江苏省畜禽饲料中转基因成分的检测分析

随着转基因植物研究的迅速发展,转基因农产品的应用也更加广泛。在我国,转基因农产品的来源主要是进口,主要是玉米、大豆,主要用于饲料加工行业。为了调查转基因玉米、大豆在江苏省畜禽饲料市场的分布情况,在江苏省市场抽取40份鸡、鹅和猪饲料以及饲料原料,通过定性PCR检测玉米内标zSSIIb、大豆内标Lectin、花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子、NOS终止子、Bt、EPSPS基因,同时检测玉米、大豆转化体事件MON810、MON89788、GTS40-3-2和MON87701。结果表明,90%的饲料都含有转基因成分;转基因玉米转化体事件MON810占50%,转基因大豆转化体MON89788、GTS40-3-2、MON87701的检出率都为80%。由研究结果可知,江苏省市场的鸡、鹅和猪饲料及饲料原料中转基因成分的占有率较高,需要进一步加强对饲料原料的转基因监管。

高邮鸭蛋特征品质指标分析

为挖掘高邮鸭蛋品质特征指标,采用代谢组学等技术对高邮鸭蛋的蛋品质指标、基础营养指标及小分子代谢物进行测定分析。结果显示,高邮鸭蛋的蛋质量、蛋形指数、蛋黄色度、哈夫单位、蛋白高度、蛋黄指数、粗蛋白质量分数指标高于其他品种;总氨基酸、鲜味氨基酸、支链氨基酸、总脂肪酸、不饱和脂肪酸含量较高,饱和脂肪酸含量低,表明高邮鸭蛋的部分感官蛋品品质参数、氨基酸和脂肪酸水平可表征高邮鸭蛋的特征品质。基于代谢组学技术绘制高邮鸭蛋的代谢指纹图谱,通过主成分分析(principal component analysis,PCA)、偏最小二乘法分析(partial least-squares discrimination analysis,PLS-DA)模型、层次聚类分析(hierarchical clustering analysis,HCA)等方法挖掘高邮鸭蛋的特征组分。蛋黄中鉴定出252个化合物,差异化合物22个,蛋清中鉴定出184个化合物,差异化合物40个。其中,尿苷5’-单磷酸、鸟苷5’-单磷酸、N-乙酰基-D-葡萄糖胺为主要差异营养物质,蛋黄中的花生四烯酸为高邮鸭蛋特有营养成分,蛋清中的吲哚在高邮鸭蛋中未检出。

玉米赤霉烯酮毒素生物降解酶研究进展

玉米赤霉烯酮(ZEN)及其衍生物是由镰刀菌产生的具有类雌激素效应及细胞毒性的次级代谢产物,广泛存在于受镰刀菌侵染的谷物及其制品中。ZEN不仅影响粮食的品质和产量,也会对人畜生命健康造成威胁。ZEN脱毒方法主要包括物理法、化学法和生物法。生物法特别是生物酶法因反应条件温和、特异性好、脱毒效率高、环保、便捷等优势而具有较高的应用价值。本研究对近年来报道的ZEN降解酶的挖掘、鉴定及其实际应用等方面进行了综述,旨在为ZEN的生物酶法脱毒研究提供参考。

优质粳稻生产安全用药规范化技术研究与示范

农药的不科学使用会造成生态环境污染及影响作物的食用安全,这也是制约江苏省稻米产业升级的主要短板.在针对江苏省北部沿海中晚稻作生态区病虫害发生特点进行分析的基础上提出规范化用药技术方案,并于2016年在连云港市灌南县进行示范试验.结果表明:规范用药方案不但达到了同常规用药一样的有效控制病虫害的目的,而且较常规用药还增加了稻谷产量,减少了用药次数,降低了用药成本.通过规范化用药防治,水稻每667m^2效益比常规用药高出约16.64%,同时有效保护了稻田生态环境,避免了稻米农药残留超标的风险.

