江苏省基层卫生工作人员肠道寄生虫病防治技术培训效果分析

目的评估肠道寄生虫病防治技术培训对于提高江苏省基层卫生工作人员寄生虫病检测技术水平的效果。方法采用理论授课和实践操作相结合方式进行培训，培训结束后分别对理论和镜检两部分进行考核，其中镜检考核每人阅读10张改良厚加藤片，每张限时5min，总共100分，60分及格。应用SAS9．0软件对考核结果进行秩和分析。结果共有13个市162名基层寄生虫病防治工作人员参加了培训，无学员缺考。理论考核最高分为99分，最低分60分，平均为86．28分；理论考核成绩女性学员高于男性，30～40年龄组高于其他年龄组，苏北地区优于苏南和苏中地区，不同地区间理论考核成绩差异有统计学意义（P〈0．05）。镜检考核最高分为100分，最低分为20分，平均为73．40分；9种虫卵中5种虫卵的检出率〉60．00％；其中鞭虫卵检出率最高，为88．17％，带绦虫卵最低，为14．72％。南京市平均总成绩最高，为181．32分；常州市最低，为138．27分；不同地区间总成绩差异有统计学意义（P〈0．05）。结论江苏省不同地区基层卫生工作人员对肠道寄生虫病防治技术的了解程度存在差异，肠道寄生虫病防治技术培训在一定程度上提高了基层卫生工作人员对肠道寄生虫病的病原学检测水平。

江苏省疟疾流行与控制

目的分析总结50多年来江苏省疟疾流行特点和防治措施,评价防治效果,探讨适合当前流行特点的防治策略和措施。方法收集1951～2008年江苏省疟疾发病情况、控制措施及防治效果等资料,分析评价不同阶段疟疾流行特点和防治措施实施效果。结果根据因地制宜、分类指导、突出重点的防治原则,在2次大暴发时,采取以控制传染源为主的综合措施;在实现基本消灭阶段,嗜人按蚊地区采取以防蚊灭蚊为主的综合措施,其他地区实施以加强传染源检测和早期治疗为主的综合防治措施;在巩固监测阶段,采取疟疾监测为主的综合措施,包括传染源检测和疫情报告、传染源管理、疫情和蚊情监测、流动人口疟疾管理等。疟疾年发病率由1960年的2 495/万降至2008年的0.09/万,且已连续2年全省以县(市、区)为单位年发病率控制在1/万以下。表明在不同阶段采取的防治措施可行而有效。结论江苏省疟疾流行已得到有效控制,但要达到消除目标,还需进一步提高疟疾病例早期诊断和规范治疗能力;加强健康教育和健康促进;加强流动人口的疟疾监测与管理。

2008年江苏省农村改厕无害化处理效果评价

目的调查2008年江苏省无害化卫生厕所建造和使用情况,评价其对粪便处理的卫生学和环境学效果,为指导江苏省农村改厕工作提供科学依据。方法在江苏省无害化卫生厕所普及率<80%的10个县(市、区)的20个改厕村,随机抽取300座已经改造的无害化卫生厕所,现场勘察三格式化粪池的建造是否符合要求。采集无害化卫生厕所进口粪稀、出口粪液样品,实验室检测粪大肠菌群(FC)、寄生虫卵、化学需氧量(COD)、五日生化需氧量(BOD5)和氨氮(AN)等指标。计算进、出口FC的平均合格率,COD、BOD5和AN平均去除率。结果在调查的300座无害化卫生厕所中,构筑物的各项指标均符合要求。600份样品中均未检出寄生虫卵。进、出口FC平均合格率分别为16.00%和97.67%,差异有统计学意义(χ2=407.783,P<0.01),出口COD、BOD5和AN平均去除率分别为63.00%、47.67%和8.67%。结论2008年江苏省农村改厕工作完成情况较好。无害化卫生厕所对粪便中FC有很好的杀灭作用,但对COD、BOD5和AN的去除效果不够理想,需做进一步处理。

应用时间序列模型预测江苏省钩虫感染率

目的探讨应用时间序列ARIMA模型预测江苏省钩虫感染率的可行性。方法以1990-2006年江苏省钩虫感染率数据做为训练数据集,应用SAS 9.0软件对训练数据集进行差分平稳化处理后,采用最小信息准则筛选参数,构建全省钩虫病自回归滑动平均模型(ARIMA),预测全省钩虫感染率。结果初步确定全省钩虫感染率时间序列模型ARIMA(1,2,0),应用该模型预测的全省钩虫病流行趋势与实际感染情况相一致,实际感染率均落在预测值95%可信区间内;模型预测的2007-2011年全省钩虫感染率与实际感染率基本相符,最小预测误差仅为9.23%。结论构建的时间序列模型具有良好的预测效果和一定的防治应用价值。

