骨髓增殖性肿瘤患者JAK2V617F基因突变及凝血功能研究

目的探讨骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasm,MPN)患者JAK2V617F基因突变的发生及凝血功能。方法选择69例MPN患者为研究对象,其中真性红细胞增多症(PV)24例,原发性血小板增多症(ET)45例。采用等位基因特异性聚合酶链反应(allele-specific polymerase chain reaction,AS-PCR)技术,检测JAK2V617F基因突变情况。同时检测MPN患者凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(aPTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原浓度(Fbg)、D二聚体(D-D)、血管性血友病因子(vWF)、抗凝血酶(AT),分析其与JAK2V617F基因突变之间的关系。结果 69例MPN患者中JAK2V617F基因突变率为66.6%(46/69),其中PV 20例,阳性率83.3%(20/24);ET 27例,阳性率60.0%(27/45)。MPN患者与正常对照组之间PT、aPTT、TT、D-D存在明显差异(P<0.05),vWF、ATⅢ无明显差异;MPN患者JAK2V617F基因突变阳性组与阴性组之间PT、aPTT、TT、存在明显差异(P<0.05),D-D、vWF、AT均无明显差异。白细胞计数在MPN患者JAK2V617F基因突变阳性组与阴性组之间存在明显差异(P<0.01)。结论 JAK2V617F基因突变在MPN患者中发生率高,可作为MPN诊断、鉴别诊断的重要依据。初诊MPN患者检测JAK2V617F基因突变、白细胞计数、凝血常规可初步评估MPN患者凝血功能,早期预防血栓形成。

强直性脊柱炎活动期患者调节性T细胞表达及与其它指标相关性的研究

目的探讨CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞(Treg)在强直性脊柱炎(AS)活动期患者发病中的作用机制及其与C-反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)的相关性。方法采用流式细胞术分别检测39例AS活动期患者和20例健康对照者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞占CD4+T细胞比例,同时分别检测两组C-反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)的表达水平,并分析AS活动期患者CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞与CRP、ESR的相关性。结果 AS活动组外周血CD4+CD25+CD127low/-Treg与对照组比较明显降低,具有统计学意义(P<0.01)。AS活动组CRP、ESR与对照组比较均明显升高(P>0.05),具有统计学意义(P<0.01)。但AS活动期患者CD4+CD25+CD127low/-Treg表达率与CRP、ESR均未见明显相关性。结论 AS活动期患者CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞数量的减少可能使免疫活性细胞逃避机体对它们的免疫调节,导致体内诱导免疫耐受机能不足,从而促进AS的发生发展。进行CD4+CD25+CD127low/-Treg的检测有助于评估AS活动期患者免疫状态,判断疾病进展,但其与CRP、ESR的相关性尚有待于进一步的研究。

荧光原位杂交技术在套细胞淋巴瘤石蜡切片的应用研究

目的建立淋巴瘤石蜡切片应用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测的操作流程,探讨其在套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)诊断中的应用价值。方法优化石蜡切片FISH检测步骤和实验条件,在16例病理拟诊断MCL的石蜡切片上应用FISH检测IGH/CCND1融合基因。结果确立了本实验室石蜡切片FISH检测的实验方法和条件;拟诊断MCL的病例中IGH/CCND1融合基因阳性检出率为75%(12/16)。结论淋巴瘤石蜡切片FISH检测可满足临床应用要求;应用FISH技术检测IGH/CCND1融合基因有助于MCL的诊断。