噬菌体cocktail JS-SP1对沙门菌流行菌株混合感染的裂菌动力学及灭菌效果研究

目的研究沙门菌噬菌体cocktail JS-SP1对沙门菌流行菌株混合感染的裂菌动力学及灭菌效果。方法从50份污水及粪样样品中分离获得6株高裂菌活性的沙门菌噬菌体,将其按等比例混合制成沙门菌噬菌体cocktail JS-SP1,通过测定A600分析其对6株沙门菌流行菌株混合菌液的裂菌动力学,并且对0、4和10h这3个时间点的活细菌计数,分析JS-SP1的灭菌效果。结果与混合细菌组、单株噬菌体处理组相比,JS-SP1处理组可以有效而且快速降低混合液的A600值。与其他处理组相比,4h时,JSSP1处理组细菌数下降极显著(P<0.01);10h时,降到10CFU以下(P<0.01)。结论噬菌体cocktail JS-SP1对混合细菌感染具有快速彻底的灭菌能力,其有可能成为一种有效控制沙门菌污染的潜在治疗手段和产品。

基于环介导等温扩增快速检测转基因大豆SHZD32-1成分

转基因大豆SHZD32-1是由我国自主研发的耐除草剂抗性品系。为给该品系转基因生物安全监管提供技术支撑,本研究开发其转基因成分的快速便捷式检测方法,主要基于环介导等温扩增技术,设计并筛选该转化体最佳特异性LAMP引物组,优化扩增温度和时间,并分析灵敏度、特异性及稳定性,建立SHZD32-1的LAMP检测体系。结果显示:在62~64℃条件下反应40~60 min扩增效果最佳;灵敏度标准达到质量分数0.05%,高于普通PCR(0.1%);特异性和稳定性较高,检测结果同普通PCR扩增一致。转基因大豆SHZD32-1成分LAMP技术不需要特殊仪器,检测时间短,结果可视化,灵敏度、特异性和稳定性高,有望用于转基因耐草甘膦大豆SHZD32-1的现场快速检测。

肉鸭全产业链标准体系构建研究

我国是肉鸭生产、消费、出口第一大国,肉鸭产业在推动乡村振兴、促进农民增收等方面作出了重大贡献。随着肉鸭产业快速发展,标准化在支撑肉鸭产业发展中的作用日益凸显。本文从全产业链整体视角出发,研究了肉鸭产业发展及标准体系现状,构建了肉鸭全产业链标准体系框架,分析了标准体系建设中存在的问题,并提出了肉鸭产业标准化发展的对策建议,以期改善和优化肉鸭生产全产业链,促进新时代肉鸭产业高质量发展。

基于蛋白组学的鸽蛋蛋清功能特性研究

为研究鸽蛋与其他禽蛋蛋清蛋白的差异,挖掘鸽蛋蛋清营养功能特性,本研究基于4D-非标蛋白质组学定量技术为鸽蛋、鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋和鹌鹑蛋5种禽蛋蛋清构建蛋白质组学数据库,进行差异蛋白筛选和生物信息学分析。结果表明,经鉴定鸽蛋蛋清有500个蛋白及肽段,与其他4种禽蛋相比,44个显著上调,3个显著下调。50%左右的差异蛋白存在于胞外区,参与酶活性调节、生物调控和细胞代谢等生物过程。鸽蛋蛋清蛋白富集程度高且有显著性差异的生物过程有细胞-细胞信号传导和细胞循环,分子功能有肽酶调节活性和肽酶活性负调控。KEGG通路分析结果显示,鸽蛋蛋清蛋白中富集程度较高的代谢通路有内质网的加工通路、溶酶体通路、HIF-1信号通路、吞噬体作用通路和铁死亡通路等。此外,鸽蛋中发现多种差异蛋白和特异蛋白在透明蛋清凝胶形成、小分子结合运输参与和组织伤口愈合等方面有潜在作用。