恶性疟原虫体外药敏实验检测方法的比较研究

目的比较WHO微量测试法（WHO microtest）、疟原虫乳酸脱氢酶（Plasmodial lactate dehydrogenase,p LDH）ELISA测定法、富组蛋白Ⅱ（Histidine-rich proteinⅡ,HRPⅡ）ELISA测定法和SYBR GreenⅠ荧光测定法等4种恶性疟原虫体外药敏实验检测方法,确定一种较为稳定、简便快速且经济的体外药敏实验检测方法,用于后续疟原虫敏感性的监测及新型抗疟药的筛查。方法以恶性疟原虫虫株3D7、FCC、K1、Dd2为对象,分别采用WHO microtest法、p LDH法、HRPⅡ法和SYBR GreenⅠ法测定其对氯喹、哌喹和阿莫地喹的敏感性,并采用Friedman检验、偏相关分析、Pearson相关分析和Bland-Altman分析对4种药敏检测方法的IC50值进行分析。结果在初始密度为0.5%~1.0%时,4种方法的IC50值之间的差异无统计学意义（P〉0.05）,任意2种方法间均呈直线相关关系（P〈0.001）。WHO microtest法技术要求高、耗时长且结果判定受主观影响;HRPⅡ法的敏感性高于p LDH法和SYBR GreenⅠ法,但成本高;SYBR GreenⅠ法技术要求低、耗时短且成本低。结论 SYBR GreenⅠ法是一种较为便捷、经济的检测方法,适用于大规模监测疟原虫药物敏感性及研究新型抗疟药。

环介导等温扩增技术检测蚊体内间日疟原虫子孢子的研究

目的建立一种简便、快速和高敏感度的蚊体内间日疟原虫检测的环介导等温扩增方法(LAMP)。方法针对间日疟原虫环子孢子蛋白(CSP)基因种属特异性保守区域6个位点设计2对引物,以感染性按蚊、阴性按蚊、恶性疟原虫及正常人血DNA为模板评价LAMP的特异性。将间日疟原虫CSP基因质粒DNA梯度稀释,并与阴性按蚊DNA按1.0μl加1.3×106、1.3×105、1.3×104、1.3×103、1.3×102、1.3×101、1.3×100拷贝混合后为模板进行LAMP反应,观察其检测敏感性;将感染性按蚊与阴性按蚊DNA作1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128、1:256稀释,然后以稀释样本为模板进行LAMP反应,观察批量检测的敏感性。再用此方法与镜检解剖、巢式PCR同时检测同批次人工感染的67只按蚊,评价其应用价值。结果此法检测感染性按蚊阳性,对照组均为阴性;检测不同比例稀释的间日疟原虫CSP基因质粒DNA与按蚊DNA混合物,最低可检测1.3×102拷贝的间日疟原虫CSP基因质粒DNA与按蚊DNA的混合物;检测不同比例感染按蚊与阴性按蚊DNA混合样本,最低可检测出在128个按蚊中有1个感染按蚊的混合样本;用此法检测67只同批次人工感染的按蚊,检出率为47.76%,解剖镜检检出率为25.37%(χ2=7.24,P<0.01),巢式PCR检出率为40.30%(χ2=0.73,P>0.05)。以镜检解剖作为金标准,LAMP敏感性为100%,巢式PCR敏感性为100%。结论LAMP检测蚊体内间日疟原虫简便、快速、敏感性高,具有广阔的应用前景。

不同地理株嗜人按蚊对间日疟原虫的易感性

目的比较我国不同地理株嗜人按蚊对间日疟原虫的易感性。方法在我国间日疟流行区采集间日疟病例血样,采用体外人工膜饲感染系统在实验室同时体外人工感染广东、辽宁、江苏3个不同地理株的嗜人按蚊,在感染后的7-9d和14d分别解剖蚊胃和唾液腺,并检测蚊体内的卵囊和子孢子数。结果共配对感染江苏、广东和辽宁地理株嗜人按蚊35批,感染7-9d 3种按蚊卵囊阳性率分别为68.57%、60.00%和68.57%,感染后14d子孢子阳性率分别为22.86%、14.29%和22.86%,3种按蚊感染卵囊和子孢子差异无统计学意义（P〉0.05）。在感染后7-9d分别解剖江苏、辽宁、广东株嗜人按蚊228、235只和228只,卵囊阳性蚊比例分别为28.07%、25.11%和26.75%。在感染后14d分别解剖江苏、辽宁、广东株嗜人按蚊150、142只和135只,子孢子阳性蚊比例分别为10.67%、8.45%和11.85%,三者间卵囊和子孢子阳性蚊比例差异均无统计学意义（P均〉0.05）。江苏、广东、辽宁株嗜人按蚊子孢子感染度差异无统计学意义（P〉0.05）。结论广东、辽宁、江苏3个不同地理株嗜人按蚊均对间日疟原虫易感。

蚊媒体内疟原虫子孢子检测技术研究进展

蚊媒体内疟原虫子孢子检测是蚊媒监测、疟疾防治效果评价及疟疾发病预测的一个重要指标。本文就蚊媒体内疟原虫子孢子检测技术及其应用研究进展作一综述,并简要探讨了其相关原理和现场应用前景。

