腺苷抑制 GSK-3β活性对大鼠急危重症胰腺炎肠屏障功能障碍的影响

目的:研究腺苷对大鼠急危重症胰腺炎(SAP)肠屏障功能障碍(IBD)的保护途径。方法:将64只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组8只、SAP组40只(分为0、3、6、12、24 h不同时间点处理组,每组8只)、腺苷处理组(Ade-Ⅳ组)8只、线粒体膜通透性转移孔(mPTP)抑制剂环孢素A(CsA)组8只。大鼠SAP造模完成后,血清胰淀粉酶升高及镜下胰腺组织病理学改变提示造模成功,HE染色观察大鼠小肠组织损伤情况,Western blotting法检测大鼠小肠组织P-GSK-3β表达水平,应用电镜观察小肠线粒体超微结构的变化,采用差速离心法分离线粒体,并在Ca^(2+)诱导下完成线粒体肿胀实验。结果:大鼠SAP造模成功后,SAP组40只大鼠血清胰腺淀粉酶水平随着0~12 h时间点的延长逐渐升高,且12 h达到高峰,24 h下降至最低点,差异均有统计学意义(P<0.01);切片染色观察,SAP组小肠黏膜充血、水肿,并伴有柱状上皮细胞坏死,甚至出现部分绒毛的断裂、缺损,而Ade-Ⅳ组肠黏膜上皮及绒毛形态基本完整,绒毛排列基本整齐;P-GSK-3β的表达,Ade-Ⅳ组较SAP组显著增加(P<0.01);小肠线粒体超微结构在SAP组肿胀明显,还出现了空泡变性,而Ade-Ⅳ组肿胀程度减轻,空泡变性减少;线粒体肿胀实验发现520 nm处线粒体吸光度值CsA组<Ade-Ⅳ组<SAP组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:腺苷对SAP并发的IBD有保护作用,其机制可能与抑制GSK-3β活性,进而阻止mPTP的开放有关。