华支睾吸虫成虫抗原和排泄分泌产物对T细胞的作用研究

目的观察华支睾吸虫成虫抗原(Crude antigen,CA)、排泄/分泌产物(excretory-secretory products,ESPs)对T细胞的作用。方法体外分离小鼠骨髓细胞诱导分化为未成熟骨髓树突状细胞(immature DC,iDC);磁珠分选仪分选小鼠脾脏细胞的初始CD4+T细胞;流式细胞术检测DC、CD4+T细胞的纯度;抗原刺激DC细胞,实验分为PBS阴性对照组,LPS阳性对照组,CA和ESPs刺激组;负载抗原后的DC细胞与分选的CD4+T细胞共培养72h;Real time-PCR检测T-bet、GATA3mRNA的相对表达量;ELISA检测细胞培养上清中IFN-γ、IL-4细胞因子的表达量。结果与PBS组相比,ESPs刺激组Tbet、GATA3mRNA表达水平升高(P<0.05),而CA刺激组T-bet、GATA3 mRNA表达水平差异不显著;与PBS组相比,ESPs刺激组细胞因子IFN-γ、IL-4的含量均升高(P<0.05),CA刺激组仅IFN-γ的分泌增高(P<0.05),IL-4无明显变化。结论 CA可能诱导宿主产生Th1型免疫应答,ESPs可能诱导宿主产生Th1型、Th2型免疫应答。

小鼠骨髓源嗜酸性粒细胞的体外诱导与鉴定

目的 分离小鼠骨髓细胞并将其诱导为嗜酸性粒细胞，为后续嗜酸性粒细胞功能探讨奠定基础。方法 剖杀小鼠，分离其股骨骨髓细胞，用rmIL-5等对其进行定向诱导分化，用瑞氏染色及Chromotrope 2R染色法对所诱导细胞进行染色观察并利用流式细胞术对其表面CCR3（C-C Motif Chemokine Receptor 3）/Siglec-F（Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 5）等分子表达予以检测，从细胞形态学及表面分子表达情况对所诱导的细胞予以鉴定。 结果 瑞氏染色及Chromotrope 2R染色可见嗜酸性粒细胞典型形态，流式细胞术检测Siglec-F及CCR3表达水平明显升高。结论 本研究利用rmIL-5在体外成功获得较高纯度的小鼠骨髓来源的嗜酸性粒细胞。