抗菌肽S807提高肉鸡生产性能的研究

为观察抗菌肽S807(强生肽B)的功效,我们进行了肉仔鸡的饲养效果试验。在不同时间段,分50～300 mg/kg等5个剂量,分别添加到颗粒料和粉料给10-35日龄肉仔鸡饲喂7天以上。结果表明,S807可预防肉仔鸡腹水症,肉鸡的死淘率从16.5%下降至7.88%;每天添加饲喂可使肉鸡平均增重11.0～16.3g,生产性能增加18.6%～22.1%。试验证实抗菌肽可以显著地提高雏鸡成活率,促进肉仔鸡生长。

鸡Toll样受体在IBDV免疫中的作用研究

为了揭示鸡先天性免疫反应在IBDV疫苗过程中的作用,将40只14日海兰褐蛋鸡随机分成两组,实验组接种IBDV活疫苗,对照组注射生理盐水,隔离饲养。于免疫前和免疫后12h、24h、48h、72h、130h各取脾脏和法氏囊分离淋巴细胞并提取总RNA,用实时荧光定量检测方法检测各组中chTLR3、chTLR7、chTLR21表达的动态变化。结果显示,在免疫后36h,鸡法氏囊和脾脏中chTLR3表达变化最显著,在免疫后48h,鸡脾脏和法氏囊中chTLR21表达变化也较为明显。提示chTLR3在鸡对IBDV的免疫应答中起主要作用。

抗菌肽S807提高仔猪生产性能的研究

为了测定抗菌肽S807(强生肽A)的功效,我们进行了用于仔猪的饲养效果试验。28日龄仔猪基础日粮中按强生肽A100g/吨饲料添加,监测腹泻发病率和生产性能。结果表明,抗菌肽可将仔猪腹泻率从37.5%下降至20.0%,将料肉比从2.4∶1降至2.0∶1,显示较强的抗病、促生长性能。

产蛋下降综合征病毒纤突蛋白Knob-S区原核表达及其活性分析

通过PCR扩增得到产蛋下降综合征病毒(EDSV)纤突蛋白Knob-S区基因,将其克隆至原核表达载体pET-32(a)的多克隆位点构建了原核表达载体pET-32(a)-Knob-S,将其转化至感受态细胞BL21中,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,结果获得了42ku的融合蛋白,用纯化的融合蛋白免疫鸡制备抗血清,通过血凝试验、Western blot和血凝抑制试验分析,表明该融合蛋白不能凝集鸡红细胞,无血凝活性;但可与EDSV阳性血清发生特异反应,并诱导机体产生特异性抗体,具有很好的抗原性。

4株野鸭源H5N1亚型禽流感病毒的全基因组鉴定

目的为了解H5N1病毒对基因进化情况,方法对4株野鸭源的H5N1禽流感病毒(A/mallard/Huadong/S/2005(S),A/mallard/Huadong/lk/2005(lk),A/mallard/Huadong/Y/2003(Y),A/mallard/Huadong/hn/2005(hn))进行全基因组测序分析,并鉴定对非免疫麻鸭的毒力。结果4株病毒全基因组序列及其氨基酸序列无明显差异,仅在HA裂解位点区,S和lk病毒的322位是Leu,329位缺失,而Y和hn在此两处分别是Gln和Lys。在遗传距离上,Y和hn比较接近,S与lk比较接近。结论根据H5亚型病毒最新分类规则,S和lk的与clade 2.3.4一致,而Y属于clade 2,hn位于clade 3。对麻鸭致病性试验表明,Y和hn是低致病性病毒,而S及lk是高致病性病毒。HA的322位的Leu和329位缺失可能是clade 2.3.4这类病毒的一个遗传进化标志。

免疫增强剂对不同肉鸡禽流感疫苗免疫效果探讨

试验将筛选获得的免疫增强剂与现有商品化禽流感疫苗混合后免疫10-15日龄的白羽肉鸡、黄羽肉鸡或麻鸡，在免疫后的第2、3、4周采血用于检测血凝抑制抗体效价，统计饲料用量，并在各品种鸡达到出栏日龄时，检测出栏重、料肉比和死淘率。结果显示，3种肉鸡免疫含免疫增强剂伴侣的H5亚型禽流感疫苗，抗体产生比常规疫苗提前1周达到710昏，平均HI抗体效价显著高于常规疫苗；不同疫苗免疫鸡与对照鸡在出栏重和料肉比方面无显著差异，在饲养期间无死淘情况。综合上述结果提示，免疫增强剂能显著提高禽流感疫苗在肉鸡的免疫效力，同时对生产性能无明显影响。

Marc-145细胞无血清培养液组分的优化筛选

目的:对Marc-145细胞无血清培养液组分及浓度进行优化筛选。方法:采用Plackett-Burman设计和中心组合旋转设计对不同的营养成分进行优化筛选。结果:经Plackett-Burman设计,利用20组实验对14种不同营养成分进行考察,发现孕酮、抗氧化试剂、乙醇胺、维生素B6、维生素B12和脂肪酸复合剂对Marc-145细胞无血清悬浮生长的比生长速率有显著影响;针对该6种因素进行中心组合旋转实验设计,利用53组实验筛选出它们的最优使用浓度分别为孕酮5.5 mg/L、抗氧化试剂250μL/L、乙醇胺2.1 mL/L、维生素B122.86 mg/L、维生素B644μg/L和脂肪酸复合剂215μL/L。结论:经2种实验设计方法优化,确定了Marc-145细胞无血清培养液组分及最适浓度,为无血清悬浮培养Marc-145细胞及增殖猪繁殖及呼吸综合征病毒提供了实验基础。

