多肽^(301)LARSLKT^(307)抑制心肌分化的细胞实验研究

目的前期发现多肽^(301)LARSLKT^(307)可在动物水平显著抑制胚胎期心脏发育。该研究拟进一步在P19细胞系水平探究^(301)LARSLKT^(307)抑制心肌分化的作用和机制。方法利用PepDraw Tool、Uniprot和ProtParam在线生物信息学分析网站,对多肽301LARSLKT307的结构、保守性和理化性质进行生物信息学分析。在荧光显微镜下观察FITC标记的多肽^(301)LARSLKT^(307)进入P19细胞的情况。通过倒置显微镜观察多肽^(301)LARSLKT^(307)对P19细胞分化的影响。实时定量PCR及蛋白质免疫印迹法检测多肽对心肌分化标志基因肌钙蛋白cTnT和转录因子GATA4表达的影响。实时定量PCR检测多肽对Notch1信号通路关键分子Notch1和下游Hey1及Hey2的影响。结果生物信息学分析结果显示多肽位于其前体蛋白Talin的301~307氨基酸位点,其分子量小、结构稳定、亲脂性高,且前体蛋白保守性高。荧光显微镜下可见FITC标记的多肽301LARSLKT307可以穿过细胞膜进入P19细胞内。与对照组比较,多肽组细胞部分坏死,生长形态紊乱,细胞厚薄不一。实时定量PCR与蛋白质免疫印迹法检测显示,与对照组比较,多肽组的分化相关基因GATA4及cTnT的mRNA及蛋白表达量均有不同程度下降。实时定量PCR检测显示,与对照组比较,多肽组Notch1通路的相关基因Notch1、Hey1及Hey2的mRNA表达均有不同程度下降。结论多肽^(301)LARSLKT^(307)可能是通过抑制Notch1通路关键因子的表达发挥抑制心肌分化的生物功能。

COMT V158M多态性、疼痛敏感性以及阿片需求量相关性分析

目的 探讨COMT基因V158M多态性、疼痛敏感性以及阿片需求量间的关系。方法 选取2019年1—8月于江苏省人民医院住院治疗并确诊为肺癌的患者220例作为研究对象,其中肺癌伴疼痛者116例;肺癌不伴疼痛者104例。采用PCR-RFLP检测220例肺癌患者COMT基因V158M的基因型。使用多因素Logistic回归分析筛选可能引起肺癌疼痛的影响因素。比较中、重度疼痛组患者不同基因型间48 h阿片类药物用量、状态特质焦虑量表评分和睡眠质量评分。结果 疼痛组与无痛组VV、VM及MM基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P>0.05)。TNM分期(OR=4.559,95%CI:3.169~5.952,P=0.001)、基因型(OR=8.829,95%CI:6.475~9.293,P=0.005)是肺癌疼痛发生的独立危险因素;轻度疼痛组、中度疼痛组和重度疼痛组中,MM基因型分布频率明显升高;以上差异均有统计学意义(P<0.05)。中、重度疼痛组不同基因型病人48 h阿片类药物用量依次明显减少,且MM基因型患者用药量最少。结论 COMT基因V158M多态性可能与疼痛敏感性及阿片类镇痛药用量有关。

肌部室间隔缺损的个性化治疗

目的探讨肌部室间隔缺损（mVSD）外科纠治方法的选择。方法回顾性分析2009年12月至2012年7月外科治疗54例mVSD患儿的临床资料。8例单纯mVSD行胸壁小切口，食道超声引导下右心室前壁穿刺置入封堵伞关闭mVSD，其余均在体外循环下，经右心房路径修补或封堵mVSD，其中1（）例采取直视下封堵，15例行双层浅表连续缝合心内膜关闭缺损，3例采用自身心包补片修补，18例采用“三明治”技术关闭缺损。伴心内畸形者，行同期纠治。结果术后呼吸功能不全4例，治疗痊愈出院；1例合并重症法乐四联症术后发生低心排，放弃治疗，其余均顺利出院，出院时无显著的室缺残余分流。术后心功能恢复良好，随访1个月至3年，复查心脏彩超示残余缺损4例，直径均小于0．3cm，未处理。结论明确mVSD的病理解剖，结合患儿病情和家庭经济状况，选择合适的纠治方案能明显减少手术并发症和病死率，使患儿获得最优化治疗。