江苏省推进兽用抗菌药使用减量化行动中的实践与思考

2018年8月以来,江苏省认真贯彻落实农业农村部工作部署,深入推进兽用抗菌药使用减量化行动工作,初步形成政府引导、企业实施、部门推动、社会共治的良好局面。截至目前,全省已有4775家规模养殖场参加兽药减抗行动。本文对江苏省推进兽用抗菌药使用减量化行动工作中的实践进行总结,明确下一步工作方向,助力全国兽用抗菌药使用减量化行动工作迈上新台阶。

江苏兽药市场质量现状及提高兽药质量的对策

通过对兽药GMP实施前后江苏兽药市场质量状况的抽检调查统计,从兽药市场抽检产品类别、抽样环节、动物品种及省内外产品等各方面分析了兽药GMP实施以来全省兽药质量状况和存在的问题,并探析兽药质量问题的内在原因,提出了提高兽药产品质量的对策,为新一轮兽药GMP的复验及兽药监管工作提供参考。

兽药生产过程中导致产品不符合质量标准的问题分析

从质量标准的角度,论述了兽药生产企业在生产过程中,导致产品不符合质量标准的几种问题,并对这些问题进行了分析,意在引起企业的注意,减少不合格产品。

兽用中药提取物发展与管理研究

深入剖析了兽用中药提取物的作用、定位,研究其发展与管理中存在的问题,为破解“以购代产”难题,维护中兽药健康有序发展,提出广泛建立标准,探索生产、管理新模式,发展配方颗粒,推动兽用中药提取物创新发展。

拉曼光谱在兽药打假中的应用前景

介绍新的检测技术——拉曼光谱,并分析拉曼光谱仪的特点、综述拉曼光谱在药物分析中的应用以及展望其在兽药打假中的应用前景,特别是执法人员在兽药查处现场快速筛选假劣兽药。相信随着科学技术的发展,拉曼光谱在未来兽药的打假过程中必将发挥重要的作用。

当前兽药非法添加现象与防控对策

随着养殖业不断发展,动物疫病仍处于常发态势。为满足部分养殖者片面追求疗效、增加养殖产量等需求,少数不法企业随意改变兽药处方或是非法添加其他药物,以期扩大产品销路,寻求更高收益。近年来,国家对农产品质量安全日益重视,农业农村部对兽药非法添加的监管和打击力度也在不断加大。本文参考近期兽药质量监督抽检及风险监测结果,结合在兽药生产、经营、养殖环节的调查情况,查阅相关文献资料,对现阶段我国兽药非法添加问题进行梳理、分析并提出相应防控对策。

浅析实验室兽药残留检测管理

文章从技术的角度,对人员、检测环境、检测仪器、检测方法、样品的管理、检测过程、检验报告等方面,对实验室如何做好兽药残留检测管理工作,提出了一些体会和建议。

硫酸新霉素可溶性粉中非法添加4种苯并咪唑类和3种大环内酯类抗寄生虫药物HPLC-PDA检测方法的建立

建立了硫酸新霉素可溶性粉中非法添加7种抗寄生虫药物的HPLC-PDA检测方法。采用十八烷基键合硅胶为填充剂;以水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min;二极管阵列检测器,波长为245 nm。通过液相色谱保留时间、峰纯度检查和光谱相似度检查对非法添加物进行确证。结果表明,该色谱条件下,7种抗寄生虫药物间分离度良好,在3~80μg/mL浓度范围内线性关系良好(R2>0.9998),回收率在103.9%~105.8%之间,RSD≤2.5%,4种苯并咪唑类和3种大环内酯类的检测限分别为0.05 g/kg和0.3 g/kg。该方法操作简便、快速、灵敏度高,可用于硫酸新霉素可溶性粉中非法添加抗寄生虫药物的测定。

四黄止痢颗粒质量标准研究

为了提高和完善《中华人民共和国兽药典》二○一○年版中四黄止痢颗粒的质量标准,改进四黄止痢颗粒项下黄连、黄柏的薄层鉴别方法,增加黄芩的定性鉴别。采用HPLC法测定黄芩苷含量。薄层色谱斑点清晰,阴性无干扰。黄芩苷对照品浓度在3.122~124.88μg/m L（r=0.9991,n=6）范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率为101.4%,RSD为1.6%。该方法简便、准确、重现性好、精密度高,可作为四黄止痢颗粒的质量控制方法。

HPLC-PDA法同时测定硫酸新霉素可溶性粉中非法添加4种化学药物

建立了同时测定硫酸新霉素可溶性粉中非法添加甲硝唑、水杨酸、乙酰甲喹、甲氧苄啶的HPLC-PDA方法。样品用甲醇提取,经C18柱分离,以磷酸盐缓冲液-甲醇为流动相洗脱,流速为1.0 m L/min,采用二极管阵列检测器进行全波长(200~400 nm)扫描,提取波长为230 nm。检查保留时间、峰纯度和光谱相似度,对非法添加化学药物进行确证。结果表明,4种化学药物在0.01~0.12 mg/m L范围内线性关系良好(r≥0.9998);回收率在98.0%~99.9%之间,RSD≤1.0%,检出限为1~5 g/kg。该检测方法专属性强、操作简便,可用于硫酸新霉素可溶性粉中非法添加4种化学药物的测定。