补中益气汤对雏鸡免疫功能的影响

机体免疫分为体液免疫和细胞免疫,为了验证补中益气汤对雏鸡免疫调节功能的影响,本试验将分为高、中、低3个剂量,连续给药7d,在末次给药的同时用ND-Ⅳ系苗免疫,同时设无佐剂组和空白非免疫组,分别于免疫后第7、14、21、28 d采血,分别用微量法和MTT法测定血清ND-HI抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖的动态变化。结果表明,补中益气汤能显著加快血清抗体产生、提高血清抗体效价和促进外周血T淋巴细胞增殖,在多数时间点的效果显著,以2.0g/羽份效果显著。

猪高热病的防控策略

猪高热病是一种在夏、秋季节高发,以持续高热、呼吸道症状为主的疾病,具有传播速度快、流行范围广、感染发病率高、治疗效果较差、经济损失大等特点,是具有高热症状的一系列猪病的总称。有文献记载,1977年至20世纪80年代中后期,我国十五个省大量暴发＂红皮病＂,又称＂猪无名高热病＂,

禽流感的综合防控措施

2009年，我国12个省份检出禽流感病原学阳性样品87份，禽流感病毒不断变异重组，病毒污染面较大，疫病防控形势严峻。春夏之交时正是禽流感等重大动物疫病高发期，加之春节后畜禽补栏、活畜禽及其产品调运交易频繁以及候鸟迁徙等因素，疫情远距离、跨区域传播风险机率上升。广大养禽业者要提高警惕，积极做好防疫工作。

鸡传染性法氏囊病的诊断和防治

传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病毒（IBDV）引起幼龄鸡的急性、高度接触性、并引起免疫抑制的传染病。我国将其列为二类疫病。该病最早于1957年发现予美国的特拉华州甘布罗地区肉鸡群中，又称甘布罗病。我国学者周蛟于1982年在北京从进口鸡群中分离出该病毒。目前，该病已遍及世界各地，给养鸡业造成了很大的经济损失。

鸡白痢沙门菌病的诊治

泰兴某鸡场发生产蛋鸡拉稀、死亡症状。经病理剖检、实验室诊断及动物回归试验确诊为鸡白痢沙门菌病。分离、纯化菌株经药敏试验,选择敏感性较高的氟苯尼考进行治疗,病情得到有效控制。

响应面法优化大肠埃希菌生产PCV2 Cap蛋白的诱导条件

为提高重组大肠埃希菌发酵生产PCV2Cap蛋白的产量,优化宿主菌的表达条件。在单因素试验基础上,以接种量、诱导时间和诱导温度为自变量,目的蛋白产量为响应值,根据响应面法的Box-Behnken中心组合设计原理,研究各自变量及其交互作用对PCV2Cap蛋白产量的影响,利用Design-Expert软件和响应面分析相结合的方法对诱导条件进行优化。结果表明:发酵的最佳诱导条件为接种量φ=2.21%,诱导时间21.76h,诱导温度18.2℃。在该诱导条件下,摇瓶中获得最高蛋白产量为318.50mg/L,发酵罐获得最高蛋白产量为1 200.00mg/L。采用响应面分析方法能够有效地提高目的蛋白的表达量。

海兰褐蛋鸡体内Toll样受体的分子克隆与序列分析

为了研究海兰褐蛋鸡的先天性免疫机制,根据已报道的鸡的9种Toll样受体(TLR)和其他动物(人、小鼠和猪)TLR9的基因序列,设计特异性引物,从海兰褐蛋鸡体内扩增出11个鸡Toll样受体部分基因片段,与GenBank登录的序列进行比对和分析,同源率达99%以上。同时也证实鸡体内不存在TLR9,但是存在TLR21。

传染性支气管炎病毒DS10株S基因分析及其杆状病毒表达产物免疫原性鉴定

对肾型鸡传染性支气管炎病毒分离株Ck/Jiangsu/DS10/2008株(DS10株)S基因进行扩增、克隆和序列测定,并与GenBank中的其他25株参考株构建进化树进行比对分析,研究其遗传进化关系。另将S基因克隆至杆状病毒表达系统pFastBac 1载体并转染Sf9昆虫细胞进行表达,经间接免疫荧光鉴定其表达,用琼扩试验验证表达产物的反应性。S基因序列分析表明,S基因高变区域主要集中在157～230位、349～433位、787～886位之间,裂解位点序列为SHRRRRμSI。遗传进化分析表明,DS10与Vic株处于同一分支,而与H120等常用疫苗株相距较远。经间接免疫荧光检测表明,S蛋白在Sf9细胞中得到表达,琼扩试验验证表达产物具有良好的反应性,表明所表达的S蛋白具有良好的生物学活性。本研究表达的S蛋白可为传染性支气管炎诊断抗原的研制、新型疫苗的开发等提供基础材料。