中国疟疾从控制走向消除--消除阶段的目标策略和措施

我国于2010年正式启动了国家消除疟疾行动,计划于2020年在全国范围内消除疟疾。要如期实现消除疟疾的目标,必须要客观认识疟疾消除阶段的特点,制订科学合理的防控策略和技术措施。本文通过对疟疾控制和消除阶段的比较,分析疟疾消除阶段目标、策略和措施调整与转变的必要性和紧迫性,对我国现行的消除疟疾"1 3 7定点清除"工作模式的背景、定义、工作重点及技术难点进行阐述,以增进各级医疗卫生机构对我国当前消除疟疾目标、策略和措施的认识,促进相应策略和措施的创新和贯彻落实,推动我国消除疟疾工作。

弓形虫急性感染小鼠血清蛋白质质谱分析的初步研究

目的分析弓形虫急性感染小鼠血清蛋白质组学变化。方法16只同窝配对的C57BL/6J小鼠,随机分成弓形虫急性感染组和对照组,每组8只。弓形虫急性感染组每鼠腹腔感染经CF 11纤维素纯化的RH株弓形虫速殖子（1×104/ml）0.2 ml,对照组每鼠腹腔接种0.2 ml灭菌生理盐水。感染后4 d,处死全部小鼠,应用弱阳离子（WCX）纳米磁性微球捕获小鼠血清蛋白,采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI TOF MS）技术检测两组小鼠血清蛋白质变化,并采用Autoflex analysis与Clin ProTools软件进行分析与比较。结果在分子量为1 000~16 000 Da区段,与对照组小鼠血清蛋白指纹图谱比较,弓形虫急性感染小鼠血清蛋白质谱有13种蛋白表达差异有统计学意义,其中9种蛋白质表达上调,4种蛋白质表达下调。表达上调的多肽质荷比（m/z值）分别为1 932.76、1 976.85、2 090.53、5 004.5、5 776.01、5 803.05、5 847.99、5 877.51和7 501.58,表达下调的多肽m/z值分别为1 866.40、4 063.71、8 120.31和8 203.83。结论弓形虫急性感染小鼠血清蛋白质组发生显著改变,采用WCX纳米磁性微球联用MALDI TOF MS技术可检出弓形虫急性感染小鼠血清中的特异性蛋白标志物。

17例并殖吸虫病临床分析

目的探讨并殖吸虫病的临床表现、诊断及治疗,提高并殖吸虫病防治水平。方法收集并殖吸虫病患者的临床资料进行回顾性分析。结果共确诊并殖吸虫病患者17例,其中11例患者以咳嗽、胸痛、发热为主要临床表现,13例患者存在胸腔积液。17例患者的末梢血嗜酸性粒细胞比例29.9%～59.3%,并殖吸虫抗体Ig G（ELISA）均为阳性。经吡喹酮治疗后,所有患者均治愈,随访1～2年无复发。结论并殖吸虫病患者临床表现形式多样化,影像表现则以胸腔积液多见。末梢血中嗜酸性粒细胞增多及并殖吸虫抗体检查有助于此病诊断,吡喹酮治疗效果确切。

急性弓形虫感染小鼠脑蛋白质二维电泳图谱初步分析

目的应用二维电泳(2-DE)技术研究急性弓形虫感染对小鼠脑蛋白质组的改变。方法分别提取纯化急性弓形虫感染和正常同窝配对的C57BL/6J小鼠脑组织蛋白,以固相pH3～10梯度聚焦为第一向,SDS-PAGE垂直电泳为第二向进行双向凝胶电泳,应用PDQuest 1.0软件分析蛋白差异。结果急性弓形虫感染与正常同窝配对的C57BL/6J小鼠脑组织2-DE图谱分别检测出(132±10)个和(170±13)个蛋白斑点,对两组电泳图谱进行匹配后,有19个蛋白点仅在急性弓形虫感染小鼠脑蛋白2-DE图谱中表达;另有37个蛋白斑点仅在正常同窝配对小鼠中表达。部分蛋白在两组小鼠脑组织中含量也发生明显变化。结论急性弓形虫感染小鼠脑蛋白质有明显改变,为研究弓形虫感染致脑组织损害及筛选治疗新药提供了有益的线索。

华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶两种表达方式的比较

目的比较原核和真核2种表达系统重组表达华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶方法的优劣和目的产物的血清免疫学检测效果。方法根据已知的华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶序列分别设计引物扩增目的基因,与相应的表达载体相连分别构建原核表达质粒pET28a CP和真核表达质粒pPIC9K CP,双酶切及测序鉴定后,将正确的重组质粒分别转入大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)和毕赤酵母GS115中诱导表达、纯化;将获得的纯化蛋白采用ELISA方法检测华支睾吸虫病人血清和正常人血清,比较诊断效果。结果原核表达系统表达的华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶以包涵体形式存在,表达量为6.84mg/L;真核表达系统表达量达到65.00 mg/L,且为可溶性蛋白;两者检测华支睾吸虫病的敏感性分别为95.00%(57/60)和93.30%(56/60),特异性分别为91.67%(77/84)和94.10%(79/84),差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论真核表达华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶较原核表达系统具有更高的应用价值。