板青颗粒质量标准提升研究

为了提高和完善板青颗粒的质量标准。改进精氨酸的薄层鉴别,新增亮氨酸、脯氨酸、靛玉红的薄层鉴别,采用高效液相色谱法,以尿苷、鸟苷、(R,S)-告依春和腺苷作为指标性成分进行定性定量测定。建立的薄层方法,斑点清晰,分离度好,专属性强;供试品色谱图中在与混合对照品溶液中尿苷、鸟苷、(R,S)-告依春和腺苷保留时间相同的位置有吸收光谱图一致的色谱峰,4种对照品分别在1.08~32.42μg·mL^(-1)(r=1.0000)、1.01~30.33μg·mL^(-1)(r=1.0000)、0.39~9.43μg·mL^(-1)(r=0.9999)和1.05~31.56μg·mL^(-1)(r=1.0000)的浓度范围内与峰面积呈现良好的线性关系。尿苷、鸟苷、(R,S)-告依春和腺苷的平均加样回收率(n=9)分别为98.6%、100.5%、98.5%和99.8%。对20批样品数据综合分析,建议每1 g板青颗粒含尿苷、鸟苷和腺苷的总量不得少于0.46 mg,(R,S)-告依春不得少于0.075 mg。

高效液相色谱法测定饲料中总抗坏血酸含量

研究并建立了饲料中总抗坏血酸含量的高效液相色谱测定方法。样品加少量甲醇浸润后超声,再加入0.5 mM磷酸二氢钾溶液超声提取,过滤后,取滤液加入等体积的二硫苏糖醇溶液反应2 h,用紫外检测器在262 nm波长下检测。色谱柱:C18柱(4.6 mm×250mm,5μm);流动相:0.1%乙酸溶液+甲醇=95+5。L-抗坏血酸浓度在0.5～20 IU/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,加标回收率为92.3%～102.3%,精密度试验结果相对标准偏差分别为0.77%、1.24%,检出限和定量限分别为4 mg/kg、10 mg/kg。结果表明:该法准确度高、重现性好、结果可靠。该方法适用于L-抗坏血酸原料、配合饲料、浓缩饲料、预混合饲料中的总抗坏血酸含量的定量检测。

预混合饲料中维生素A棕榈酸酯的高效液相色谱法测定

本试验采用反相色谱法测定预混合饲料中维生素A棕榈酸酯的含量,样品不经皂化,直接用4%二氯甲烷甲醇溶液提取,可以快速测定预混合饲料中维生素A棕榈酸酯的含量。

四黄止痢颗粒中几种有效成分的薄层鉴别研究

为建立和完善四黄止痢颗粒的质量标准,本试验采用薄层色谱法对四黄止痢颗粒中的黄连、黄柏、大黄、黄芩、板蓝根进行鉴别,对展开剂、展开温度、展开湿度、薄层板来源、薄层板批号、显色条件等因素进行考察。试验以环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-水-三乙胺(3∶3.5∶1∶1.5∶0.5∶1)为展开剂,置氨蒸气预饱和的展开缸内展开,置紫外光灯(365nm)下检视鉴别黄连、黄柏;以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂展开,喷以2%三氯化铁乙醇溶液检测黄芩的存在;以正丁醇-冰醋酸-水(19∶5∶5)为展开剂展开,热风吹干后喷以茚三酮试液,在105℃加热检视鉴别板蓝根。试验结果表明,在考察条件下,目标物斑点清晰、无拖尾,阴性对照无干扰,方法专属性强,重现性好。

酢浆草提取工艺的研究及总有机酸的测定

目的:研究酢浆草总有机酸的最佳提取工艺,并建立其测定方法。方法:采用正交试验法,考察料液比、单次回流提取时间、乙醇浓度和提取次数4个因素,酢浆草总有机酸采用电位滴定法进行测定。结果:确立了酢浆草总有机酸的提取的最佳工艺为:料液比为1∶15,单次回流提取时间为1 h,乙醇浓度为75%,提取次数为2次。结论:本试验为酢浆草的进一步研究和资源开发利用提供了一定的科学依据。

氟苯尼考及其制剂的拉曼光谱检测研究

用显微拉曼光谱仪研究了氟苯尼考及其同类药物甲砜霉素、氯霉素的拉曼光谱以及氟苯尼考制剂的拉曼光谱,并对其拉曼光谱进行了简单分析。结果表明该方法使用简单,分析速度快,能准确区别氟苯尼考、甲砜霉素、氯霉素三种药物结构上的差别,能初步判断制剂是否为可疑假兽药,是一种快速、识别率高的定性方法。

