耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药基因分析

目的了解太仓市第一人民医院碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)对常用抗菌药物的敏感性及常见碳青霉烯类耐药基因的流行。方法收集2017年1-12月临床分离的全部CRE菌株,微量肉汤稀释法测定CRE对常用抗菌药物的敏感性;聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)特异性扩增blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaVIM和blaOXA基因,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序分析,经BLAST比对确定耐药基因的基因型。结果共收集到54株CRE菌株,主要为肺炎克雷伯(57.4%,31/54)、阴沟肠杆菌(16.7%,9/54)、大肠埃希菌(14.8%,8/54)。药敏试验结果表明54株CRE菌株除了对多粘菌素、替加环素、阿米卡星的耐药率分别为0、3.7%、33.3%以外,对其他临床常用抗菌药物耐药率高达50.9%~100%;基因扩增结果表明57.4%(31/54)的菌株检出blaKPC基因;5.5%(3/54)的菌株检出blaNDM基因;其他基因未检出。结论CRE对多黏菌素和替加环素之外的大多数临床常用抗菌药物呈高度耐药;产KPC型碳青霉烯酶是CRE对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要耐药机制,基因型主要为blaKPC-2。

多发性骨髓瘤患者B淋巴细胞刺激因子及其受体的表达水平

目的探讨B细胞激活因子（BLyS）及其受体在多发性骨髓瘤（MM）发病中的作用机制.方法用酶联免疫吸附测定法（ELISA）和实时荧光定量聚合酶链反应（RFQ—PCR），对31例MM患者和30名健康人血清BLyS含量、外周血单个核细胞（PBMCs）中BLyS及其受体mRNA含量进行检测;并比较MM患者血清BLyS含量与外周血PBMCs中BLyS及其受体基因表达水平和β2微球蛋白（β2M）的相关性.结果MM患者血清BLyS含量（6．99±3．28g/L）明显高于健康对照组（2．70±1．09g/L，P〈0．01），并与β2M浓度呈正相关性（r=0．954，P=0．000）;77．42%（24/31），93．55%（29/31），90．32%（28/31）的MM患者血清BLyS蛋白和PBMCs中BLyS，B细胞成熟抗原（BCMA）mRNA表达水平较正常人明显增高，并且也与β2M的含量呈正相关;而64．52%（20/31）患者穿膜蛋白活化物（TACI）mRNA表达水平降低.结论MM患者的血清BLyS蛋白浓度和PBMCs中BLyS及其受体基因表达水平有异常改变，说明BLyS及其受体可能参与MM的发病;BLyS及其受体表达水平也许可作为预后的一个指标.

妊娠期肝内胆汁淤积症血清胆汁酸与肝功能检测的临床意义

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者血清总胆汁酸(TBA)和肝功能的改变特点,分析其临床意义。方法收集50例ICP患者和50名正常妊娠女子空腹血清,测定血清TBA含量,同时检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT),观察ICP患者血清TBA和肝功能异常与母儿并发症及妊娠结局的关系。结果 ICP组血清TBA(73.9±13.6)μmmol/L,显著高于对照组(7.8±2.1)μmol/L,(P<0.01);ICP组血清ALT和AST及GGT分别为(98.5±6.8)U/L和(84.2±5.6)U/L及(143.9±14.7)U/L,显著高于对照组(32.5±5.1)U/L和(25.3±5.2)U/L及(35.1±4.5)U/L,(P均<0.01)。ICP患者肝功能及血清TBA值异常,可使孕妇自觉症状加重,倒置胎儿宫内窘迫,胎儿宫内发育迟缓,早产,产时并发症等。结论血清TBA和肝功能是敏感的指标,反映了病情的严重性,对ICP的临床诊断,疗效判断及病情发展有重要参考价值,可进一步提高了我们对ICP的认识。

阴道炎五项指标联合检测法与阴道分泌物传统方法的联合应用

目的探讨运用阴道炎五项指标联合检测(五联检)试剂与传统方式(湿片镜检)对妇女阴道分泌物进行检测,为临床阴道炎的诊断提供理论依据。方法对1 015例妇女阴道分泌物检查结果进行分析,并采用SPSS11.5统计学软件比较阳性诊断率。结果五联检测法在白细胞、细菌性阴道病(BV)及念球菌的检出率方面均高于传统的检查方法,联合两种检验方法在白细胞、BV、念球菌和滴虫的阳性率均高于五联检测法。结论阴道炎五联检试剂可以准确地反映阴道炎病原菌,并且与传统的检验方法具有互补性。

