RNA干扰技术在寄生虫作用机制及抗药性研究中的应用

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是普遍存在于植物、真菌以及动物等真核生物中的一种自身防御反应,可以在线虫和植物体内传播[1]。自从1998年Fire和Mello[2]描述了秀丽隐杆线虫的RNAi现象至今,RNAi技术已经得到了突飞猛进的发展,为我们提供了应用反向遗传学来探索基因功能的方法[3]。人类生存环境中的医学原虫、医学蠕虫等寄生虫对人和动物的生命与健康产生了极大的威胁。由于缺乏相应的疫苗,

氯硝柳胺悬浮剂杀灭日本血吸虫尾蚴的实验研究

目的观察25％氯硝柳胺悬浮剂对日本血吸虫尾蚴的杀灭效果,确定杀蚴有效剂量,为氯硝柳胺悬浮剂现场灭蚴提供依据。方法杀蚴实验:用25％氯硝柳胺悬浮剂配制氯硝柳胺基质浓度分别为10、5、1、0．5、0．1、0．05、0．01 mg／L溶液,每个浓度组分别取药液0．3 ml置于48孔培养板中,后加入活尾蚴20-50条,解剖镜下观察尾蚴的存活。小鼠感染实验:将200条活尾蚴移入到30 ml的水体中用微型喷雾器均匀喷洒不同浓度氯硝柳胺溶液1 000、100、10、1、0．1、0．01 mg／L于水体表面,喷洒量为药液在水体扩散后整个水体中的终浓度分别为11．6、1．16、0．116、 1．16×10-2、1．16×10-3、1．16×10-4mg／L。喷药后10 min采用浸尾法感染小鼠30 min,小鼠感染 35 d后解剖,观察鼠的虫负荷。结果尾蚴在浓度为10 mg／L和5 mg／L溶液中1 min、1 mg／L和 0．5 mg／L中2 min及0．1 mg／L溶液中30 min死亡率均为100％;在0．05 mg／L和0．01 mg／L溶液中60 min,未见尾蚴死亡。小鼠感染实验显示,经1 000、100、10、1、0．1 mg／L溶液作水面喷洒后,小鼠感染虫负荷显著低于对照组。结论氯硝柳胺杀蚴的有效浓度为0．1 mg／L,随有效浓度的降低,其杀蚴效果逐渐减弱,<0．1 mg／L时,对尾蚴无杀灭作用;用浓度>0．1 mg／L氯硝柳胺悬浮剂对水体表面进行喷洒可起到水体表面灭蚴的作用。

日本血吸虫病诊断分子B细胞表位的预测与鉴定

目的 应用生物信息学技术对日本血吸虫病常用诊断分子进行B细胞表位的预测，筛选出具有潜在诊断价值的表位分子，采用基因工程方法制备目的表位的融合蛋白并进行抗原性鉴定。方法 将日本血吸虫膜蛋白22kDa（Sj22）、膜蛋白23kDa（Sj23）、信号蛋白14—3—3（Sj14—3—3）、谷胱甘肽S转移酶（Sj26）分子的全基因序列输入BioSun软件的工作区，经多参数比较筛选可能的B细胞表位，克隆、表达预测表位，用表达的融合蛋白作为抗原与血吸虫病人血清反应，以筛选和鉴定具有抗原性的表位。结果 经预测分析，Sj22的B细胞表位可能在56～62位和127～133位氨基酸区域，Sj23的B细胞表位可能在149～156位和160～167位氨基酸区域，Sj14—3—3的B细胞表位可能在118～225位和130～137位氨基酸区域，Sj26的B细胞表位可能在143～149位和191～197位氨基酸区域。克隆、表达并纯化这8个表位的融合蛋白，经SDS—PAGE和Western blot检测抗原性，筛选出分别来自于Sj22、Sj14-3-3、Sj26的3条具有较强抗原性的表位片段。结论 生物信息学技术结合分子生物学方法可用于筛选具有潜在诊断价值的表位。

嗜人按蚊溴氰菊酯抗性分子机理研究 Ⅰ 嗜人按蚊CYP6基因cDNA片段的克隆与序列分析

目的获得嗜人按蚊CYP6基因家族成员的cDNA片断。方法采用简并引物对嗜人按蚊溴氰菊酯敏感和抗性品系总RNA进行RT-PCR扩增,得到的特异性片断采用T/A克隆法克隆并进行序列测定和分析。结果敏感品系和抗性品系中均扩增得到250bp左右的片断。进行克隆测序,得到10个CYP6新基因,2个来自敏感品系,8个来自抗性品系,被GenBank收录(登录号AY273927～AY273936)。递交国际细胞色素P450命名委员会,被鉴定为是细胞色素P450超家族中CYP6家族的7个新基因及其3个等位基因,分别属于CYP6Z、CYP6P、CYP6N和CYP6M等4个亚家族。结论得到的10个cDNA新序列为CYP6家族新成员的基因片断。

