慢性肾脏病患者治疗前后血清miR-30a-5p和miR-196a水平变化及价值

目的检测并分析慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者治疗前、连续治疗不同随访时间点血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平动态变化,探讨其作为CKD患者辅助诊断及疗效监测分子标志物的价值。方法收集江苏省中医院肾内科2015年4月至2016年2月就诊的20例CKD患者治疗前以及连续治疗并随访3~6个月的血清标本,记录患者血生化及尿液指标,同时收集23例体检健康者血清标本作为对照。采用实时荧光定量PCR检测各组血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平。采用非参数检验、Spearman秩相关分析血清miR-30a-5p和miR-196a-5p的水平变化及临床应用价值。结果与健康人对照相比,CKD患者治疗前血清miR-30a-5p[0.563(0.324,1.737)vs 0.270(0.127,0.435),U=100.5,P=0.004]和miR-196a-5p[0.423(0.154,1.270)vs 0.121(0.056,0.168),U=74,P=0.0003]水平显著升高。与CKD患者治疗前相比,CKD患者血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平从治疗后第3个月开始呈持续降低趋势,至第6个月,其miR-30a-5p[0.344(0.128,0.672)vs 0.563(0.324,1.737),P=0.020],miR-196a-5p[0.227(0.079,0.474)vs 0.423(0.154,1.270),P=0.030]水平与治疗前比较差异有统计学意义。Spearman相关性分析显示,血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平与估算的肾小球滤过率(eGFR)呈显著负相关(r=-0.223,P=0.013;r=-0.191,P=0.035)。结论CKD患者血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平检测有助于反映肾脏功能,具备成为CKD患者辅助诊断及疗效监测分子标志物的潜能。

男性不育患者精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平检测的价值

目的探讨精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p表达特征及其在男性不育患者精浆中变化和价值。方法选取2019年1月至2021年12月于江苏省中医院检验科留存的血清、晨尿、胸水、脑脊液和精浆标本各30例;进一步选取2010年至2019年江苏省中医院和南京大学医学院附属金陵医院冻存的非梗阻性无精子症患者精浆标本、弱精子症患者精浆标本及正常对照精浆标本各54例。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测不同体液、不育患者精浆和正常对照精浆中miR-135a-5p和miR-135b-5p表达。ROC曲线分析精浆miR-135a-5p、miR-135b-5p水平区分男性不育患者及对照的ROC曲线下面积(AUC^(ROC));相关性分析精浆miR-135a-5p、miR-135b-5p水平与精液参数的相关性。结果5种不同体液间miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=64.88,P<0.01和H=64.7,P<0.01),二者在血清和精浆中水平均最高,在尿液中水平均最低。无精子症组、弱精子症组及正常对照组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=32.14,P<0.01;H=21.37,P<0.01)。与正常对照组相比,无精子症组2种miRNA水平均显著降低(U=687,P<0.01;U=843,P<0.01);弱精子症组与正常对照组差异无统计学意义(P均>0.05);无精子症组与弱精子症组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平具有显著差异(U=635,P<0.01;U=779,P<0.01)。精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p区分无精子症与正常对照及弱精子症患者AUCROC分别为0.764(95%CI:0.675~0.854),0.711(95%CI:0.612~0.810)和0.782(95%CI:0.695~0.869),0.733(95%CI:0.637~0.829)。相关性分析结果显示,精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平与精子浓度、精子活动率、前向运动精子百分率和非前向运动精子百分率均呈正相关(P均<0.01)。结论miR-135a-5p和miR-135b-5p为精浆高表达miRNA,在无精子症患者中显著降低,二者与男性不育发生关系密切。

研究型中医院科研管理信息平台的建立和应用

信息化时代开发科研管理信息平台对于提高科研管理水平及科研能力具有非常重要的作用.介绍科研管理信息系统的结构功能及应用体会,包括资源共享,提高管理工作效率;实时掌握课题整体信息,实现课题的全过程管理;规范执行预算,保证科研经费使用合理;及时掌握人才相关信息,促进学科发展;实现数据集中管理,便于信息挖掘统计分析等.

