基于主成分分析的茶叶预防肺癌药效物质研究

目的:采用主成分分析(PCA)法研究6种茶叶预防肺癌的药效物质基础。方法:以UPLC对各茶叶中各成分进行含量测定,MTT法检测CSE诱导的NHBE细胞的存活率,5,5-二硫二硝基苯甲酸(DTNB)比色法测定GSH/GSSG(还原型/氧化型谷胱甘肽)的比例,采用主成分分析计算共有峰面积的相关系数矩阵、特征值和方差贡献率,确定其具有预防肺癌的化学成分。结果:6种茶叶中龙井保护NHBE细胞损伤的作用最强,其IC50为0.2559mg/mL,使GSH/GSSG的比例由0.142恢复至0.858,且具有剂量依赖性;主成分分析得出GCG预防肺癌的贡献率为79.602%,GA的贡献率为11.307%,两者之和为90.909%。结论:不同品种茶叶对NHBE细胞的保护作用不同,主成分分析法确定GCG和GA是茶叶中预防肺癌的主要活性成分。

基于“成分-靶点-通路”网络和分子对接技术的泻火消瘿方治疗格雷夫斯病药效物质基础和作用机制初探

目的基于网络药理学和分子对接技术研究泻火消瘿方治疗格雷夫斯病(Graves diseases,GD)的药效物质基础和作用机制。方法通过数据库收集泻火消瘿方中药材的化学成分及作用靶点集,再检索GD相关靶点集。构建泻火消瘿方治疗GD的“药材-成分-靶点”网络及靶点蛋白相互作用(PPI)网络。进行KEGG和GO富集,预测其作用机制,并进行关联性分析。最后将筛选出的活性成分与关键靶点进行分子对接。结果获得泻火消瘿方化合物92个,相应靶点227个。PPI网络筛选出了核心靶点18个。得到KEGG通路192条(P<0.05),GO条目2385个(P<0.05),其中BP条目1988个,CC条目255个,MF条目142个。分子对接结果显示,泻火消瘿方核心成分与潜在关键靶点具有较好的结合活性,与目前可能治疗GD药物的亲和力相近。结论泻火消瘿方相关作用靶点及代谢通路为进一步研究泻火消瘿方治疗GD的药效物质基础及作用机制提供依据。

甘草总皂苷及甘草酸对Caco-2细胞P-gp功能和表达的影响

目的研究甘草总皂苷及其主要成分甘草酸对Caco-2细胞P-糖蛋白(P-gp)功能和表达的影响,进一步探讨甘草配伍解毒可能的作用机制。方法采用流式细胞仪检测罗丹明-123经甘草总皂苷和甘草酸处理后Caco-2细胞对其摄取量的差异评价P-糖蛋白的外排功能;采用western blot检测Caco-2细胞经甘草总皂苷和甘草酸处理后P-糖蛋白表达的差异。结果经过1 h的干预,5、10、50μg/mL的甘草总皂苷和甘草酸使细胞内罗丹明-123的荧光强度较阴性对照组相比显著减少41.4%、37.4%、34.8%;33.3%、29.9%、27.5%,对P-gp功能表现出诱导作用(P<0.05)。高质量浓度的甘草总皂苷(100、200、400μg/mL)和高浓度的甘草酸(100、200、400μmol/L)对细胞内罗丹明-123的荧光强度影响不显著(P<0.05)。经过72 h甘草总皂苷、甘草酸的干预,荧光强度较阴性组相比分别显著增加(P<0.05),呈现剂量依赖性。结论甘草总皂苷、甘草酸在一定剂量范围内既增强Caco-2细胞P-gp的功能,又能上调P-gp的表达。甘草酸可能是甘草总皂苷影响P-gp功能和表达的有效成分。

西咪替丁固体分散体的制备及体外溶出度研究

目的:制备西咪替丁固体分散体,提高西咪替丁的溶出速率。方法:分别以聚乙二醇-6000(PEG-6000)、聚乙烯吡咯烷酮K-30(PVPK-30)、泊洛沙姆188为载体,用溶剂法制备西咪替丁固体分散体,采用紫外分光光度法进行含量测定,应用浆法进行体外溶出度的测定。结果:用3种载体制备的西咪替丁固体分散体均能够提高药物的溶出速率,其中以PEG-6000为载体、西咪替丁与PEG-6000质量比为1∶6时的溶出速率较佳,30 min累积溶出度达到90%。结论:固体分散体技术可以显著提高西咪替丁的溶出度,且工艺简单,易于实施。

甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P-糖蛋白功能和表达的影响

目的研究甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P-糖蛋白（P-gP）功能和表达的影响，探讨甘草解毒的作用机制。方法采用流式细胞仪检测经甘草黄酮类成分处理后Caco-2细胞对罗丹明123摄取量的影响，以评价P．gP的外排功能；采用Westernblotting法检测甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P—gp表达的影响。结果与对照组相比，甘草总黄酮5、10、50、100μg／mL作用Caco-2细胞1h后，使细胞内罗丹明123的荧光强度分别减少61．1％、56．3％、49．2％、45．4％；甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、芹糖基甘草苷、芹糖基异甘草苷在相同质量浓度，使细胞内罗丹明123的荧光强度减少了19．3％-37．9％。与对照组相比，甘草总黄酮10-400μg／mL给药后72h，使Caco-2细胞膜上P-gP的表达显著增加（P〈0．01）；甘草苷、异甘草苷、甘草素、芹糖基甘草苷5-400μmol／L，异甘草素、芹糖基异甘草苷10-400μmol／L对此也有显著作用（P〈0．01）。结论甘草黄酮类成分增强Caco-2细胞P—gp的功能，上调P-gP的表达，促进细胞内有毒物质的外排，减少有毒物质在肠道的吸收，这可能是甘草配伍其他中药的解毒机制之一。