嗜人按蚊溴氰菊酯抗性分子机理研究 Ⅲ 嗜人按蚊P450基因mRNA荧光半定量RT-PCR分析

目的探讨嗜人按蚊CYP6、CYP4基因与溴氰菊酯抗性的关系。方法采用荧光定量 RT-PCR方法,对嗜人按蚊体内CYP6和CYP4基因的mRNA进行半定量检测分析。结果嗜人按蚊抗性品系中CYP6基因mRNA的含量约为敏感品系的1．39倍。抗性品系中CYP4基因mRNA 的含量约为敏感品系的3．63倍。结论嗜人按蚊抗性品系体内的CYP6和CYP4的mRNA量高于其敏感品系,提示嗜人按蚊溴氰菊酯产生抗性机理可能与其细胞色素P450表达量增高有关。

嗜人按蚊溴氰菊酯抗性分子机理研究Ⅱ嗜人按蚊CYP4基因cDNA片段的克隆与序列分析

目的 获得嗜人按蚊CYP4基因家族成员的c DNA片段。方法 采用简并引物对嗜人按蚊溴氰菊酯敏感和抗性品系总RNA进行RT- PCR扩增,得到的特异性片段采用T/ A克隆法克隆并进行序列测定和分析。结果 敏感品系和抗性品系嗜人按蚊均能扩增得到4 5 0 bp和5 30 bp左右的2个片段。经克隆测序后,得到6个基因序列,其中4个来自敏感品系,2个来自抗性品系。其中1个来自敏感品系的序列和1个来自抗性品系的序列完全相同。所得的5个不同基因序列已被Gen Bank收录(登录号:AY2 0 814 1～AY2 0 814 5 ) ,并递交国际细胞色素P4 5 0命名委员会,经鉴定确认均为细胞色素P4 5 0超家族中的CYP4家族成员,其中4个为新基因,另1个为等位基因,分别属于CYP4家族的CYP4 C、CYP4 H和CYP4 J3个亚家族。结论 得到的5个c DNA新序列为CYP4家族新成员的基因片段。

江苏省基层卫生工作人员肠道寄生虫病防治技术培训效果分析

目的评估肠道寄生虫病防治技术培训对于提高江苏省基层卫生工作人员寄生虫病检测技术水平的效果。方法采用理论授课和实践操作相结合方式进行培训，培训结束后分别对理论和镜检两部分进行考核，其中镜检考核每人阅读10张改良厚加藤片，每张限时5min，总共100分，60分及格。应用SAS9．0软件对考核结果进行秩和分析。结果共有13个市162名基层寄生虫病防治工作人员参加了培训，无学员缺考。理论考核最高分为99分，最低分60分，平均为86．28分；理论考核成绩女性学员高于男性，30～40年龄组高于其他年龄组，苏北地区优于苏南和苏中地区，不同地区间理论考核成绩差异有统计学意义（P〈0．05）。镜检考核最高分为100分，最低分为20分，平均为73．40分；9种虫卵中5种虫卵的检出率〉60．00％；其中鞭虫卵检出率最高，为88．17％，带绦虫卵最低，为14．72％。南京市平均总成绩最高，为181．32分；常州市最低，为138．27分；不同地区间总成绩差异有统计学意义（P〈0．05）。结论江苏省不同地区基层卫生工作人员对肠道寄生虫病防治技术的了解程度存在差异，肠道寄生虫病防治技术培训在一定程度上提高了基层卫生工作人员对肠道寄生虫病的病原学检测水平。