鬼针草总黄酮对体外血小板聚集的影响

目的探讨鬼针草总黄酮对家兔血小板聚集的影响。方法以二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)及凝血酶(thrombase,Thr)作诱导剂,体外给予不同浓度鬼针草总黄酮溶液,比浊法测定血小板聚集率,观察鬼针草总黄酮对血小板聚集的抑制作用及量效关系。结果高、中剂量鬼针草总黄酮可降低由ADP所诱导的血小板最大聚集率(P<0.01),血小板聚集抑制率可达45.82%和28.65%;高、中剂量鬼针草总黄酮可降低由Thr所诱导的血小板最大聚集率(P<0.01),血小板聚集抑制率分别达48.36%,33.82%,作用强度呈浓度依赖性。结论鬼针草总黄酮对体外由ADP和Thr所诱导的血小板聚集具有较强的抑制作用。

健脾补肾、清肠化湿方联合BMSCs对溃疡性结肠炎模型大鼠肠屏障的修复作用

目的:观察健脾补肾、清肠化湿方联合骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏膜的修复作用.方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、BMSCs组、干预BMSCs组和联合组.TNBS法建立溃疡性结肠炎大鼠模型,空白组、模型组大鼠尾静脉分别注射1 mL生理盐水,BMSCs组大鼠尾静脉注射BMSCs,干预BMSCs和联合组大鼠分别注射体外中药共培养的BMSCs,联合组再予中药13.6 g/kg灌胃10 d.分别于第5天和第10天每组各处死5只大鼠,留取标本.电子显微镜观察大鼠结肠组织杯状细胞数量,实时定量PCR检测(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)和Western blot法分别检测大鼠结肠组织Muc2mRNA和蛋白的表达,Western blot法检测Muc2相关因子Math1和KLF-4蛋白的表达.结果:与模型组相比,各治疗组肠黏膜杯状细胞数量增多,各治疗组Muc2 mRNA水平升高,联合组优于干预BMSCs组和BMSCs组(P<0.05).随着时间延长,治疗效果越明显.治疗第10天,与正常组相比,模型组Muc2、Math1和KLF-4蛋白表达量明显下降,经治疗后,各治疗组蛋白表达量均上高,联合组升高最明显.结论:静脉移植BMSCs的同时给予健脾补肾、清肠化湿方能提高黏蛋白Muc2表达水平,增多杯状细胞数量,修复肠屏障,联合灌胃持续给药效果更佳,其机制可能和提高Math1和KLF-4因子表达有关.

麻黄多糖对绵羊红细胞所致小鼠溶血素生成的影响

目的:观察麻黄多糖对绵羊红细胞所致小鼠溶血素生成的影响(比色法),以了解麻黄多糖对正常小鼠免疫功能的作用。方法:运用免疫实验方法检测了正常小鼠空白组和实验组在脾指数、胸腺指数和溶血素水平等方面的测定。结果:麻黄多糖大剂量(132 mg/kg)组小鼠胸腺指数下降,与空白组相比差异有统计学意义(P<0.05)。麻黄多糖3个剂量组均能使正常小鼠的半数溶血值(HC50)下降,与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:麻黄多糖对正常小鼠体液免疫具有一定的抑制作用。

冠心平片含药血清对(H_2)(O_2)诱导人血管内皮细胞凋亡及NF-~κB蛋白表达的影响

目的探讨冠心平片含药血清抗H2O2诱导血管内皮细胞(vascular endothelialcells,VEC)凋亡作用及对核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)蛋白表达的影响。方法将大白兔随机分为正常组(生理盐水,10mL/kg)、维拉帕米组(0.02g/kg,10mL/kg)、冠心平小剂量组(2.8g/kg,10mL/kg)、冠心平中剂量组(5.6g/kg,10mL/kg)、冠心平大剂量组(11.2g/kg,10mL/kg),每组3只。灌胃给药,连续3天,最后1天灌胃2次,间隔2h,末次给药后1h,耳缘静脉采血,放置1h,2500r/min离心30min,吸取血清,56℃、30min灭活,制备含药血清。采用100μmol/LH2O2作用于对数生长期的VEC建立细胞凋亡损伤模型。造模后分为6组,每组5个样本:正常组(10%空白血清培养液)、模型组(10%空白血清培养液+100μmol/LH2O2)、维拉帕米组(10%维拉帕米血清培养液+100μmol/LH2O2)、冠心平低剂量组(10%低剂量冠心平血清培养液+100μmol/LH2O2)、冠心平中剂量组(10%中剂量冠心平血清培养液+100μmol/LH2O2)、冠心平高剂量组(10%高剂量冠心平血清培养液+100μmol/LH2O2)。采用流式细胞术检测VEC凋亡率,采用Westernblot检测NF-κB蛋白表达。结果模型组VEC凋亡率(9.00%±1.18%)、NF-κB蛋白表达(0.39%±0.06%)较正常组升高(P<0.01);与模型组比较,维拉帕米组(6.00%±0.18%)及冠心平高剂量组(5.30%±0.08%)、中剂量组(6.83%±0.51%)VEC凋亡率明显降低,各给药组NF-κB蛋白表达显著降低(维拉帕米组:0.28%±0.03%,冠心平低剂量组:0.33%±0.03%,冠心平中剂量组:0.30%±0.03%,冠心平高剂量组:0.28%±0.04%,P<0.01,P<0.05)。结论冠心平片可以拮抗H2O2诱导VEC的凋亡效应,其机制可能与调节NF-κB有关。