再生障碍性贫血患者CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞及T淋巴细胞亚群表达的研究

[目的]探讨再生障碍性贫血（AA）患者CD4＋ CD25＋ CD127low/-调节性T细胞（Treg）和T淋巴细胞亚群的表达及其在疾病发生发展过程中的意义.[方法]采用流式细胞术分别检测本院28例AA患者和20例健康对照组外周血CD4＋ CD25＋ CD1271ow/-Treg的比例以及T淋巴细胞亚群的表达.[结果]AA患者组CD4＋ CD25＋ CD127low/-/CD4＋ Treg为（4.60±2.11）％,健康对照组为（7.50±1.62）％,两组比较差异具有显著性（P＜0.05）.外周血T淋巴细胞亚群的表达AA组为CD3＋ CD4＋/CD3＋ （Th）：（42.47±5.22）％,CD3＋ CD8＋/CD3＋ （Ts）：（47.46±7.06）％,Th/Ts：0.92±0.19,健康对照组分别为CD3＋ CD4＋/ CD3＋（Th）：（53.28±4.92）％,CD3＋ CD8＋/CD3＋ （Ts）：（37.06±6.08）％,Th/Ts：1.52±0.33,两组比较差异均具有显著性（P＜0.01）.[结论]AA患者CD4＋ CD25＋ CD127low/-Treg细胞数量的减少可能使免疫活性细胞逃避机体对它们的免疫调节,导致体内诱导免疫耐受机能不足,从而促进疾病的发生发展.AA患者存在T淋巴细胞亚群的失调,CD4＋T淋巴细胞减低,CD8＋T淋巴细胞增多导致CD4＋/CD8＋比值降低可能是其重要的免疫学发病机制,进行CD4＋ CD25＋ CD127low/-Treg和T淋巴细胞亚群的检测有助于评估AA患者免疫功能状态及辅助诊断和指导治疗.

强直性脊柱炎患者淋巴细胞亚群及活化的研究

[目的] 探讨强直性脊柱炎发生发展过程中免疫机制.[方法]采用流式细胞术simuset软件检测43例AS 患者淋巴细胞亚群表型CD3＋、Th 、Ts、Th/Ts、CD19＋ 、CD16＋56＋56及淋巴细胞活化状态CD25的表达百分率.[结果]与对照组比较,AS组总T细胞（CD3＋）、抑制性T细胞（CD3＋CD8＋T细胞）、总B细胞（CD3-CD19＋）、总NK细胞（CD3-CD16＋56＋）、活化淋巴细胞（CD25＋）均有显著差异;而辅助性T细胞（CD3＋CD4＋T细胞）无明显差异.[结论]强直性脊柱炎患者存在机体内免疫细胞失调,功能紊乱.同时,活化淋巴细胞增多导致免疫功能亢进、淋巴细胞激活。

Livin与恶性肿瘤的研究进展

肿瘤的发生是细胞增殖与凋亡失衡所致。一旦发生凋亡抑制,细胞得以生存和增殖,最终就会导致肿瘤的发生。目前已证实,许多恶性肿瘤的发生发展与细胞凋亡关系密切。Livin是最近发现的凋亡抑制蛋白家族的新成员,通过死亡受体、线粒体等途径参与细胞凋亡的调节。Livin在许多肿瘤组织高表达,且在肿瘤的发生、发展和复发耐药中发挥重要作用,减少其表达为抗肿瘤治疗提供一条新途径。

强直性脊柱炎患者CD25和Survivin表达的相关性研究

目的通过对强直性脊柱炎（AS）患者T细胞活化的研究以初步探讨凋亡途径survivin在其发病过程中的机制，并揭示其由于T细胞活化而引起的免疫状态的改变.方法以流式细胞术研究初诊AS患者33例和20例正常对照组样本，分析survivin和CD25在两组之间的差异.结果AS患者淋巴细胞CD25表达为（12．87±5．53）%，而正常对照组CD25表达为（2．11±0．47）%，两者比较P〈0．05，差异有统计学显著性意义.同时AS患者淋巴细胞survivin表达为（3．49±2．38）%，而正常对照组为（0．93±0．65）%，两者比较P〈0．05，差异有统计学显著性意义.结论AS患者淋巴细胞CD25和survivin表达较正常对照组明显增高，表明AS患者淋巴细胞处于高度活化状态，活化的T细胞在AS的病理损伤中起重要作用，可能导致其免疫机能的紊乱.通过AS患者T细胞活化CD25和survivin表达的研究，初步揭示淋巴细胞活化和survivin在AS发病中的机制，为在AS应用抗淋巴细胞凋亡等免疫治疗提供了实验依据.