乙型肝炎病毒DNA定量检测临界室内质控品的制备与初步应用

目的制备乙型肝炎病毒(HBV)-DNA定量检测的临界室内质控品并评价其在日常工作中的应用价值。方法留取健康体检者血清作为基质,稀释阳性标准品,与临床标本采用实时荧光定量聚合酶链反应一起检测,根据结果计算出x、s、CV值并在L-J室内质控图上作图,应用Westgard多规则质控判断方法。结果 x=3.55×104 copy/mL,s=0.24(对数值),CV=5.27%。结论自制HBV DNA临界质控品结果稳定,具有一定实用价值。

不同处理方式在伯乐D-10TM糖化分析仪上检测HbA1c结果的影响

目的探讨分析前对样本的不同处理方式在BIO-RAD D-10TM糖化分析仪上检测糖化血红蛋白(HbA1c)结果的影响。方法收集在太仓市第一人民医院门诊和住院检测HbA1c的患者全血110份,用乙二胺四乙酸二钾抗凝全血标本直接上机(A原血检测法)和用5μL全血+1.5mL WASH液进行稀释(B预稀释法),分别用离子交换高压液相色谱法测定。结果根据110份样本HbA1c含量分为<6.0%、6.0%～8.0%、>8.0%3种水平分别进行统计学分析。结果 3种水平HbA1c用不同处理方式的检验结果经比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论分析前用不同处理方式在伯乐BIO-RAD D-10TM糖化分析仪上检测HbA1c结果无差异。

实时荧光定量PCR方法检测非霍奇金淋巴瘤患者B淋巴细胞刺激因子表达水平

目的:建立实时荧光定量PCR方法(RFQ-PCR)检测非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者B淋巴细胞刺激因子(BAFF)表达水平。方法:47例NHL患者及20例健康对照,采用实时荧光定量PCR方法检测其外周血单个核细胞中的B淋巴细胞刺激因子表达水平。结果:RFQ-PCR检测BAFF含量的示灵敏度为10 pg/ml,低浓度样本批内和批间变异系数(CV)分别为8.56%和11.32%,高浓度样本批内和批间CV分别为0.76%和4.58%。NHL患者和健康对照者BAFF mRNA表达量分别为(0.48±0.023,0.25±0.023),两者具有显著性差异(P=0.0001)。结论:RFQ-PCR检测BAFF mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性。NHL患者BAFF mRNA高表达,提示BAFF可能在NHL发生发展中发挥重要作用。

新生儿败血症的病原菌分布及耐药性分析

目的探讨新生儿败血症的病原菌种类及耐药性,指导临床合理使用抗生素。方法对65例血培养阳性的新生儿败血症的血培养资料进行分析。结果65例败血症中,革兰氏阳性球菌58例占89.2%(其中表皮葡萄球菌38株占58.4%),革兰氏阴性杆菌7例占10.8%;对各种抗生素均有较高耐药性(其中表皮葡萄球菌对氨苄青霉素、青霉素、苯唑青霉素、阿莫西林棒酸、头孢唑啉、泰能的耐药性>50%)结论①引起新生儿败血症的细菌以革兰氏阳性球菌为主,其中主要是表皮葡萄球菌及人葡萄球菌亚种。人葡萄球菌亚种的比例及耐药性均有增多趋势;②应根据细菌鉴定及药敏试验选择敏感药物治疗,并检测MRS;③全面了解和掌握细菌种类和耐药性变化有利于提高新生儿科抗感染治疗的质量,降低耐药性的发生。