儿童原发性肾病综合征患者血清miR-150水平变化及其临床意义

目的分析儿童原发性肾病综合征(nephritic syndrome,NS)患者血清miR-150水平变化,评估其作为NS新型辅助诊断标志物临床价值。方法收集2010年3月~2014年5月在南京军区总医院和江苏省中医院住院并确诊的78例原发性NS患儿及南京市儿童医院79例年龄、性别匹配的健康对照儿童血清样本,记录患者及对照临床资料。实时荧光定量PCR技术(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测和比较NS患儿及对照儿童血清miR-150水平变化,同时测定其血清总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和肾功能指标[尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(Uric acid)和尿蛋白]水平,统计学分析血清miR-150临床价值及与上述指标相关性。结果 NS患儿血清miR-150的水平为101.4(21.29~336.6)fmol/L,明显高于对照组34.11(5.53~134.2)fmol/L(F=3.658,P<0.001)。ROC曲线分析显示,miR-150作为NS诊断的曲线下面积(ROCAUC)为0.892(95%CI=0.843~0.940)。Spearman相关性分析显示,NS患儿血清miR-150水平与GLO(r=-0.231,P=0.042)和TG(r=-0.233,P=0.040)水平均呈显著负相关。逐步多元线性回归分析显示,在校正其他相关因素的影响下NS患儿血清miR-150水平与ALB水平呈显著独立相关(β=0.241,P=0.034;校正r2=0.046)。多因素逻辑回归分析显示,在校正了年龄、性别等因素后,血清miR-150水平是NS的独立危险因素[OR=16.07(95%CI=5.35~48.28),P<0.001]。结论儿童NS患者血清miR-150水平显著升高,且与肾功能损伤和血脂指标密切相关,有望作为其临床辅助诊断新指标。

男性不育患者精浆miR-551b水平变化及其临床价值

目的检测和分析男性不育症患者精浆miR-551b水平变化,探讨其作为男性不育症辅助分子标志物的可能性。方法选取2008年11月～2015年3月在南京总医院生殖医学中心和江苏省中医院男科门诊确诊的92例男性不育症患者及同期招募的34例年龄匹配正常生育男性精液标本,记录患者及对照临床资料,测定患者及对照精液参数包括精子密度、精子活率、a级精子比例、a+b级精子比例及部分精浆生化指标α-糖苷、酸性磷酸酶、肉毒碱、果糖水平。实时荧光定量PCR技术(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测和比较弱精症、非梗阻性无精症患者及正常生育男性精浆中miR-551b含量变化,统计分析精浆miR-551b临床价值及与精液参数、精浆生化指标相关性。结果 qRT-PCR结果显示,正常生育组精浆miR-551b水平为20.63(9.59,37.83)fmol/L,弱精症患者为62.29(25.22,101.43)fmol/L,较正常生育组显著升高(U=297.00);无精症患者精浆miR-551b水平为4.70(2.41,13.71)fmol/L,较正常生育组明显降低(U=356.00),差异均具有统计学意义(P<0.001)。受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析显示,精浆miR-551b区分弱精症、无精症患者与正常生育组的ROC曲线下面积(AUC ROC)分别为0.810(95%CI 0.718～0.902)和0.772(95%CI 0.667～0.878);鉴别弱精症和无精症患者的AUC ROC为0.932(95%CI 0.885～0.979)。Spearman秩相关性分析显示,男性不育患者精浆miR-551b水平与精子密度(r=0.735)、精子活率(r=0.643)、a级精子比例(r=0.672)、a+b级精子比例(r=0.682)及α-糖苷(r=0.375)呈正相关,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。逐步多元线性回归结果显示,男性不育症患者精浆miR-551b水平与精子密度呈显著独立相关(β=0.618,P<0.001,校正r2=0.368)。逻辑回归分析显示,精浆miR-551b是弱精症[OR=24.889(95%CI 5.302～116.843),P<0.001]和无精症[OR=6.303(95%CI1.316～30.179),P=0.021]的潜在危险因素。结论男性不育症患者精浆miR-551b水平与正常生育男性存在明显差异,且与精子密度和活力密切相关,有潜力成为男性不育患者辅助诊断和鉴别诊断的新型分子标志物。

