药物Ⅰ期临床试验医疗监护的探讨

Ⅰ期临床试验是新药首次用于人体。尽管Ⅰ期临床试验中不良反应发生率较低,但仍然有一定比例的不良反应病例出现,甚至出现严重的不良反应,如果处理不当,将会给受试者、社会带来难以估量的伤害。必须清醒地认识到Ⅰ期临床试验是一个高风险的研究。本文将结合作者在国内药物临床试验检查工作中发现的问题,对Ⅰ期病房的监护条件、Ⅰ期临床试验的研究人员组成、试验医疗监护和抢救流程等提出建议,以保障Ⅰ期临床试验受试者的安全,保证Ⅰ期临床试验的顺利进行。

阿奇霉素干混悬剂 颗粒剂和胶囊的人体药代动力学研究

目的使用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)联用法测定人血浆中阿奇霉素的浓度,并研究阿奇霉素干混悬剂、颗粒剂和胶囊在健康人体内的药代动力学情况。方法 20名健康男性志愿者单剂量口服500mg阿奇霉素后,采集不同时间点血样测定血药浓度。结果阿奇霉素的线性范围为2.71～1084μg/L,日内和日间相对标准偏差(RSD)均<5.0%。阿奇霉素干混悬剂主要药代动力学参数为:Cmax:(453±130)μg/L;tmax:(2.3±0.9)h;t1/2:(48±6)h;平均驻留时间(MRT):(53±8)h;曲线下面积(AUC)0-t:(4694±903)μg·h-·1L-1;AUC0-∞:(5118±919)μg·h-1·L-1。结论 3种剂型阿奇霉素的药代动力学参数的差异无统计学意义。

多中心临床试验随机设计的SAS可视化实现

针对新药临床研究中的多中心随机化要求,本研究组利用SAS的宏和%window语句,设计了一个可视化窗口操作程序,避免了编程操作,只需在窗口的相应位置填入随机化设计的必需参数,就可以很方便地得到结果。

辛伐他汀胶囊与片剂的人体药物动力学研究

辛伐他汀（Simvastatin）为新型的调血脂药,可以抑制内源性胆固醇合成,降低极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）和甘油三酯的血清浓度,提高高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的血浆浓度。临床上广泛使用该药治疗杂合家族史高血脂症及伴有肾病综合征高血脂症,疗效明显,且不良反应少。本研究对辛伐他汀胶囊和普通片剂的药物动力学行为特征进行比较,为临床用药提供参考依据。

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中黄芩苷和绿原酸

建立UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中黄芩苷和绿原酸的浓度,研究注射用银黄在健康人体的药代动力学.色谱柱为BEH C18（50 mm×2.1 mm ID,1.7μm）;流动相：A（水,0.1%甲酸）,B（甲醇,0.1%甲酸）,梯度洗脱;流速：0.35 mL·min^-1.电喷雾离子源,多反应监测.黄芩苷：[M＋H]^＋,m/z 447-271;绿原酸：[M-H]^-,m/z 353→191;山柰素：[M＋H]^＋,m/z 287→287.结果表明,黄芩苷和绿原酸血药浓度的线性范围分别为9.6～1 540和7.5～1 200 ng·mL^-1,日内、日间精密度均小于10.2%.志愿者静脉滴注注射用银黄后,黄芩苷和绿原酸的药时曲线分别符合二房室和三房室模型.该法简便、灵敏、特异,适用于血浆中黄芩苷和绿原酸浓度的测定.

Cocktail法研究脉络宁注射液对大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影响

目的:研究脉络宁注射液对大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影响。方法:14只大鼠随机均分成临床等效剂量组和高剂量组,连续2周静脉给予脉络宁注射液(临床等效剂量组,2 mL/kg;高剂量组,4 mL/kg)前后,均同时灌胃给予3个探针底物(茶碱,30 mg/kg;氯唑沙宗,50 mg/kg;氨苯砜,20 mg/kg),进行采血试验。用HPLC法同时测定大鼠体内各探针的血药浓度,DAS 1.0软件计算药动学参数,并以配对t检验对各组大鼠前后两轮主要药动学参数进行差异性比较。结果:在1个给药疗程(14 d)内,临床等效剂量组大鼠用药前后,3个探针的药动学参数均无显著性变化(P>0.05);高剂量组大鼠用药后,与用药前相比,茶碱的药动学参数没有显著变化(P>0.05);氨苯砜和氯唑沙宗的AUC0-24 h均有升高趋势(P<0.05),给药后分别是给药前的1.44倍和1.28倍,同时氯唑沙宗的CL显著降低(P<0.05)。结论:临床等效剂量脉络宁对大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性均无显著影响,而高剂量脉络宁对大鼠CYP2E1和CYP3A4均有弱抑制作用。

