miRNA-200c/SOX2轴在实验性牙周炎牙槽骨吸收中的作用研究

目的:探讨miRNA-200c/转录因子Y框蛋白2(SOX2)轴在实验性牙周炎牙槽骨吸收中的作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、miRNA-200c组和联合组。模型组、miRNA-200c组和联合组小鼠分别给予慢病毒空载体、miRNA-200c慢病毒过表达载体及miRNA-200c和SOX2慢病毒过表达载体。以牙龈卟啉单胞菌涂抹模型组、miRNA-200c组和联合组小鼠口腔建立慢性牙周炎模型。检测各组牙周组织miRNA-200c和SOX2表达水平、牙龈指数、釉牙骨质界(CEJ)到牙槽嵴顶(ABC)距离。HE染色分析小鼠牙周组织病理形态学变化。qPCR检测小鼠牙周组织中miRNA-200c和SOX2表达水平。Western blotting检测小鼠牙周组织中骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、核因子κB受体因子(RANK)蛋白表达水平。结果:与空白组相比,模型组小鼠牙周组织中miRNA-200c表达水平降低(P<0.05),SOX2表达水平升高(P<0.05);miRNA-200c组牙周组织中miRNA-200c表达水平高于空白组和模型组,SOX2表达水平低于模型组(P<0.05);联合组牙周组织中miRNA-200c及SOX2表达水平均高于空白组和模型组(P<0.05)。模型组、miRNA-200c组及联合组牙龈指数及CEJ至ABC距离高于空白组(P<0.05),miRNA-200c组牙龈指数及CEJ至ABC距离均低于模型组(P<0.05),联合组牙龈指数及CEJ至ABC距离均高于miRNA-200c组(P<0.05)。Western blotting结果显示,模型组、miRNA-200c组及联合组RANKL、RANK表达水平及RANK/OPG比值均高于空白组(P<0.05),miRNA-200c组RANKL、RANK表达水平及RANK/OPG比值均低于模型组(P<0.05),联合组RANKL、RANK表达水平及RANK/OPG比值均高于miRNA-200c组(P<0.05)。HE染色结果显示,模型组小鼠牙周组织出现明显大量炎症细胞浸润,胶原纤维排列紊乱、变性、断裂,而miRNA-200c组小鼠这些症状相比于模型组得到显著缓解,但是联合组小鼠相比于miRNA-200c组小鼠也出现了显著的炎症细胞浸润,胶原纤维排列紊乱、变性、断裂现象。荧光素酶活性检测显示,miRNA-200c mimic能明显降低SOX2野生型荧光素酶活性(P<0.01),而对SOX2突变型荧光素酶活性影响差异无统计学意义(P>0.05)。结论:miRNA-200c能改善小鼠牙周炎炎症反应及牙槽骨吸收情况,可能与SOX2调控的RANKL/RANK/OPG轴有关。