不同检测系统常用血清酶测定结果对比及偏倚评估

目的通过对不同检测系统进行方法学比对分析,探讨各检测系统之间测定临床常用血清酶是否具有可比性。方法依据美国临床和实验室标准化研究所EP9-A2文件要求,每天随机从临床样本中抽取8份不同浓度的血清样本,分别用两种检测系统进行相关血清酶测定,共测定5d,记录检测结果,并进行相关回归分析。根据直线方程计算在某医学决定水平处的预期偏倚(B^c)和预期偏倚的95%可信区间,并判断偏倚性是否可以接受。结果除天门冬氨酸氨基转移酶在低值处的预期偏差(绝对值)大于1/4允许总误差外,不同检测系统对常用血清酶测定结果的偏差在允许误差范围内,其检测结果具有可比性。结论当用2个以上检测系统检测同一检验项目时,应进行方法学比对和偏倚评估,判断其临床可接受性能,以保证检验结果的可比性。

多发性骨髓瘤患者血清APRIL表达水平的初步研究

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者血清增殖诱导配体(APRIL)蛋白水平,并分析它们和临床指标的相关性,初步探讨APRIL对MM发病和预后的意义。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测MM患者(19例)血清APRIL水平,以健康志愿者(23例)作为对照;同时将患者血清APRIL水平与乳酸脱氢酶(LDH)、β2微球蛋白(β2M)、轻链和免疫球蛋白(Ig)进行相关性分析。结果MM患者血清APRIL水平明显低于健康对照组(P<0.01);MM患者血清APRIL的表达水平与血清β2M、轻链及Ig含量呈负相关(r=-0.381、-0.473、-0.407,P值均<0.05)。结论MM患者血清APRIL水平与健康对照组存在显着性差异,提示APRIL可能与MM的发病及预后有关。

miRNAs在肝细胞癌中的研究进展

微小RNA(miRNAs)是一种内源性的小RNA,它能和目标mRNA进行相互作用。通常认为,miRNAs的异常表达与恶性肿瘤的进程存在密切联系。肝癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,在我国,肝细胞癌(HCC)发生率位居第4,病死率位居第3[1]。统计数据表明,HCC是原发性肝癌最常见的类型,占85%~90%。有研究认为,肝癌高发与HBV、HCV感染、长期酗酒、摄入黄曲霉毒素、非酒精性脂肪肝、原发性胆汁性肝硬化等因素密切相关,早期诊断是肝癌治疗非常重要的前提[2]。

肿瘤坏死因子β1069位点等位基因多态性与创伤后严重脓毒血症的关系研究

目的 为了探讨江苏汉族人群中肿瘤坏死因子β(TNFβ)等位基因多态性与创伤后严重脓毒血症的关系。方法 采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对58例创伤后并发严重脓毒血症病人TNFβ基因的单碱基突变多态性进行分析。结果 创伤后并发严重脓毒血症病人的TNFβ*2基因频率较正常人明显升高(创伤后严重脓毒血症病人68.9％,正常人55.1％,P=0.015,RR=1.73)。结论 TNFβ*2基因频率与创伤后严重脓毒血症易患性相关。

慢性心力衰竭患者的血清甲状腺激素和脑钠肽浓度变化及临床意义

目的观察慢性心力衰竭（CHF）患者血清甲状腺激素（TH）和脑钠肽（BNP）水平的改变及其与心功能的相关性，并分析TH与BNP之间的关系，探讨其在慢性充血性心力衰竭发病机制中的作用。方法选取CHF患者100例（CHF组）和同期健康体检者35例（对照组），采用化学发光免疫法测定血清T3．T4、FT3、FT4、rT3和BNP水平。结果CHF组血清T3、FT3、T3／rT3水平均低于对照组，随心功能不全的加重而逐渐下降（P〈0．05），而血清rT3、BNP水平显著高于对照组，随心功能不全的加重而逐渐升高（P〈0．05）；相关分析显示，CHF患者甲状腺激素T3、rT3、T3／rT3与BNP均呈相关性（P〈0．01）。结论TH、BNP参与心力衰竭的病理生理过程，血清TH、BNP水平反映心脏收缩功能障碍严重程度，可作为评价CHF患者病情严重程度的客观指标。

探讨白细胞介素-23和白细胞介素-17在小儿哮喘患者中的作用

目的 探讨白细胞介素(IL)-23和IL-17在小儿哮喘患者外周血的表达,分析二者的相互关系及其与哮喘严重程度之间的联系。方法 选择该院住院小儿哮喘患者50例,按照病情评估进行分组,轻度哮喘组15例,中度哮喘组22例,重度哮喘组13例,对照组选择健康小儿30例。收集小儿外周血,采用酶联免疫吸附试验测定血清IL-23和IL-17水平,采用Spearman相关分析IL-23和IL-17之间的相关性。结果 哮喘患儿血清IL-23和IL-17水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),且随着哮喘病变的加剧逐渐增加。结论 IL-23和IL-17在小儿哮喘患者中表达明显增加,并且与疾病严重程度存在相关性,有助于哮喘的诊断和预后判断。