白血病患者炎症因子、VEGF表达与易栓状态关系的研究

目的了解白血病患者表达炎症因子IL-6、IL-8、IL-10与VEGF的水平与意义。方法以ELISA方法观察30例正常人和47例白血病患者血清IL-6、IL-8、IL-10、VEGF水平。结果初治患者血清IL-6、IL-8、IL-10、VEGF水平均明显高于对照组(P<0.05)。部分缓解组IL-6、IL-8、IL-10、VEGF较治疗前明显降低(P<0.05),但仍高于对照组。完全缓解时渐趋正常。结论炎症因子与VEGF在白血病不同病期变化,除了肿瘤性病因所致,也与肿瘤性血管内皮损伤有关,导致肿瘤性易栓状态。这些因子可作为观察白血病患者合并高凝状态观察指标。

荧光原位杂交技术在慢性淋巴细胞白血病检测中的应用评估

本研究探讨与评估应用间期荧光原位杂交技术(FISH)检测慢性淋巴细胞白血病(CLL)遗传学异常的价值。应用间期FISH技术检测32例初诊CLL患者的del(13q14.3)、del(11q22.3)、del(17p13.1)、del(13q14)和12号染色体三体,同时对免疫表型不典型的10例初诊患者检测IGH/CCND1融合基因。结果表明,在32例病例组中FISH检测出26例(81.3%)基因异常,包括D13S25缺失14例,RB1缺失11例,12号染色体三体9例,P53缺失6例,ATM缺失4例;涉及1种基因异常的12例,其中12号染色体三体7例,D13S25缺失3例,P53缺失1例,ATM缺失1例;涉及2种基因异常的11例,其中D13S25/RB1缺失的7例,另4例均包含P53缺失;涉及3种以上基因异常的病例3例;10例免疫表型表达CD5+CD23-的初诊患者中2例IGH/CCND1(+)。结论:应用间期FISH技术检测CLL基因组的异常,可大大提高异常染色体的检出率,各基因异常有其不同的特点;IGH/CCND1融合基因的检测在CLL诊断中有重要意义。

270例全血细胞减少患者骨髓形态学及外周血检查结果分析

目的通过骨髓涂片、骨髓活检及外周血检查结果对全血细胞减少性疾病的病因及疾病特点进行探讨。方法对270例初诊全血细胞减少患者同步进行骨髓穿刺涂片及骨髓活检取材,染色后行骨髓形态学检查,并结合其血常规检查结果进行分析。结果 270例全血细胞减少患者中,血液系1统疾病占67.4%,其中以急性白血病最为常见,其次为再生障碍性贫血及骨髓增生异常综合征。骨髓涂片联合骨髓活组织检查能够提高全血细胞减少患者的确诊率。与非血液系统疾病相比,血液系统疾病患者的贫血症状更为严重。结论全血细胞减少性疾病范围广泛,病因复杂,多为血液系统疾病引起。骨髓涂片与骨髓活组织检查相结合,能客观准确地反映骨髓的真实情况.相比单一的骨髓涂片,更能够提高疾病诊断的准确性。

小剂量美罗华联合冰冻血浆治疗免疫性血小板减少症

目的探讨小剂量美罗华联合冰冻血浆治疗免疫性血小板减少症(ITP)的疗效与作用。方法选择2009年6月至11月我院诊断ITP住院患者8例,给予美罗华100 mg.iv.qw×4次,使用前给予冰冻血浆200 ml输注,同服美卓乐24 mg/d,治疗前后检测CD 20表达、血小板数及网织血小板变化。结果3例患者获CR,4例获MR,总反应率87.5%,无不良反应发生。结论小剂量美罗华联合冰冻血浆能有效治疗免疫性血小板减少症。

草酸钾添加量对卷烟纸热解性能及主流烟气的影响

通过在卷烟纸上添加不同量的草酸钾,采用常规烟气分析、同步热分析,研究其对卷烟纸热解性能及主流烟气的影响.结果表明：在卷烟纸上添加草酸钾后对卷烟主流烟气中的焦油和CO有一定的降低作用,随着添加量的继续增加,抽吸口数、CO和焦油释放量均呈先下降后缓慢上升趋势;在草酸钾添加量为1.5%时,其降焦及降CO效率最高;随着草酸钾添加量的增加,卷烟纸热解起始温度降低,在200～300℃时反应活化能降低.

