转人溶菌酶基因小鼠乳腺生物反应器的建立

目的研究人溶菌酶(humanlysozyme,hLYZ)动物乳腺生物反应器制备的可行性。方法将hLYZ基因与动物乳腺特异表达载体p205C3连接,所得重组载体p205C3-hLYZ用显微注射法建立转基因小鼠。结果共出生了136只F0代小鼠,PCR和Southern杂交检测基因整合阳性率分别为5·15%(2♀5♂)和2.94%(1♀3♂)。Western印迹检测结果表明,分泌在小鼠乳汁中的表达产物与正常hLYZ具有相同的分子量。目前转基因小鼠已经繁殖到F7代,每一代基因整合阳性母鼠的乳腺均表达hLYZ,乳汁中的表达量最高达750mg/L。斑点杂交试验证明,表达有较强的组织特异性,除在乳腺表达外,仅在脾脏和小肠有一定的异位表达。结论成功建立了hLYZ小鼠乳腺生物反应器。