生化检测系统校准周期的确立

目的:探讨生化检测系统校准周期,确保检验结果的准确性。方法将观察项更换试剂后校准全自动生化分析仪,每2h检测一批质控血清,连续监测24h。校准周期选定应从完成校准全自动生化分析仪开始计算时间,直到CV大于1/6CLIA'88允许误差时结束,其余的项目继续每24h监测1次,连续1个月,分析检测结果。结果最短的定标周期为每8h 1次(肌酐),最长的校准周期可超过30d。结论科学的生化检测系统校准周期,对保证生化项目检测结果的准确性有重要意义。

国际血液分析仪41条复检规则的临床应用评价及实验室复检标准的建立

目的采用Sysmex XS-1000i血细胞分析仪评估国际血液学专家组推荐的血细胞41条复检规则,提出适合于临床使用的血细胞复检规则。方法采用日本希森美康公司生产的XS-1000i血细胞分析仪,检测太仓市璜泾人民医院门诊和住院标本6 685份,按照国际血细胞复检规则和涂片镜检阳性标准进行评估,计算真阳性率、假阳性率、假阴性率、评价41条复检规则的临床应用价值,并筛选出最适合临床使用的血液复检规则。结果根据国际血液学复检专家组推荐的41条复检规则和涂片镜检阳性标准对检测结果进行统计学分析,复检率为38.6%(2 584/6 685),真阳性率64.20%,假阳性35.30%,假阴性率1.47%。采用筛选后的复检规则进行检测,1 021份标本复检率为14.4%,真阳性率79.96%,假阳性率20.04%,假阴性率3.23%。结论使用国际41条复检标准,漏检率低但复检率过高,不适合临床应用,采用筛选后的复检标准复检率大幅降低为14.40%,假阴性率仅为3.23%,符合国际血液学专家组确定的5%可接受限。

不稳定型心绞痛危险因素分析及临床意义

目的：探讨TC、TG与CK-MB/CK比值联合检测在早期筛查不稳定型心绞痛中的临床意义。方法：利用Excel软件和SPSS 16.0统计软件对TC和TG检测值与CK-MB/CK比值之间的变化规律进行趋势分析及相关性分析。结果：TC浓度组与CK-MB/CK比值组之间中度相关（ P〈0.01），CK-MB/CK比值变化趋势随TC浓度的增高而增大；但TG浓度组与CK-MB/CK比值组之间没有明显的相关性（ P〉0.01）。TG浓度变化与CK-MB/CK比值变化趋势随TG浓度的升高没有明显的改变。在高TG浓度情况（0.57 mmol/L以上）时，CK-MB/CK比值变化趋势在高水平的12.05%-17.08%之间。结论：TC、TG与CK/CK-MB比值联合检测能够较全面地反映心肌损害情况，能较好地避免CK-MB/CK比值假阳性结果给临床诊断带来的困扰，可以用于不稳型心绞痛的早期诊断。

血清hs-CRP及IL-6水平检测在冠状动脉硬化性心脏病患者中的临床意义

目的:探讨血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)和白细胞介素-6(IL-6)检测在冠状动脉硬化性心脏病(CHD)患者中的意义。方法:选择128例CHD患者,按诊断分为稳定性心绞痛(SAP)组(43例)、不稳定性心绞痛(UAP)组(41例)和急性心肌梗死(AMI)组(44例),选取40例健康人作为对照组,检测并对照分析4组血清hs-CRP和IL-6水平。结果:CHD患者的血清hs-CRP和IL-6水平均明显高于对照组(P<0.05),其中UAP组和AMI组的hs-CRP和IL-6水平明显高于SAP组(P<0.05),但UAP组和AMI组比较差异无统计学意义(P>0.05)。血清hs-CRP与IL-6水平呈正相关。结论:血清hs-CRP和IL-6水平与CHD严重程度密切相关。