2014年江苏省疟疾疫情流行病学分析

目的掌握2014年江苏省疟疾疫情及流行特征,为制订和调整适合本省的消除疟疾策略和措施提供依据。方法对2014年全省网络报告疟疾疫情和专报系统的流行病学调查资料进行统计分析。结果 2014年江苏省共报告疟疾355例,较2013年(341例)上升4.11%,发病率为0.046/万。355例均为国外输入性病例,4例(1.13%)来自东南亚,351例(98.87%)来自21个非洲国家或地区。全省13个市均有疟疾病例报告,其中淮安市(56例)、南通市(46例)、连云港市(42例)、扬州市(41例)和泰州市(40例)报告病例数占全省总数的63.38%(225/355)。省疟疾诊断参比实验室对355份样本进行复核,发现恶性疟292例、间日疟4例、三日疟10例、卵形疟46例,混合感染3例。病例追踪观察发现,355例疟疾病例中有6例恶性疟出现了再燃,有4例卵形疟和1例间日疟出现了复发。结论江苏省已连续3年无本地感染疟疾病例,初步实现消除疟疾目标,但境外输入性疟疾病例仍较多,且感染虫种呈多样性,加强境外输入性疟疾监测、提高各级医疗机构相关人员对疟疾的诊断和治疗能力、针对性地开展重点人群健康教育,是本省疟疾防控工作的重点。

江苏省疟疾流行与控制

目的分析总结50多年来江苏省疟疾流行特点和防治措施,评价防治效果,探讨适合当前流行特点的防治策略和措施。方法收集1951～2008年江苏省疟疾发病情况、控制措施及防治效果等资料,分析评价不同阶段疟疾流行特点和防治措施实施效果。结果根据因地制宜、分类指导、突出重点的防治原则,在2次大暴发时,采取以控制传染源为主的综合措施;在实现基本消灭阶段,嗜人按蚊地区采取以防蚊灭蚊为主的综合措施,其他地区实施以加强传染源检测和早期治疗为主的综合防治措施;在巩固监测阶段,采取疟疾监测为主的综合措施,包括传染源检测和疫情报告、传染源管理、疫情和蚊情监测、流动人口疟疾管理等。疟疾年发病率由1960年的2 495/万降至2008年的0.09/万,且已连续2年全省以县(市、区)为单位年发病率控制在1/万以下。表明在不同阶段采取的防治措施可行而有效。结论江苏省疟疾流行已得到有效控制,但要达到消除目标,还需进一步提高疟疾病例早期诊断和规范治疗能力;加强健康教育和健康促进;加强流动人口的疟疾监测与管理。

江苏省疟疾疫情预警系统的建立Ⅳ 2013年江苏省消除疟疾关键措施实施情况分析

目的对2013年江苏省消除疟疾关键措施落实情况进行分析,以进一步推动消除疟疾阶段江苏省疟疾防控工作的进程。方法收集网络直报系统中江苏省各级医疗机构和疾病预防控制机构报告的病例信息,收集寄生虫病专报系统中的疟疾病例流行病学个案调查和疫点调查与处置信息,对其中有关病例确诊、网络直报、流行病学个案调查以及疫点调查与处置完成时间的信息进行统计分析。结果 2013年江苏省网络直报疟疾病例341例,均为实验室确诊病例,除1例为输血感染外,其余均为境外输入性疟疾病例;全部疟疾病例均于发现后24 h内进行了网络直报,并于网络直报后3 d和7 d内分别开展了流行病学个案调查和疫点调查与处置,执行率均达100%;所有病例中,网络直报后2 d内完成流行病学个案调查的有334例,执行率为97.95%;网络直报后5 d内完成疫点调查与处置的有319例,执行率为93.55%。结论 2013年江苏省消除疟疾"1-3-7定点清除"工作模式执行率均达到了100%,全省连续2年无本地感染疟疾病例报告,消除疟疾工作初见成效。今后应加强个案调查和疫点调查与处置工作的检查和督导。

