TRP通道在炎症性皮肤病中的作用

瞬时受体电位(TRP)通道是一类非特异性阳离子通道蛋白家族,在皮肤感觉神经元和非神经元细胞中广泛表达,能被多种刺激激活,参与炎症性皮肤病的发生发展。本文重点对TRP通道的不同亚型在玫瑰痤疮、特应性皮炎、银屑病、接触性皮炎等炎症性皮肤病中的作用进行综述,提示TRP通道有望成为炎症性皮肤病的潜在治疗靶点。

铒激光在美容皮肤科的临床应用与进展

近年来,光电技术在美容皮肤科的应用获得巨大进步,2940 nm铒激光是应用最广泛的激光之一,在治疗良性增生性皮肤病、瘢痕、色素性皮肤病、实现皮肤年轻化等多种临床场景中发挥作用。本文就2940 nm铒激光在美容皮肤科的临床应用与进展进行综述。

长链非编码RNA在皮肤纤维化疾病中的研究进展

皮肤纤维化疾病包括增生性瘢痕、瘢痕疙瘩和系统性硬化症。该类疾病以肌成纤维细胞过度激活和胶原纤维异常沉积为特征,可导致永久性瘢痕和器官功能损伤,是一大类严重影响患者身心健康并带来沉重社会经济负担的疾病,然而目前无满意的治疗方法和预防策略。近年来,随着高通量测序和生物信息技术的发展,逐年增多的证据表明长链非编码RNA(Long noncoding RNAs,lncRNAs)作为一类重要的表观遗传调控分子,可通过多种方式影响成纤维细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及胶原蛋白的异常沉积,进而参与皮肤纤维化疾病的发病过程。本文将论述lncRNAs在皮肤纤维化疾病发病机制中的研究进展。

痤疮丙酸杆菌生物膜诱导角质形成细胞发生炎症反应的分子机制研究

目的探讨痤疮丙酸杆菌生物膜诱导人原代角质形成细胞发生炎症反应的分子机制。方法体外构建痤疮丙酸杆菌生物膜模型,激光共聚焦显微镜观察其三维立体结构。将培养的人原代角质形成细胞分成3组:二甲基亚砜(DMSO)对照组(仅加入0.01%DMSO)、痤疮丙酸杆菌悬浮菌组(加入痤疮丙酸杆菌悬浮菌,简称悬浮菌组)、痤疮丙酸杆菌生物膜悬液组(加入痤疮丙酸杆菌生物膜悬液,简称生物膜悬液组)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测孵育6 h后各组白细胞介素6(IL-6)、IL-8以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA相对表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测孵育24 h后各组IL-6、IL-8及TNF-α游离蛋白水平,Western印迹法检测角质形成细胞Toll样受体2(TLR2)蛋白表达水平。进一步用TLR2/丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)/核因子κB(NF-κB)信号通路关键分子的阻断剂(C29、ST2825、BAY11-7082、SB203580、U0126-EtOH)联合痤疮丙酸杆菌生物膜悬液作用于人原代角质形成细胞,同时设DMSO对照组和痤疮丙酸杆菌生物膜悬液阳性对照组,然后检测IL-6、IL-8及TNF-αmRNA和游离蛋白表达水平。多组间比较采用单因素方差分析,两两多重比较采用Bonferroni法。结果激光共聚焦显微镜下,痤疮丙酸杆菌生物膜形成草坪般的三维立体结构,生物膜生长状态良好。RT-qPCR及ELISA显示,生物膜悬液组、悬浮菌组、DMSO对照组炎症因子IL-6、IL-8、TNF-αmRNA及游离蛋白表达水平差异均有统计学意义(mRNA:F=89.70、312.17、46.09,均P<0.001;游离蛋白:F=886.12、634.25、307.01,均P<0.001);生物膜悬液组IL-6、IL-8、TNF-αmRNA及游离蛋白表达均显著高于悬浮菌组和DMSO对照组(均P<0.001);悬浮菌组IL-6 mRNA表达及TNF-α游离蛋白表达均显著高于DMSO对照组(P<0.001、=0.003),但IL-6游离蛋白、TNF-αmRNA、IL-8 mRNA及游离蛋白表达与DMSO对照组相比差异无统计学意义(均P>0.05)。Western印迹结果显示,生物膜悬液组和悬浮菌组TLR2蛋白表达均明显高于DMSO对照组。经不同MAPK/NF-κB通路抑制剂预处理及痤疮丙酸杆菌生物膜悬液共孵育,C29组、ST2825组、BAY11-7082组、SB203580组、U0126-EtOH组及DMSO对照组IL-6、IL-8、TNF-αmRNA及游离蛋白表达水平均显著低于生物膜悬液组(均P<0.05)。结论痤疮丙酸杆菌生物膜诱导人角质形成细胞发生炎症反应能力较强,可能通过激活TLR2/MAPK/NF-κB信号通路实现。