恩诺沙星粉中未知添加物的确证

应用非靶向分析技术,筛查、分析和确证恩诺沙星粉(水产用)中的非法添加物。分别制备甲酸酸化、碳酸钠碱化的恩诺沙星粉供试品溶液,经超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-PDA)检测初筛,获取未知物色谱图。应用超高效液相色谱-飞行时间高分辨质谱(UPLC-TOF-HRMS),在正、负离子模式下对酸化、碱化样液进一步检测,获得未知物母离子和二级特征碎片的精确质荷比、同位素信息,并应用SCIEX OS软件进行分析推导。最后取疑似化合物对照品进行确证研究。UPLC-PDA初筛结果显示:酸化样液在1.870 min、5.122 min,碱化样液在5.122 min,均发现高响应未知色谱峰。对吸收波长和峰面积进行分析,推测含2个未知物,且未知物1(1.870 min)与未知物2(5.122 min)在酸性/碱性条件下可能发生转换。SCIEX OS软件分析推导结果显示:未知物2,母离子分子式拟合为C11H8O2,二级碎片结构解析含1个苯环、2个羰基和1个通过成环连接的丙烯结构,推测为甲萘醌;未知物1的分子离子峰为C11H9O5S-,二级碎片仅采集到HSO-3,丢失部分与未知物2一致,结合甲萘醌常见衍生物类型,推测为亚硫酸氢钠甲萘醌。取甲萘醌、亚硫酸氢钠甲萘醌对照品进行对比研究,UPLC-PDA检测结果显示:未知物1与亚硫酸氢钠甲萘醌、未知物2与甲萘醌,保留时间和紫外光谱一致;向供试溶液中添加对照品溶液后检测,未知物为单一峰。UPLC-TOF-HRMS检测发现:未知物1与亚硫酸氢钠甲萘醌保留时间一致,一级质谱质量偏差为1.0×10-6,二级谱库匹配度为100%;未知物2与甲萘醌保留时间一致,一级质谱质量偏差为0.6×10-6,二级谱库匹配度为99.7%。未知物1和2的结构得以确证。亚硫酸氢钠甲萘醌可止血,与恩诺沙星治疗败血症的适应证相应,佐证试验结果。随着对兽药非法添加行为的严格监管和严厉打击,非法添加物和添加手段愈发隐蔽,常规靶向分析难以满足监控需求。该文详述的使用UPLC-PDA结合UPLC-TOF-HRMS对未知物进行非靶向分析的技术,可为药品、食品、保健品、化妆品及农药等产品中非法添加物的筛查和确证提供思路和技术参考。

液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法测定牛奶中8种氨基糖苷类抗生素残留

建立了一种测定牛奶中链霉素、双氢链霉素、庆大霉素、大观霉素、新霉素、卡那霉素、阿米卡星和安普霉素8种氨基糖苷类药物的液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱方法。样品经提取和分子印迹固相萃取柱净化,新型“液态分离池”Obelisc R色谱柱分离,1%甲酸水溶液与1%甲酸乙腈溶液作为流动相梯度洗脱,四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱准确定性并定量。8种待测组分均获得足够的色谱保留和分离,在各自浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数(R^(2))均大于0.99,定量限在0.5~20μg/kg之间,平均回收率在68.0%~104.6%之间,批内与批间RSD均不高于11.3%。该法区别于传统方法:不添加离子对试剂,不使用含缓冲盐流动相,最大限度减少了对质谱检测器的污染;采用高分辨质谱检测器定性定量,结果准确可靠;灵敏度较现行国标显著提高。该方法具有良好的可操作性和重现性,适用于牛奶中氨基糖苷类药物的快速筛查、定性筛选和定量测定。

HPLC-PDA联合UPLC-Triple TOF MS法确证恩诺沙星注射液中的非法添加物

为确证1批恩诺沙星注射液中的非法添加物,通过HPLC-PDA法初筛,利用高分辨质谱对未知物进行筛查,并用HPLC-PDA和UPLC-Triple TOF MS两种方法进行验证,结果显示,该批样品中的非法添加物为加替沙星。本研究为兽药中非法添加物筛查及定性确证提供了一个有效的思路与方法。

农业执法案件中未知粉末的分析研究

为了对农业执法案件中缴获的未知粉末进行分析研究,采用超高效液相色谱-飞行时间高分辨质谱(UPLC-TOF-HRMS)获得未知物分子离子峰的精确质量数、天然同位素及高质量二级碎片信息,并应用SCIEX PeakView及MasterView软件进行分析。经过靶向及非靶向筛查,同时参考文献报道,推导出未知粉末中的疑似化合物,并采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)法及UPLC-TOF-HRMS法进行了双重确证。结果显示该未知粉末中含克仑特罗(16 g/kg)及其合成中间体克仑特罗杂质B(455 g/kg)。研究中详述的分析技术可为未知添加物的筛查、确证提供思路和技术参考。