产气荚膜梭菌噬菌体及乳酸杆菌联用改善肉鸡生长性能和调节肠道菌群功能研究

【目的】明确产气荚膜梭菌噬菌体及乳酸杆菌联用对肉鸡的生产性能、肠道形态结构及微生物多样性的影响,为禽健康养殖中产气荚膜梭菌的感染提供关键防控技术。【方法】选取240只1日龄青脚麻鸡,随机分为4组:HN02噬菌体组、乳酸杆菌组、HN02噬菌体+乳酸杆菌联用组及空白对照组,每组6个重复,每个重复10只鸡,试验期14 d,期间连续每天饮用噬菌体和/或乳酸杆菌。统计平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)及料重比(F/G),计算脏器系数。取盲肠内容物测定产气荚膜梭菌数量,并对16S rRNA基因进行扩增,分析肠道微生物群落结构和多样性。【结果】与空白对照组相比,HN02噬菌体+乳酸杆菌联用能显著提高雏鸡平均日增重及绒毛高度/隐窝深度(P<0.05),显著降低雏鸡料重比和空肠、回肠隐窝深度(P<0.05),且处理14 d的抑菌效果最佳,产气荚膜梭菌的数量减少1.17 lg CFU/mL。微生物多样性显示,HN02噬菌体+乳酸杆菌联用饮水后雏鸡盲肠内容物菌群中变形菌门、厚壁菌门、放线菌门及拟杆菌门相对丰度较高,属水平中乳杆菌属相对丰度较高,与空白对照组相比,HN02噬菌体+乳酸杆菌联用连续饮用14 d后葡萄球菌属相对丰度较低。【结论】产气荚膜梭菌噬菌体和乳酸杆菌联用能够改善肉鸡的生长性能及肠道发育,维持肠道微生物群落的多样性,在养禽业的产气荚膜梭菌感染的预防中有巨大应用潜力。

粮食中新兴真菌毒素的污染现状及毒理学研究进展

真菌毒素是产毒真菌污染谷物粮食等农产品产生有毒有害的次级代谢产物,严重威胁食用和饲用产品的质量安全。较为常见的真菌毒素包括黄曲霉毒素、镰刀菌毒素脱氧雪腐镰刀烯醇、玉米赤霉烯酮等,国内外针对这些主要污染毒素制定了相应的限量标准。近年来,随着真菌毒素研究的发展和检测技术的更新,一些新型真菌毒素不断被发现。新兴毒素(Emerging toxins)是目前尚未被列入常规风险筛查和监管、也尚无相关限量标准的真菌毒素种类。目前检出频次高、污染较为严重的新兴毒素主要由镰刀菌属(Fusarium spp.)和链格孢属(Alternaria spp.)等产毒真菌产生。这些新兴真菌毒素通常与主要毒素复合污染,文章将依据现有的风险调查报告与数据,综述粮食中常见新兴镰刀菌和链格孢毒素的污染现状和毒理学研究进展,为真菌毒素的全面风险评估和管控技术研发提供参考。

噬菌体和枯草芽孢杆菌联用对蛋鸡生产性能、蛋品质、卵巢及输卵管的影响

试验旨在研究产气荚膜梭菌噬菌体、沙门氏菌噬菌体及枯草芽孢杆菌联用对蛋鸡生产性能、蛋品质、卵巢及输卵管的影响。试验选取126只260日龄海兰褐蛋鸡,随机分成6组,每组3个重复,每个重复7只。对照组饮用清水,SD72噬菌体组、SD72噬菌体+枯草芽孢杆菌组、JDF1-6噬菌体组、SD72/JDF1-6噬菌体+枯草芽孢杆菌组和SD72噬菌体+抗生素组(0.0075%金霉素、0.0004%杆菌肽),分别在不同饮水器中按体积比为1∶100在饮水中添加1010PFU/mL噬菌体原液、1010PFU/mL枯草芽孢杆菌及抗生素,试验期42d,记录采食量、平均日增重、产蛋量,分析蛋品质、卵巢及输卵管组织变化。结果显示:与对照组相比,饮水1~42d后SD72噬菌体组、SD72噬菌体+枯草芽孢杆菌组、SD72/JDF1-6噬菌体+枯草芽孢杆菌组蛋鸡产蛋率显著提高(P<0.05),料蛋比显著降低(P<0.05);饮水29~42 d后,SD72噬菌体组、SD72噬菌体+枯草芽孢杆菌组、SD72/JDF1-6噬菌体+枯草芽孢杆菌组蛋壳重、哈氏单位显著提高(P<0.05);42d饲喂周期中各组蛋鸡的卵巢和输卵管形态均无异常,卵泡发育正常,未见减少和闭锁,输卵管膨大部无炎性反应。结果表明,产气荚膜梭菌噬菌体、沙门氏菌噬菌体和枯草芽孢杆菌联用42d能提高蛋鸡生产性能、蛋品质,对卵巢和输卵管发育无副作用。