五味子醇甲在大鼠肝微粒体内的代谢动力学和性别差异

体外研究五味子醇甲(schizandrin,SZ)在大鼠肝微粒体内的代谢动力学和性别差异。制备正常雌、雄大鼠肝微粒体,与SZ共同温孵,以高效液相色谱法测定SZ及其代谢产物。SZ在雄鼠肝微粒体内代谢反应的最大速率Vmax、米氏常数Km和清除率Clint分别为(21.88±2.30)μmol·L-1.min-1·mg-1(protein),(389.00±46.26)μmol·L-1和(0.0563±0.0007)min·mg-1(protein);在雌鼠肝微粒体内代谢反应的最大速率Vmax、米氏常数Km和清除率Clint分别为(0.61±0.07)μmol·L-1·min-1.mg-1(protein),(72.64±13.61)μmol·L-1和(0.0084±0.0008)min·mg-1(protein),雌、雄鼠肝微粒体内SZ的主要代谢物不同,分别为7,8-顺二羟基五味子醇甲(M1)和7,8-顺二羟基-2-去甲基五味子醇甲(M2b)。酮康唑、奎尼丁和奥芬得林对SZ的在雌、雄大鼠肝微粒体内代谢均有不同程度的抑制作用,西咪替丁对其在雄鼠肝微粒体内的代谢也有一定的抑制作用。SZ在雌、雄大鼠肝微粒体中代谢动力学及代谢产物存在明显的性别差异,这种差异可能主要是由CYP3A和CYP2C11在大鼠肝微粒体内的性别差异引起的。

不同方法提取荜茇挥发油的GC／MS分析

采用气相色谱-质谱联用技术(GC/MS)对水蒸气蒸馏法(SD)和超临界CO2萃取法(SFE-CO2)所提取的荜茇挥发油化学成分及其含量进行分析。两种方法所提取的挥发油在外观,得率,化学成分及含量等方面均存在一定差异。用SFE-CO2法提取的挥发油得率高、提取时间短,是荜茇挥发油提取的理想方法。

抗心力衰竭颗粒对舒张性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响

目的心肌纤维化是舒张性心力衰竭(diastolic heart failure,DHF)的重要机制,文中观察抗心力衰竭颗粒对DHF大鼠心肌肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及胶原表达的影响,以探讨其对心肌纤维化的作用及治疗DHF的机制。方法用腹主动脉缩窄法的方法建立压力超负荷型舒张性心力衰竭大鼠模型,按完全随机分组法分为分为模型组,贝那普利组,抗心力衰竭颗粒大、中、小剂量组和假手术组,用Western blot法检测其心肌TNF-α及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达,并以Masson染色观察胶原沉积。结果模型组大鼠心肌TNF-α及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原均较假手术组明显增多,差异有统计学意义(P<0.01),贝那普利组及抗心力衰竭颗粒大剂量组TNF-α表达较模型组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),贝那普利组和抗心力衰竭颗粒中、大剂量组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达较模型组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);Masson染色见贝那普利组及抗心力衰竭颗粒各组胶原沉着较模型组轻。结论抗心力衰竭颗粒能够降低压力超负荷型DHF大鼠心肌TNF-α、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达,有抑制心肌纤维化的作用。

克拉霉素胶囊在健康人体的生物等效性研究

克拉霉素属大环内酯类抗生素，通过阻碍细胞核蛋自50S亚基的联结。抑制蛋白质的合成而产生抑菌作用，对革兰阳性菌如金黄色葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌等有抑制作用，对部分革兰阴性菌如流感嗜血杆菌、百日咳杆菌、淋病双球菌等也有抑制作用，此外对支原体也有抑制作用。具有良好的临床疗效和细菌学疗效。本实验建立了LC—MS方法，测定血浆中克拉霉素的浓度。观察健康志愿者口服克拉霉素胶囊受试制剂后的血药浓度经时过程，估算相应的药代动力学参数，并和克拉霉素胶囊参比制剂进行生物等效性评价，为临床用药提供参考依据。

LC-MS法同时测定至灵菌丝胶囊中5种成分的含量

目的:建立同时测定至灵菌丝胶囊中腺苷、胞苷、鸟苷、甘露醇、腺嘌呤含量的方法。方法:采用液相色谱串联质谱(LC-MS)法。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C_(18)柱,流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液,采用电喷雾电离源,多反应离子监测(MRM),用于定量分析的5种成分检测离子对m/z分别为268.1/136、244.2/112.1、284.1/152.1、183.1/69、136.1/119.1。外标法定量分析。结果:5种成分的质量浓度分别在37.5~1200、20~640、40~1280、77.5~2480、27.5~880 ng·m L^(-1)范围内与各自的峰面积呈良好的线性关系(r=0.9985、0.9964、0.9991、0.993、0.9924)。加样回收率在95.7%~101.4%范围内,RSD均低于7.3%。结论:该法专属性强、快速灵敏,可用于至灵菌丝胶囊中5种成分的含量测定。