皮肤光老化小鼠模型的构建

目的:构建昆明鼠皮肤光老化小鼠模型。方法:采用模拟日光组分的紫外线照射昆明小鼠,初始照射剂量为最小红斑量,剂量周递增。然后进行照射组和对照组小鼠皮肤大体形态参数和组织学特征比较,进而从分子水平比较丙二醛产物水平和p53表达水平。结果:照射小鼠皮肤厚度为0.0507±0.0082 cm较对照小鼠皮肤0.0397±0.0063 cm厚(P<0.05);照射组皮肤皱纹评分较对照组增高(P<0.05);组织学特征分析发现照射组小鼠皮肤出现显著的胶原纤维和弹力纤维光老化组织学特征。照射组小鼠皮肤丙二醛水平和p53表达显著升高。结论:皮肤光老化小鼠模型的建立为皮肤光老化的研究提供了可用的模型。

单细胞转录组测序技术在伤口愈合中的研究进展

伤口愈合是皮肤受伤或感染后修复皮肤屏障的一个复杂生物学过程。伤口愈合不良会导致机体的功能障碍,严重影响患者的生活质量,同时显著增加了患者的经济负担。随着高通量测序技术的发展和成熟,单细胞转录组测序技术因其能精细划分细胞亚群、评估细胞异质性、追踪细胞谱系、识别稀有细胞等独特优势已被广泛应用于生物医学领域中。本文主要综述单细胞转录组测序技术在伤口愈合中的研究进展,旨在为伤口愈合的基础和临床研究提供参考。

盐酸二甲双胍外用凝胶处方的筛选和质量标准的建立

目的:以盐酸二甲双胍为主药,凝胶材料等为辅料,筛选外用凝胶制剂的处方,进行制备工艺和质量控制研究。方法:采用单因素筛选法,以盐酸二甲双胍为主药,优选出其凝胶剂的处方组成及配制工艺,采用紫外可见分光光度法测定盐酸二甲双胍的含量。结果:筛选出盐酸二甲双胍外用凝胶处方组成为:主药为2.0%盐酸二甲双胍,辅料组成为2.50%甲基纤维素,5.00%丙二醇,1.00%苯氧乙醇,NaOH溶液适量(0.1 mol·L^(-1))。制备工艺为:取丙二醇、苯氧乙醇溶于适量水中,加入盐酸二甲双胍溶于上述溶液中,再加入甲基纤维素,用NaOH溶液(0.1 mol·L^(-1))调节pH值至4.0~6.0,加水至足量,充分溶胀,搅拌均匀即得。结论:该制剂的处方及制备工艺稳定可靠,质量可控。