玉米中伏马毒素B污染高光谱快速检测模型研究

为提高基于高光谱的玉米伏马毒素B(Fumonisin B,FB)污染检测模型的精度和稳健性,本研究提出了一种通过特征变量筛选结合麻雀搜索算法(SSA)优化BP神经网络的建模策略,并与基于全谱段和特征变量构建的PLS-DA、PLS和BP神经网络模型结果进行对比。在所有玉米FBs污染等级判别分析模型中,SPA-SSA-BP神经网络与基于全谱段构建的PLS-DA的模型总识别正确率相同且最高,均为95.56%;在玉米FBs污染水平定量分析中,CARS-SSA-BP神经网络模型精度最高,RMSEP和RPD分别为12.41 mg/kg和3.62,SPA-SSA-BP神经网络次之,RMSEP和RPD分别为12.85 mg/kg和3.46。结果表明,CARS和SPA两种算法都能有效提取高光谱特征信息,且SSA算法具有通过对BP神经网络的初始权值和阈值进行优化,提升模型的稳健性,改善BP神经网络预测精度的能力。

江苏部分地区牛源无乳链球菌流行病学研究

对江苏省部分地区的7个规模化奶牛场进行采样,通过16S rNDA测序、多位点序列分型、荚膜分型,明确无乳链球菌的流行情况及流行株类型;并通过检测毒力因子,分析菌株生化特性、溶血能力及耐药性,明确无乳链球菌流行株的生物学特性及致病因子。结果表明:自327份乳房炎奶样中共分离到84株无乳链球菌,该菌在不同奶牛场中的阳性率存在较大差异(阳性率为0~51.3%),主要流行株类型为ST67、ST103及ST568型菌株;牛源菌株的荚膜分型为Ⅰa型或Ⅱ型,均具有PI-2b型菌毛及乳糖操纵子,能够代谢乳糖,且具有不同的溶血能力;另外,所有牛源菌株对头孢噻肟均未产生耐药性。这一研究为无乳链球菌在奶牛场中的临床监测和防控提供了重要信息,有助于进一步阐明该菌的致病机制。

穿透肽嵌合金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysJS25-R9的表达及其活性分析

前期分离得到1株具有较强裂解能力的金黄色葡萄球菌噬菌体vB_SauM_JS25。测序后发现,噬菌体vB_SauM_JS25的裂解酶基因LysJS25与裂解酶LysK同源性最高,且可以广谱裂解金黄色葡萄球菌。为提高LysJS25细胞穿透效果,设计了穿透肽嵌合裂解酶LysJS25-R9,经原核表达和纯化,体外评价了LysJS25-R9裂解活性、细胞穿透活性及细胞内杀菌活性。结果表明:LysJS25-R9对葡萄球菌表现出较好的裂解能力,杀菌效率较原裂解酶提高2.1倍。激光共聚焦及细胞内杀菌活性实验证实LysJS25-R9进入MAC-T细胞内杀菌。该研究为穿透肽嵌合裂解酶的设计提供了一个良好的例证,同时有助于裂解酶细胞穿透性改造的设计。

转WYMV-Nib8基因抗黄花叶病小麦的农艺性状

与一般作物相比,转基因作物在目标性状得到改良的同时,其他农艺性状可能会受到影响。前期研究发现,与受体小麦扬麦158相比,转WYMV-Nib8基因小麦N12-1对小麦黄花叶病具有较强抗性。为了明确N12-1的生存竞争能力及在长江中下游麦区的生态适应性,在2017—2018年以转基因小麦N12-1及其受体扬麦158和3个当地主栽品种扬麦11、宁麦13、宁麦14为比较对象,对小麦的主要农艺性状(基本苗数、株高、穗数、粒数、穗粒数、千粒质量)和对主要病害的抗性进行研究。2年的试验结果表明,N12-1与扬麦158的基本苗数、穗数、粒数无显著差异,但N12-1显著矮于其受体扬麦158,而穗粒数显著高于扬麦158。N12-1与当地主栽品种扬麦11相比,株高、穗粒数、千粒质量有显著差异,其他性状无显著差异;N12-1与宁麦13仅在株高上有显著差异,其他性状均无显著差异;N12-1与宁麦14仅千粒质量有显著差异,其他性状均无显著差异。转基因植物与受体之间对赤霉病、纹枯病的抗性均无显著差异。研究结果可为该转基因小麦申请安全证书提供基础。

苏南地区粳稻生产减量用药技术研究与示范

农药科学合理使用是防控水稻病虫害的发生、保障稻米安全的关键技术。在对江苏省苏南稻作生态区病虫害发生特点进行分析基础上,采用“1+3+X”的减量用药模式,于2015—2017年在江苏省太仓市进行了试验示范。结果表明,减量用药方案和常规方案均达到有效控制病虫害的目的,减量用药方案在纵卷叶螟、稻飞虱、大螟、纹枯病、稻曲病的防控效果上,综合表现均优于常规用药方案,且体现了良好的生态友好效应和较高的经济效益。3年的跟踪评价显示,减量用药不仅能有效防控病虫害,更能保证水稻的质量安全与生态安全。