江苏省血吸虫病监测预警系统的研究 Ⅳ氯硝柳胺悬浮剂水面喷洒杀灭日本血吸虫尾蚴方法的建立

目的探索氯硝柳胺悬浮剂水面喷洒杀灭日本血吸虫尾蚴的效果、优化条件及对鱼类的影响,建立快速杀灭血吸虫尾蚴、消除水体感染性的应急处置技术。方法将25%氯硝柳胺悬浮剂配制成浓度为1 000.0、100.0、10.0、1.0mg/L和0.1 mg/L溶液,分别取3.5 ml对含有日本血吸虫尾蚴的水体作水面喷洒。在喷洒后即刻(0 min)、10 min和30min,分别用小鼠法测定水体的感染性。将氯硝柳胺悬浮剂配制成100 mg/L溶液,按0.01、0.02、0.03 g/m2和0.04 g/m2用量,对水深为10、20、30 cm和40 cm含尾蚴的水体作水面喷洒,喷后30 min和60 min,采用小鼠法测定水体感染性。将斑马鱼放入待检静态水体中,以100.0 mg/L氯硝柳胺悬浮剂溶液,按0.01、0.02、0.03 g/m2和0.04 g/m2用量对水体作水面喷洒,喷洒后即刻(0 min)、10、30 min和60 min分别在距离水面0、10、20、30 cm和40 cm处取样,用高效液相色谱法测定水体中氯硝柳胺浓度;并在喷药后96 h内连续观察水中斑马鱼的死亡情况。结果用1000.0、100.0、10.0、1.0 mg/L和0.1 mg/L氯硝柳胺悬浮剂溶液水面喷洒后即刻(0 min)、10 min和30 min,水体感染性均显著下降,其中1 000.0 mg/L和100.0 mg/L组喷后30 min,水体即无血吸虫感染性。用100.0 mg/L氯硝柳胺悬浮剂药液,按0.01、0.02、0.03 g/m2和0.04 g/m2用量水面喷洒后30 min,水体感染性显著降低,60 min后即可消除水体感染性。以100.0 mg/L氯硝柳氨悬浮剂溶液对静态水体表面喷洒,即刻(0 min)表面浓度最高;10 min后可扩散到水深10 cm处;30 min后即可扩散至整个水体,且呈均匀分布。用100 mg/L氯硝柳胺悬浮剂溶液,按水面0.02 g/m2用量对体积为(3.14×202×50)cm3水体作水面喷洒后96 h内,斑马鱼死亡率为0。结论以25%氯硝柳胺悬浮剂配制成100.0 mg/L溶液,按0.02g/m2用量对日本血吸虫疫水进行水面喷洒,30～60 min后即可消除水体感染性,且对鱼类无明显毒性作用。该灭蚴法作为一种消除水体血吸虫感染性的疫水应急处置技术,可在监测预警阳性点推荐应用。

江苏省疟疾疫情预警系统的建立Ⅴ输入性恶性疟防控体系的构建

目的构建输入性恶性疟防控体系,为其防控提供全新的科学依据。方法建立劳务输出单位数据库和劳务输出人员数据库,并对劳务输出人员开展健康教育;建立"1-3-7"工作模式、疟疾疫情周报制度及输入性疟疾患者同行人员协查制度。结果至2013年底,全省各级疾控中心掌握劳务输出公司405家,初步建立了江苏省劳务输出单位数据库;患者发病至就诊的平均时间缩短至3.07 d;输入性恶性疟病例初诊至确诊的平均时间缩减至1.57 d;实验室确诊率提高到100%,与2009年实验室确诊率间差异有统计学意义(χ2=36.35,P<0.05);输入性恶性疟重症病例比例下降至3.15%,与2011年重症病例比例间差异有统计学意义(χ2=301.16,P<0.05);2013年全省无疟疾死亡病例报告。结论江苏省初步构建了输入性恶性疟防控体系,对境外输入性恶性疟的有效防控发挥了重要作用。

2013年江苏省疟疾疫情流行病学分析

目的掌握江苏省2013年疟疾疫情及流行特征,为制订和调整适合该省的消除疟疾策略和措施提供依据。方法对2013年全省网络报告疟疾疫情和专报系统的流行病学调查资料进行统计分析。结果 2013年江苏省共报告疟疾341例,较2012年的198例上升72.22%,发病率为0.050/万;除1例为源于输入病例的输血感染外,其余均为境外输入病例。病例主要分布在连云港(占15.84%,54例)、南通(占14.08%,48例)、扬州(占14.08%,48例)、淮安(占11.44%,39例)和盐城(占8.50%,29例)等5市。所有病例均经江苏省参比实验室确诊。其中,恶性疟286例、间日疟8例、三日疟9例、卵形疟30例,混合感染8例。结论江苏省已连续2年无本地感染疟疾病例报告,消除疟疾工作成效显著;但境外感染的输入疟疾病例日益增多,且感染虫种呈多样性。境外输入疟疾仍是该省疟疾防控工作的重点。