臀部皮肤结核一例

临床资料患者,男,48岁。臀部对称性暗红色斑块、丘疹10年余。10余年前患者臀部无明显诱因出现数个绿豆至黄豆大红色丘疹,质硬无明显自觉症状,后逐渐增大互相融合,伴少量脱屑,偶感瘙痒,曾多次在当地医院按“股癣”治疗后无好转,斑块逐渐增大,表面凹凸不平。患者发病以来无咳嗽、咳痰、咯血,无午后潮热、盗汗,无腹痛、腹泻,无体重减轻、乏力等症状。无药物过敏史。既往有肠结核病史,其父有肠结核病史。体检:发育良好,营养中等,心肺检查无异常,腹部平软,肝脾未触及,全身淋巴结未触及肿大。

长链非编码RNA在皮肤癌中的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一组长度超过200个核苷酸的非编码RNA,近年研究发现,lncRNA在细胞的增殖、分化、凋亡以及肿瘤的发展过程中发挥重要作用。本文就皮肤癌发生和发展相关的lncRNA及其发挥作用的机制进行综述。

雷帕霉素对人角质形成细胞系HaCaT细胞自噬诱导效应及其分子机制的初步研究

目的:初步探讨雷帕霉素在不同浓度和不同孵育时间下,对人角质形成细胞系HaCaT细胞自噬的诱导效应及其分子机制。方法:不同浓度雷帕霉素处理HaCaT细胞4 h或12 h后,利用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测雷帕霉素对细胞活力的影响,并提取蛋白进行蛋白印迹实验,检测LC3-Ⅱ表达水平,作为自噬的检测方法;通过透射电镜分析自噬体形成,确认雷帕霉素对自噬的诱导效果。检测自噬调控上游关键元件哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白表达及其se^(2481)和ser^(2448)磷酸化产物水平,分析mTOR活性;并分析自噬调控下游的另一关键基因Atg7的表达,初步分析雷帕霉素诱导HaCaT细胞的分子机制。结果:不同浓度雷帕霉素处理4 h,对HaCaT细胞的活力没有显著的影响。高剂量雷帕霉素(80 nmol/L和100 nmol/L)在处理12 h后对HaCaT细胞的活力产生毒性效应。20 nmol/L和50 nmol/L雷帕霉素孵育4 h诱导HaCaT细胞LC3-Ⅱ表达上调,而20 nmol/L和50 nmol/L雷帕霉素孵育12 h仍具有诱导效应。相较于其他浓度,在50 nmol/L雷帕霉素孵育诱导的LC3-Ⅱ表达上调效应最为显著,并且在药物孵育4h时超微结构水平诱导产生胞质内大量自噬体形成。1~50nmol/L浓度的雷帕霉素孵育4 h或12 h均可诱导HaCaT细胞mTOR ser^(2481)和mTOR ser^(2448)磷酸化产物水平降低:然而Atg7表达不能观测到显著的差异。结论:50 nmol/L雷帕霉素孵育4 h具有显著的诱导HaCaT细胞自噬效应。HaCaT细胞mTOR分子对雷帕霉素处理敏感,可被其诱导产生蛋白活化抑制效应。这种mTOR信号抑制可能参与了雷帕霉素对HaCaT细胞的自噬诱导效应,但Atg7没有参与这种调控效应。

靶向药物伊马替尼治疗隆突性皮肤纤维肉瘤的进展

隆突性皮肤纤维肉瘤(dermatofibrosarcoma protuberan,DFSP)是一种局部侵袭性肉瘤,好发于青年至中年人群。通常发生于躯干及四肢近端,也可发生在头颈部。通常表现为缓慢生长的结节或斑块,治疗首选手术切除,但局部复发率高。然而,由于90%的DFSP患者出现17号及22号染色体异位,产生融合基因血小板衍化生长因子B(platelet-derived growth factor B,PDGEB)与其受体(platelet-derived growth factor receptor-β,PDGFR-β)结合,从而激活下游信号传导通路。这一特点既可作为主要发病机制,也是靶向治疗的理论基础。该文对DFSP发病机制、主要靶向药物伊马替尼治疗及伊马替尼产生的原发和继发耐药后潜在的新靶向药物治疗方法进行综述。