小麦赤霉病生物防治研究进展

小麦赤霉病是造成小麦减产的重要病害之一,病原菌产生的镰刀菌毒素严重威胁食品安全。近年来赤霉病的频繁发生和镰刀菌毒素污染超标问题日趋严重,而赤霉病抗性品种缺乏和多菌灵等化学药剂的耐药性致使现今对赤霉病控制乏力。因此,采取包括生物防治在内的赤霉病综合防控策略成为近年来赤霉病防控的研究热点。市场上可应用的生防制剂较少,防治效果不稳定。本文从拮抗菌的筛选、效果评价、拮抗机制与应用策略等方面对当前小麦赤霉病的生物防治策略进行了综述,并针对现有赤霉病生物防治存在的问题提出了相应改进策略。

固相萃取-液相色谱-串联质谱法同时测定饲料中链霉素、双氢链霉素、卡那霉素和安普霉素残留

建立了固相萃取-液相色谱-串联质谱法同时测定配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和预混合饲料中4种氨基糖苷类药物(链霉素、双氢链霉素、卡那霉素、安普霉素)残留的分析方法。样品经10%三氯乙酸溶液(含0.002 mol/L EDTA-2Na、0.01 mol/L磷酸二氢钾,pH为7.5±0.2)提取,HLB固相萃取柱净化,采用ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱分离,梯度洗脱,在电喷雾离子源正离子模式下检测,用基质匹配标准曲线外标法定量。结果表明,4种药物在10~1000μg/L质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,方法的检出限为0.05 mg/kg,定量限为0.1 mg/kg。3个不同浓度加标水平下的平均回收率均在69.8%~101.7%范围内,批内和批间相对标准偏差均小于15%。该方法简便、准确,适用于饲料中氨基糖苷类药物的定量测定。

不同畜禽来源产气荚膜梭菌的耐药性分析

鉴定来源于畜禽养殖中的产气荚膜梭菌(Cp)的毒力型,分析其耐药特性及耐药基因携带情况,为Cp引起的疾病防控及公共卫生提供参考依据。采集来自于畜禽养殖场中的样品,分离并鉴定Cp。利用微量肉汤稀释法分析鸡、羊、牛分离株对10种抗生素的敏感特性,PCR鉴定毒力型及耐药基因。经鉴定,52株三种不同来源分离株经鉴定属于A型,耐药分析表明不同来源的Cp对10种抗生素均呈现不同程度的耐药特性,其中对克林霉素(42.31%)和四环素(40.38%)的耐药率较高,对青霉素、氯霉素、氨苄西林、甲硝唑、万古霉素、美罗培南、莫西沙星、头孢曲松耐药率为11.54%~25.00%。鸡源分离株对四环素(12/29,41.38%)耐药率最高,而羊源和牛源的分离株分别对克林霉素表现出高耐药率62.50%(5/8)、73.33%(11/15)。耐药基因分析表明四环素类tet A为主要耐药基因。本研究明确了不同来源(鸡、羊、牛)Cp毒力型,其耐药严重且普遍携带四环素类耐药基因,从而表明Cp耐药性对畜禽养殖场造成重要威胁,同时对Cp引起的疾病有效防治提供参考依据。

细菌耐药质粒的Ⅳ型分泌系统及质粒依赖性噬菌体研究进展

细菌耐药性已被认为是21世纪人类健康面临的重要威胁之一。接合转移是耐药基因在细菌群落中(尤其是肠杆菌科细菌)水平转移的最重要途径。Ⅳ型分泌系统(T4SS)是一个大分子转运系统,由Ⅳ型偶联蛋白、内膜复合体、外膜复合体和接合性菌毛组成,T4SS在耐药质粒的接合转移中起关键作用。近年来以质粒编码的T4SS为靶标的细菌耐药性防控新策略不断兴起,就耐药质粒的T4SS分类、结构和分布以及靶向T4SS的质粒依赖性噬菌体(PDBs)进行综述,并提出基于PDBs的耐药性防控策略,以期为耐药性传播的防控提供新思路。