尿液微小核糖核酸作为肾脏疾病生物学标志物的研究进展

肾脏疾病的发病率呈逐年上升趋势,已成为危害人类健康的主要原因之一。微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一类长约22个核苷酸的非编码单链小分子RNA,其与细胞增殖、分化、凋亡等生理病理因素相关,在肾脏疾病的发生、发展中扮演重要角色。近期的研究发现,人尿液中也存在丰富、稳定表达的miRNA,其水平变化与多种肾脏疾病的进程、预后密切相关,可作为肾脏疾病潜在的新型生物学标志物。

微小核糖核酸在IgA肾病中的最新研究进展

IgA肾病(IgAN)是最常见的原发性肾小球肾炎,亦是引起终末期肾功能衰竭的重要原因之一,其发病机制目前尚不完全明确,临床表现多样,无特异性分子标志物及治疗药物,预后差异较大。微小核糖核酸(miRNA)是一类小分子非编码RNA,可在转录后调节基因表达从而影响机体重要的生理和病理过程。大量研究显示,miRNA具有组织或器官特异性,人外周血及尿液中也存在丰富、稳定miRNA,特定变化miRNA可作为多种疾病潜在的生物标志物。同时,miRNA方面发挥重要作用,文章就miRNA在IgAN中的临床价值及作用分子机制研究最新进展作一综述,为IgAN的诊断和治疗提供新思路。

水杨酸在不同血浆中的蛋白结合率测定

目的研究水杨酸与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。方法采用平衡透析法,以高效液相色谱法对透析内液与外液中水杨酸的含量进行测定,计算水杨酸与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。结果水杨酸低、中、高(0.6,1,3μg/ml)3个浓度的大鼠血浆蛋白结合率分别为(91.1±1.4)%,(90.2±2.5)%,(90.7±3.1)%;比格犬血浆蛋白结合率分别为(82.5±2.1)%,(81.3±1.8)%,(83.1±2.3)%;人血浆蛋白结合率分别为(96.5±2.7)%,(97.2±3.0)%,(96.4±1.6)%。结论水杨酸与血浆蛋白具有高强度的结合,其中与人血浆中的蛋白结合较强,且人>大鼠>比格犬。

注射用灯盏细辛酚治疗急性脑梗死脑络瘀阻证效果观察

目的:评价注射用灯盏细辛酚治疗急性脑梗死脑络瘀阻证的有效性及安全性。方法:在西药治疗基础上采用随机、单盲、平行对照、多中心临床研究方法,将469例脑梗死脑络瘀阻证患者分为试验组(351例)和对照组(116例),试验组给予注射用灯盏细辛酚,每次60mg,加入生理盐水250ml,静脉滴注,每日1次,60～90min滴完;对照组给予灯盏细辛注射液,每次40ml(含总黄酮180mg),加入生理盐水250ml,静脉滴注,每日1次,60～90min滴完。观察两组神经功能缺损的改善情况。结果:两组神经功能缺损程度评分治疗前的差异无统计学意义,具有可比性。治疗后第3、7、14天改善情况的差异有统计学意义,试验组优于对照组。两组ADL量表评分治疗前的差异无统计学意义,具有可比性,治疗后及治疗前后的差值组间差异有统计学意义。试验组优于对照组。两组半身不遂评分治疗前的差异无统计学意义,具有可比性,治疗前后及治疗后第3、7、14天的差值组间差别有统计学意义,试验组优于对照组。结论:注射用灯盏细辛酚治疗脑梗死脑络瘀阻证安全、有效,值得临床进一步研究应用。