警惕印度毛癣菌感染在中国的流行

近年来,已有多国报道发现印度毛癣菌感染引起难治性复发性皮肤癣菌病,该菌常对特比萘芬或多种抗真菌药耐药。现对印度毛癣菌感染现状进行阐述,旨在引起有关学者和相关部门重视。

氨甲环酸的不良反应及处理

近年来氨甲环酸在皮肤科的应用日益增加,该药以低剂量口服为主,安全性较好,最常见的不良反应是胃肠道不适和月经不规则。但长期系统应用氨甲环酸可导致多种不良反应,如血栓形成、肝肾功能损害、视力缺陷等。因此,长期服用氨甲环酸时需定期监测凝血功能、D-二聚体、肝肾功能等相关指标,争取及时发现并尽快处理药物不良反应,保证用药安全。

四环素类药物诱导的光敏性皮炎发病机制研究进展

四环素类药物是最常见的引起光敏反应的抗菌药物。该文概述了四环素类抗生素引起光敏性皮炎的发病机制,即特定波长的紫外线照射具有酮基和烯醇基共轭双键系统的四环素,引起表皮细胞、黑素细胞的光毒性和光变态反应,从而引起光敏性皮炎。该文旨在提高临床医师对药物光敏性的认识,降低光敏性药疹的发病率。

自身免疫性皮肤病的新药研发进展

自身免疫性皮肤病是由于免疫系统对自身抗原发生免疫反应导致免疫失衡,从而引起皮肤损伤伴有或不伴有其他组织器官损伤的一类疾病。传统免疫抑制剂发挥疗效的同时伴随着广泛的不良反应。对发病机制的深入了解促进了各种基于靶向细胞因子或信号通路药物的研发。这些药物的应用显著改善了患者的病情,但往往需要长期维持治疗,且仍有许多自身免疫性皮肤病缺乏明确的靶标。因此仍需要更多新兴治疗策略和创新药物以重新平衡免疫系统的稳态,诱导疾病的长期缓解,为治疗自身免疫性皮肤病提供新的希望。本研究将根据不同的作用机制及靶点,讨论治疗自身免疫性皮肤病的药物研发进展。

皮肤影像技术在寻常痤疮诊疗中的应用进展

寻常痤疮是一种临床常见的慢性炎症性皮肤疾病。目前的分级及疗效评估方法主要依靠医生的临床经验评价。近年来皮肤影像技术因其无创、实时、客观、可重复等优点在皮肤病的诊治方面得到极大的关注。本文综述多种皮肤影像技术在寻常痤疮研究领域的应用进展,包括皮肤镜、反射式共聚焦显微镜、光学相干断层显像技术、高频超声影像技术等,以期为痤疮的基础研究和临床诊疗的评估方法提供新思路。

不同剂量长波紫外线照射对HaCaT细胞增殖活力和自噬体表达瞬时影响的研究

目的:观察人永生化角质形成细胞系HaCaT细胞接受不同剂量长波紫外线(UVA)照射后细胞增殖活力和自噬体表达水平的变化,并初步评估增殖活力损伤程度和自噬体表达水平之间的相关性。方法:将HaCaT细胞分为6组,分别为10 J/cm^2UVA对照组、10 J/cm^2 UVA照射组、25 J/cm^2 UVA对照组、25 J/cm^2 UVA照射组、50 J/cm^2 UVA对照组及50 J/cm^2 UVA照射组。照射结束后即刻进行噻唑蓝(MTT)实验或单丹(磺)酰戊二胺(MDC)染色,全波长酶标仪下读取各孔A值,倒置荧光显微镜下随机选取视野,计数每视野下自噬体表达阴性细胞和阳性细胞数目。结果:经不同剂量UVA照射后,HaCaT细胞的增殖活力(A值)下降,呈剂量相关性。其中10、25及50 J/cm^2 UVA照射组(A值分别为1.179±0.007、0.791±0.015、0.522±0.046)两两之间以及与各自对照组(1.370±0.007、1.254±0.012、1.177±0.009)间差异均有统计学意义(P均<0.01);10、25及50 J/cm^2 UVA照射后,HaCa T细胞MDC染色结果示自噬体表达阳性的细胞比率增加,且呈剂量相关性。50 J/cm^2 UVA照射组自噬体表达阳性率较其对照组显著上升(χ~2=11,P<0.01)。结论:10~50 J/cm^2 UVA照射后,HaCaT细胞瞬时增殖活力降低及自噬体表达增加,且呈剂量依赖性。

