平均加样回收率(n=6)在95.8%～102.7%,RSD均小于4.7%。结论:该方法快速、准确、重现性好,可用于灯心草中绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸和木犀草素的含量测定。

基于斑马鱼模型的续断抗骨质疏松活性部位筛选

目的:利用泼尼松龙诱导的斑马鱼骨质疏松模型筛选续断抗骨质疏松活性部位,探讨斑马鱼骨质疏松模型的适用性与合理性。方法:将受精后5 d的斑马鱼幼鱼暴露在25μmol/L泼尼松龙溶液、0.5%DMSO的培养基中,48 h后将25μmol/L泼尼松龙溶液更换为含25μmol/L泼尼松龙的不同浓度续断总提物及其大孔树脂不同浓度醇洗脱部位(含生药0.025、0.25、2.5、25μg/mL)溶液中,同时保留一组25μmol/L泼尼松龙组作为模型对照组。28.5℃下在24孔板中培养,每天换液至第10 d处死。采用茜素红对培养10天的各组斑马鱼幼鱼骨骼染色,并以显微检测、数码成像方法定量分析骨骼染色区域。结果:与DMSO溶媒阴性对照组比较,25μmol/L泼尼松龙模型组的斑马鱼头部骨骼染色面积和染色光密度值显著减少;与模型组比较,除续断大孔树脂水与10%乙醇洗脱部位外,续断总提物及其大孔树脂30%、50%、70%、90%乙醇洗脱部位的斑马鱼头部骨骼染色面积和染色光密度值显著增加。色谱分析表明30%、50%、70%、90%乙醇洗脱部位即含皂苷类成分又含非皂苷类成分。结论:续断皂苷类和非皂苷类成分均能阻止泼尼松龙诱导的斑马鱼骨丢失。斑马鱼骨质疏松模型成功用于高效筛选中药续断的抗骨质疏松活性部位,具简单、高效及可操作性强的优势。