男性不育患者精浆exosome中miR-184水平变化及临床意义

目的:探讨男性不育患者精浆外泌体(exosome)中miR-184的水平变化及临床意义。方法:收集2015~2019年在江苏省中医院、东部战区总医院及温州医科大学附属第一医院就诊的97例无精子症患者、96例弱精子症患者及同期募集的92例正常生育男性精浆标本,分离精浆exosome后运用透射电镜、Nanosight和Western印迹对exosome进行鉴定;运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测exosome miR-184的水平,统计分析miR-184变化、临床价值及与精液参数的相关性,进一步用生物信息学方法预测和分析miR-184靶基因、相关信号通路及与男性不育关系。结果:透射电镜、Nanosight和Western印迹结果显示,精浆中含有大量exosome。qRT-PCR结果显示,无精子症患者精浆exosome miR-184水平显著低于正常对照[0.227 (0.092, 0.790)vs 0.650 (0.408, 1.061)](P<0.01),弱精子症患者精浆exosome中miR-184水平显著高于正常对照[1.176 (0.661, 1.946)vs 0.650 (0.408, 1.061)](P<0.01)。受试者工作特征曲线(ROC)分析结果显示,精浆exosome miR-184无精子症、弱精子症患者的曲线下面积(AUC)为0.866(95%CI 0.815~0.916)和0.724(95%CI 0.653~0.795);区分弱精子症和无精子症患者的AUC为0.964(95%CI 0.943~0.985)。相关性分析显示,弱精子症患者精浆exosome miR-184水平与精子浓度呈显著正相关(r=0.243,P=0.017),与前向运动精子百分率呈显著负相关(r=-0.407,P=0.006)。生物信息学分析发现miR-184的靶基因显著富集于男性生殖和精子发生密切相关的蛋白调控通路。结论:男性不育患者精浆exosome miR-184水平与正常生育男性具有统计学差异,具备作为男性不育辅助诊断标志物潜能并可能参与男性不育的发生发展。

PDCA循环在新药临床试验项目质量管理中的应用

目的:探讨PDCA应用于新药临床试验质量管理的可行性,促进临床试验质量管理工作持续改进。方法:采用PDCA循环质量管理模型,项目启动时制定质控计划,实施过程中规范研究者的临床试验行为,分阶段对试验实施情况进行质量检查,发现问题及时整改,并在下一个循环中列为质控要点,持续改进。结果:PDCA循环引入项目质量管理工作,可有效监控试验质量。结论:通过PDCA循环质量管理模型的实施,有效地提高了新药临床试验项目的质量。

第二次全国肾脏病科研方法学习班通知

经国家中医药管理局继续教育委员会批准,由江苏省中医院肾内科和科技处承办的《第二次全国肾脏病科研方法学习班》（项目编号：100202014）定于2011年12月15日～12月18日在南京市中央饭店举行。

第二次全国中西医肾脏病科研方法学习班通知

经国家中医药管理局继续教育委员会批准,由江苏省中医院肾内科和科技处承办的《第二次全国中西医肾脏病科研方法学习班》（项目编号：100202014）定于2011年12月15日～12月18日在南京市中央饭店举行。本次学习班将完全解析肾脏病基础和临床研究科研项目的申请、管理、结题和成果培育的全过程,旨在提高肾脏病中青年骨干队伍的科研能力和水平。

第二次全国中西医肾脏病科研方法学习班通知

经国家中医药管理局继续教育委员会批准,由江苏省中医院肾内科和科技处承办的《第二次全国中西医肾脏病科研方法学习班》（项目编号：100202014）定于2011年12月15日～12月18日在南京市中央饭店举行。本次学习班将完全解析肾脏病基础和临床研究科研项目的申请、管理、结题和成果培育的全过程,旨在提高肾脏病中青年骨干队伍的科研能力和水平。

美国公立研究型大学科研管理体系探究——以伊利诺伊大学芝加哥校区为例

科研管理是科研院所管理的一个重要部分,如何提高科研管理能力、加强科研管理,提高机构的综合实力,是新时期各大科研院所管理和发展过程中面临的一大课题。制定一系列行之有效的政策与措施,形成一个比较完善的系统的科研管理模式,以提升科研管理水平、增强竞争力,是现阶段发展的必备举措之一。本文从美国伊利诺伊大学芝加哥校区科研管理部门的组成与职能介绍美国的科研管理情况,探析美国科研管理中值得我们借鉴的经验,以促进我国科研院所科研管理体系的建设及完善。

基于倾向性评分匹配和亚群治疗效果模式图队列研究暴露与结局关联的异质性分析

介绍亚群治疗效果模式图(STEPP)的基本原理、应用场景与主要步骤,梳理将其与倾向性评分匹配(PSM)联合应用在队列研究数据中的理论基础,旨在将STEPP应用到暴露与结局风险关联的异质性分析中。通过模拟案例“不同输液导管类型的肿瘤患者发生静脉血栓栓塞(VTE)风险的队列研究”展示如何将PSM与STEPP在队列研究数据中联合应用,得出亚群中经外周置入中心静脉导管组和中心静脉导管组发生VTE的绝对风险值和相对风险值,以及亚群间的异质性分析结果,并对PSM与STEPP联合应用的局限性和研究前景进行讨论,为实际应用提供参考。