利血平诱导的抑郁模型的研究进展

目的：为快速运用利血平诱导抑郁模型筛选抗抑郁中药提供参考。方法：以＂利血平＂＂抑郁症＂＂中药抗抑郁＂＂Reserpine＂＂Depression＂＂Antidepression drugs＂＂Depression and metabonomics＂等为关键词,组合查询2004年1月-2016年4月在Pub Med、中国知网、万方、维普、超星等数据库中关于利血平诱导的抑郁模型的实验研究文献,归纳总结后进行综述。结果：共检索到相关文献116篇,其中有效文献26篇。通过观察动物体质量变化及食物消耗情况、测量体温以及开场实验、强迫游泳实验、糖水偏好实验等结果和测定单胺类神经递质、代谢组学标志物等生化指标可以初步判定大鼠是否产生抑郁。大鼠腹腔注射利血平0.1～0.5 mg/kg适用于慢性抑郁症造模、4 mg/kg适用于急性抑郁症造模。结论：通过腹腔注射利血平可快速诱导抑郁模型,该模型可用于阐明中药治疗抑郁症的药效机制和为后期运用中药治疗抑郁症提供参考依据。

LC-MS/MS法测定人血浆中普芦卡必利的浓度

目的建立LC-MS/MS法测定人血浆中普芦卡必利(prucalopride,PCP)的浓度。方法血浆样品采用乙酸乙酯进行液液萃取。液相分离采用Agilent ZORBAX SB C18(3.0×100 mm,3.5μm)色谱柱进行等度洗脱,流动相为1 mmol·L^(-1)乙酸铵水溶液/甲醇=20/80。质谱检测采用电喷雾离子源,正离子模式,多反应监测扫描模式,PCP和内标PCP-^(13)CD_(3)(dPCP)的监测离子对分别为m/z 368.4/196.0和374.4/198.0。结果血浆中PCP在0.05896~7.547μg·L^(-1)范围内线性良好,r为0.9963~0.9996,准确度为98.29%~108.2%,CV均<5.2%;正常、溶血和高脂3种血浆基质的基质效应为96.48%~106.3%,PCP提取回收率为89.88%~95.27%;血浆样本室温放置6 h、-80℃冰箱保存56 d或反复冻融3次、-20℃冰箱保存60 h,以及样品处理后自动进样器(8℃)放置24 h均稳定;全血样品室温放置4 h稳定性良好。结论建立的PCP人血药浓度的LC-MS/MS测定方法简便、准确、灵敏、特异性强、重复性好,适用于PCP相关制剂的临床药代动力学和生物等效性研究。

柠檬苦素乳膏的制备与质量控制

目的：制备柠檬苦素乳膏并考察其质量稳定性.方法：以柠檬苦素为主药制备乳膏剂,采用HPLC测定主药含量及有关物质,色谱条件为Zorbax SB-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,Zorbax SB-C18保护柱（4.6 mm×12.5 mm,5 μm）,流动相水-乙腈（42∶58）,检测波长207 nm,流速1.0 mL· min-1,柱温室温,进样量20μL,考察3批样品的初步稳定性.结果：柠檬苦素乳膏呈乳白色,鉴别、检查项均符合相关规定,线性范围20.26～101.3 mg·L-1,平均回收率99.6％（RSD 0.68％）.3批样品中柠檬苦素质量分数100.4％ ～ 101.6％,除了在高湿或高温条件下体积会略有增大或减小,其他检测在不同环境中均稳定.结论：该制剂工艺简单、质量可控,应置于阴凉于燥处保存.