2008年江苏省农村改厕无害化处理效果评价

目的调查2008年江苏省无害化卫生厕所建造和使用情况,评价其对粪便处理的卫生学和环境学效果,为指导江苏省农村改厕工作提供科学依据。方法在江苏省无害化卫生厕所普及率<80%的10个县(市、区)的20个改厕村,随机抽取300座已经改造的无害化卫生厕所,现场勘察三格式化粪池的建造是否符合要求。采集无害化卫生厕所进口粪稀、出口粪液样品,实验室检测粪大肠菌群(FC)、寄生虫卵、化学需氧量(COD)、五日生化需氧量(BOD5)和氨氮(AN)等指标。计算进、出口FC的平均合格率,COD、BOD5和AN平均去除率。结果在调查的300座无害化卫生厕所中,构筑物的各项指标均符合要求。600份样品中均未检出寄生虫卵。进、出口FC平均合格率分别为16.00%和97.67%,差异有统计学意义(χ2=407.783,P<0.01),出口COD、BOD5和AN平均去除率分别为63.00%、47.67%和8.67%。结论2008年江苏省农村改厕工作完成情况较好。无害化卫生厕所对粪便中FC有很好的杀灭作用,但对COD、BOD5和AN的去除效果不够理想,需做进一步处理。

血吸虫病网络地理信息系统软件开发及应用

目的利用网络地理信息系统(WebGIS)技术开发江苏省血吸虫病网络地理信息系统。方法在江苏省血吸虫病地理信息系统(GIS)数据库的基础上,利用ESRI公司的ArcIMS软件开发主动式江苏省血吸虫病WebGIS。结果江苏省血吸虫病WebGIS已初步开发完成,并在江苏省血吸虫病防治研究所内部局域网试运行,实现了江苏省血吸虫病管理控制中相关的各类地理数据、属性数据、专业库、资料库数据的统一管理,提供各种查询、显示、分析、统计以及图形输出等功能。结论利用WebGIS技术开发血吸虫病GIS是可行的,为建立江苏省血吸虫病管理决策系统提供了基础。

2015年江苏省疟疾疫情流行病学分析

目的掌握江苏省2015年疟疾疫情及流行特征,为如期实现本省的消除疟疾目标提供依据。方法对2015年全省网络报告疟疾疫情和专报系统的流行病学调查资料进行统计分析。结果 2015年江苏省共报告疟疾405例,较2014年(355例)上升14.08%。均为境外输入病例,5例(1.23%)来自东南亚,400例(98.77%)来自25个非洲国家或地区。全省13个市均有输入性疟疾病例报告,其中泰州市、连云港、南通市、淮安市和扬州市报告病例数占全省总数的68.64%(278/405)。省疟疾诊断参比实验室对405份样本进行复核,发现恶性疟299例、间日疟13例、三日疟18例、卵形疟71例、混合感染4例。结论江苏省已连续4年无本地感染疟疾病例,但境外输入性疟疾病例仍呈上升趋势,且输入性间日疟病例较2014年明显增加。加强境外输入性疟疾监测,提高各级医疗机构相关人员对疟疾的诊断和治疗能力、提升疾控机构专业人员病原复核、疫点调查和处置能力是本省疟疾防控工作的重点。

2012年江苏省疟疾疫情流行病学分析

目的掌握江苏省2012年疟疾疫情及流行特征,为制订和调整适合本省的消除疟疾策略和措施提供依据。方法对2012年全省网络报告疟疾疫情和专报系统的流行病学调查资料进行统计分析。结果 2012年江苏省共报告疟疾198例,较2011年的374例下降了47.06%,发病率为0.026/万,均为国外输入性病例。全省13个市均有疟疾病例报告,其中扬州、南通、南京、泰州、徐州和淮安报告的病例占全省的71.72%(142/198)。省疟疾诊断参比实验室对196份样本进行复核,确定恶性疟164例、间日疟6例、卵形疟22例、三日疟1例、混合感染3例。结论 2012年江苏省首次实现无本地感染疟疾病例,境外输入性疟疾病例数虽明显下降,但病例分布范围进一步扩大,且感染虫种呈多样性。境外输入性疟疾仍是本省疟疾防控工作的重点。