Gateway技术构建人RhoD慢病毒表达载体及转染人黑素瘤A375细胞株

目的构建人RhoD基因的慢病毒载体并进行慢病毒包装和鉴定，转染人黑素瘤细胞A375，使其过表达RhoD蛋白，为后续研究RhoD在黑素瘤中的作用奠定基础。方法Gateway技术构建携带增强型绿色荧光蛋白EGFP的RhoD慢病毒载体，经PCR及基因测序鉴定后，与辅助质粒pLV／helper-SL3，pLV／helper—SIA及pLV／helper—SL5混合采用脂质体法制备DNA-Lipofectamine2000复合物，并共同转染293FT细胞进行慢病毒包装，产生相应慢病毒颗粒，通过定量PCR方法测定病毒滴度。包装好的慢病毒转染人黑素瘤A375细胞，荧光显微镜下观察荧光表达情况，流式细胞仪检测转染效率；实验分为A375（未处理对照组）、A375-EGFP（不含目的基因的空病毒对照组）和A375-RhoD（含RhoD基因的病毒组）三组，采用实时荧光定量PCR（QPCR）及免疫印记法（western blotting，WB）验证耽扣在A375-RhoD组细胞中的过表达。结果通过PCR、基因测序证实，慢病毒表达载体pLV[Exp]-EGFP／Neo—CMV〉hRhoD构建成功。与辅助质粒共转染293FT细胞包装出具高效感染力的慢病毒，经测定病毒滴度为（5．13±2）×10^8TU／mL。转染A375细胞后可见明显的绿色荧光表达，流式检测转染效率大于80％;A375-RhoD组RhoDmRNA及蛋白水平均较A375-EGFP组和A375组细胞中明显增高。结论成功构建RhoD慢病毒表达载体，包装出具高效感染力的慢病毒颗粒并成功转染人黑素瘤A375细胞，为进一步研究RhoD在黑素瘤中的作用提供实验基础。

生殖器丘疹样棘层松解性皮病ATP2C1基因突变检测

目的:检测1例散发性生殖器丘疹样棘层松解性皮病患者ATP2C1基因突变。方法:提取患者、其父母及100名无亲缘关系健康对照的外周血以及患者皮损组织DNA,PCR扩增ATP2C1基因28个外显子和侧翼序列,并进行测序。结果:检测到患者血样及皮损组织DNA均存在ATP2C1基因第1570位碱基发生突变T→C,父母及对照未发现突变。结论:ATP2C1基因17号外显子的突变可能是本患者的发病原因。生殖器丘疹样棘层松解性皮病可能与Hailey病组成一个连续病谱。

β受体阻滞剂治疗婴儿血管瘤的研究进展

婴儿血管瘤是婴儿期最常见的良性肿瘤,临床多见。尽管大多数具有自限性的良性病程,但部分仍有导致严重功能障碍及毁容的风险,需要积极治疗。治疗方法多种多样,传统的治疗方法如糖皮质激素、干扰素、长春新碱、手术、激光等副作用大,并非对所有血管瘤都有效。目前β受体阻滞剂以其安全高效的优点成为一线首选药物。