影响脓毒症短期预后危险因素的联合预测价值

目的:探讨影响重症监护病房(ICU)脓毒症患者短期预后的危险因素,并评估其联合预测价值。方法:回顾性分析2018年1月至2019年8月江苏省中医院急诊ICU收治的104例脓毒症患者的临床资料。收集患者的性别、年龄、既往史、合并症等一般资料以及入院24 h内的序贯器官衰竭评分(SOFA)、平均动脉压(MAP)、血常规、肝肾功能、凝血指标和降钙素原(PCT)。根据患者28 d转归分为死亡组和存活组。分别采用单因素和多因素Logistic回归模型分析影响脓毒症预后的危险因素;绘制受试者工作特征曲线(ROC),评估相关指标对脓毒症预后的预测价值;选择可能与疾病严重程度有关的参数进行Pearson或Spearman相关分析,评价各参数与SOFA评分的相关性。结果:104例患者均纳入最终分析,其中存活组60例,死亡组44例,28 d病死率为42.3%。①单因素分析结果:死亡组急性肾损伤(AKI)发生率、SOFA评分、血肌酐(SCr)、D-二聚体、活化部分凝血活酶时间(APTT)、国际标准化比值(INR)和PCT显著高于存活组〔AKI发生率:70.5%(31/44)比36.7%(22/60),SOFA评分(分):11.0(8.0,13.0)比8.0(6.2,10.0),SCr(μmol/L):108.8(65.5,235.6)比75.1(55.1,109.5),D-二聚体(mg/L):4.1(1.6,11.6)比2.1(1.2,4.3),APTT(s):42.6(37.7,55.7)比40.3(35.9,44.7),INR:1.3(1.2,1.5)比1.2(1.1,1.4),PCT(μg/L):3.1(0.4,39.9)比0.3(0.1,3.4),均P<0.05〕。②多因素Logistic回归分析结果:考虑到各自变量间的交互影响,将所有单因素分析的指标纳入多因素Logistic回归模型,基于条件向后法进行多次多因素Logistic回归分析,SPSS软件自动筛选出年龄、SOFA评分、MAP、中性粒细胞计数(NEU)、淋巴细胞计数(LYM)和APTT 6个变量建立预测模型,分析结果显示,SOFA评分、NEU和LYM为脓毒症患者短期预后的独立危险因素〔SOFA评分:优势比(OR)=1.22,95%可信区间(95%CI)为1.04~1.44,P=0.02;NEU:OR=1.14,95%CI为1.03~1.26,P=0.01;LYM:OR=0.79,95%CI为0.66~0.95,P=0.01〕。③ROC曲线分析结果:上述6个变量预测模型具有SPSS软件默认的最佳拟合度,联合年龄〔ROC曲线下面积(AUC)=0.60〕、SOFA评分(AUC=0.71)、MAP(AUC=0.53)、NEU(AUC=0.59)、LYM(AUC=0.54)和APTT(AUC=0.61)进行预测具有较好的敏感度(79.5%)和特异度(65.0%),AUC最大(AUC=0.75),高于单个变量的AUC值,提示多变量联合预测脓毒症短期结局的准确性更高。④相关性分析结果:NEU、D-二聚体、凝血酶原时间(PT)、APTT、INR和PCT与SOFA评分均呈显著正相关(r值分别为0.26、0.28、0.21、0.22、0.10、0.38,均P<0.05)。结论:SOFA评分、NEU和LYM是脓毒症患者短期预后的独立危险因素;年龄、SOFA评分、MAP、NEU、LYM和APTT 6个指标联合预测脓毒症短期预后的准确性优于单个变量,诊断价值更高;NEU、D-二聚体、PT、APTT、INR和PCT与SOFA评分有一定的相关性。

HPLC-MS/MS法测定芪葵颗粒中25个成分的含量

目的:建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定芪葵颗粒中25个成分(7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷、L-苯丙氨酸、毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷、芦丁、2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-葡萄糖苷、美迪紫檀苷、异黄芪皂苷Ⅱ、杨梅素、无水柠檬酸、紫檀烷、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ、环黄芪苷Ⅱ、异黄芪皂苷Ⅰ、L-色氨酸、黄芪皂苷Ⅱ、异槲皮苷、刺芒柄花苷、金丝桃苷、没食子酸、槲皮素、毛蕊异黄酮、芒柄花素、大黄素)的含量。方法:采用Agilent Poroshell 120 SB-C_(18)色谱柱(100 mm×3.0 mm,2.7μm),以含0.1%甲酸和1 mmol·L^(-1)甲酸铵的水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),柱温45℃,进样体积2μL;采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)模式,负离子模式扫描。结果:25个成分在测定的质量浓度范围内线性关系良好,相关系数(r)均>0.9950,精密度、重复性、稳定性均良好,平均加样回收率在89.5%~105.7%,RSD≤4.0%;3批芪葵颗粒中上述25个成分的含量范围分别为0.005~0.006、0.102~0.104、0.107~0.155、0.073~0.074、0.016~0.019、1.058~1.120、0.032~0.047、0.040~0.052、5.600~6.617、0.026~0.030、0.009~0.011、0.009~0.013、0.077~0.085、0.018~0.026、0.131~0.154、0.061~0.068、0.032~0.038、0.108~0.127、0.043~0.064、0.167~0.185、0.084~0.110、0.021~0.026、0.186~0.203、0.091~0.094、0.020~0.033 mg·g^(-1)。结论:所建立的方法可准确测定芪葵颗粒中多个主要成分,适用于芪葵颗粒制剂的质量评估与控制。