江苏省血吸虫病监测预警关键技术研究与集成示范Ⅰ监测预警示范点布局与效果

目的开展江苏省沿江水域血吸虫病监测预警技术研究与集成示范,为及时发现血吸虫病传播风险并采取有针对性的防控措施提供技术支撑。方法根据江苏省长江流域水系和沿江水域分布等特征,在全省重点区域设立血吸虫病监测预警示范点,开展哨鼠感染监测、人畜活动观察、预警信息发布、风险水域应急处置等技术集成示范,比较示范区内人畜活动方式与哨鼠感染情况,评价示范区血吸虫感染风险信息发布与应急处置流程的可操作性。结果在江苏省沿江5个市23个县(市、区)的渔船民集散地、船闸通江口、码头、农家乐游玩地、渡口、大型工地和南京青年奥运会保障地等环境水域设立50个监测预警示范点。2014年5-9月共进行了5个批次哨鼠监测,哨鼠总回收率为99.06%(4 954/5 001);发现哨鼠感染点1个,查出阳性哨鼠1只,哨鼠总阳性率为0.02%(1/4 933)。现场观察发现接触江水人员2 088人次,其中捕鱼、收种作物和修造船等生产性接触江水占91.95%(1 920/2 088),钓鱼、洗菜、戏水等生活性接触江水占8.05%(168/2 088);以8-9月接触水体人员居多,占49.57%。现场观察到停靠船只859条,船民1 877人,其中渔船占68.22%(586/859)、渔民占69.58%(1 306/1 877)。共在4个点观察到放养羊32只,其中在哨鼠感染点发现有散放羊3只。全省共发布了4次蓝色预警(接触疫水)和1次橙色预警(哨鼠阳性),发布预警地图1幅,其中显示有5个为捕鱼点、1个为羊散放点;启动应急响应机制1次;完成高危环境药物灭螺10 hm2;对120只散放羊实施集中圈养处理;对35名捕鱼人员发放宣传材料并开展查病和预防性治疗等措施。哨鼠阳性区域内未发生血吸虫急性感染。结论哨鼠感染监测、人畜活动观察、预警信息发布和风险水域应急处置等技术的集成示范为开展大流域血吸虫病监测预警提供了有效方法。

血吸虫对吡喹酮抗药性的研究 Ⅺ日本血吸虫中国大陆现场分离株虫卵毛蚴尾蚴对吡喹酮的敏感性

目的测定日本血吸虫中国大陆主要流行区现场分离株虫卵、毛蚴和尾蚴阶段对吡喹酮的敏感性,为建立日本血吸虫吡喹酮敏感性检测技术提供基础。方法分别从中国湖南、湖北、江西、安徽、江苏和云南6省日本血吸虫病流行区病人粪便标本中分离虫卵,建立日本血吸虫现场分离虫株;采用实验室已有的3株曼氏血吸虫株为对照。将各虫株虫卵分别孵育于5×10-6、10-6、5×10-7、10-7mol/L吡喹酮溶液中24h后移至清水孵化,观察虫卵的孵化率。将各虫株毛蚴分别暴露于5×10-6、10-6、5×10-7、10-7mol/L吡喹酮溶液中,0、1、5min后观察比较毛蚴的运动及形态学变化。将各虫株尾蚴分别暴露于10-5、6×10-7、4×10-7、10-7mol/L吡喹酮溶液中,0、20、40、60、80、100min后,解剖镜下观察尾蚴的泳动、收缩和断尾率的变化。并将结果与曼氏血吸虫株进行比较。结果经10-6,5×10-7、10-7mol/L吡喹酮溶液中24h后,日本血吸虫虫卵的孵化率分别为0.52%、11.90%和49.15%,曼氏血吸虫分别为4.17%、31.37%和92.53%。当暴露于10-6mol/L吡喹酮1min后,日本血吸虫毛蚴的变形率为100.00%,曼氏血吸虫为55.73%;当分别暴露于5×10-7、10-7mol/L吡喹酮5min后,日本血吸虫毛蚴的变形率为96.82%和21.80%,曼氏血吸虫毛蚴为21.80%和0。当暴露于10-5mol/L吡喹酮中40min,日本血吸虫尾蚴的断尾率为96.75%,曼氏血吸虫为28.30%;暴露于4×10-7mol/L吡喹酮中100min,日本血吸虫尾蚴的断尾率为95.82%,曼氏血吸虫为11.40%;当暴露于10-7mol/L吡喹酮中80min,日本血吸虫尾蚴的断尾率为29.65%,曼氏血吸虫尾蚴为0。结论日本血吸虫各现场分离株间在虫卵、毛蚴和尾蚴阶段对吡喹酮的敏感性无明显差异,但均明显高于曼氏血吸虫。研究提示,将毛蚴移入5×10-7mol/L吡喹酮溶液中1min,镜下观察其变形率,可作为日本血吸虫对吡喹酮敏感性的观察指标,可用于现场判断病人化疗失败的原因是否是由于吡喹酮不敏感株产生所引起。将尾蚴移入4×10-7mol/L吡喹酮溶液中80～100min,镜下观察其断尾率,可用于螺体内虫株吡喹酮敏感性监测。