扬州市两社区55岁以上人群生活习惯与脑卒中情况分析

目的了解扬州市城市社区中55岁以上中老年人脑卒中的患病情况,调研中老年人生活习惯与脑卒中的发病趋势相关性,并以社区为基点对影响脑卒中的相关因素,提出促进健康的建议和措施。方法采取横断面研究方法,对扬州市两个城市人口较为集中的社区共701位55岁以上中老年人进行问卷调查,对相应调查结果进行健康状况及影响脑卒中发病发展相关因素分析。结果两社区55岁以上中老年人有一定比例的脑卒中发病率,分别为3%和5%,其生活习惯、基础疾病、身体健康状况等因素均参与和影响脑卒中的发病与发展。结论制定防范中老年人脑卒中发生的措施,有效干预影响脑卒中发病的不良生活习惯等因素,提高社区医疗中心的服务功能,有利于全面降低中老年人脑卒中发病率、致死率及致残率,提高中老年人的生活质量。

流式细胞术检测SLE患者甲强龙冲击前、后淋巴细胞亚群的变化

系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫性疾病,累及多器官系统,临床表现复杂,病程迁延反复,已证实SLE患者存在免疫功能紊乱.应用大剂量甲基强的松龙(甲强龙)冲击治疗SLE获得较理想效果[1].本文应用流式细胞仪(FCM)观察SLE患者使用甲强龙冲击前及冲击后第3天、第10天外周血淋巴细胞表型,了解其T淋巴细胞、B淋巴细胞及NK细胞的变化.探讨冲击疗法对SLE患者免疫细胞及免疫功能的影响.

染色体R显带和FISH技术在慢性淋巴细胞白血病诊断中的价值

慢性淋巴细胞白血病（CLL）是低度恶性的淋巴细胞增殖性疾病。95%的CLL为B细胞克隆性增殖,T细胞表型的CLL仅占5%。由于CLL的白血病细胞有丝分裂活性低下,采用不加丝裂原或植物血凝素（PHA）刺激的骨髓细胞培养大多显示正常核型,因此常规细胞遗传学（conventional cytogenetics,CC）R显带分析方法不能完全准确地反映核型状况。

脐带间充质干细胞移植对胶原诱导型关节炎大鼠炎性趋化因子表达的影响

目的观察脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSC)移植对胶原诱导型关节炎(collagen typeⅡ-induced arthritis,CIA)大鼠模型血清中:血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、内皮细胞生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的影响,初步探讨UC-MSC移植对CIA大鼠炎性趋化因子的调节作用。方法采用鸡Ⅱ型胶原加完全弗氏佐剂建立CIA大鼠模型,经大鼠尾静脉注射UC-MSC;以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠干预前后血清VCAM-1、SDF-1、VEGF、TNF-α水平变化。结果模型组血清VCAM-1、SDF-1、VEGF、TNF-α水平均明显高于同期空白对照组(P<0.05);经UC-MSC治疗组上述炎症因子水平逐渐降低,至第5周上述指标均接近空白对照组(P<0.05)。结论 CIA大鼠存在免疫功能紊乱,其炎症趋化因子水平显著增高;UC-MSC能下调CIA大鼠炎症趋化因子水平,减轻机体免疫性炎症反应,促进疾病缓解,改善预后。

成功治疗不典型移植相关血栓性微血管病1例附文献复习

目的观察异基因造血干细胞移植后血栓性微血管病的临床特征,探讨早期诊断指标,以便及早诊断和治疗。方法回顾性分析1例急性白血病患者,接受同胞全相合异基因造血干细胞移植后并发血栓性微血管病的临床表现及治疗转归。结果该患者出现神经系统症状、黄疸、贫血、肾损害,乳酸脱氢酶、D-D聚体升高,诊断血栓性微血管病,停用环孢素、他克莫司,给予大剂量甲强龙联合血浆置换,治疗后病情稳定。结论血栓性微血管病是异基因造血干细胞移植后严重并发症,及早诊断和治疗能改善预后。

白血病患者免疫表型与血管内皮细胞生长因子受体的关系

目的:探讨血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)与白血病患者免疫表型的关系及作用机制。方法:对39例初发或复发的白血病患者和6例无血液系统及其他系统恶性肿瘤患者,采用流式细胞仪测定免疫表型及VEGFR阳性表达。结果:39例白血病患者中32例VEGFR阳性表达,其表型阳性占82．1％。各组单个核细胞VEGFR表达阳性率分别为:髓系白血病组(56．03±20．00)％;淋系白血病组(90．61±11．81)％;髓系抗原表达的淋系白血病组(91．66±1．63)％;淋系抗原表达的髓系白血病组(66．99±33．94)％;杂合型白血病组66．47％;6例对照组(17．46±3．96)％。VEGFR阳性表达率>90％高表达的14例白血病患者中有9例均单纯表达淋系抗原,表达髓系的有4例。结论:血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体可能通过自分泌和(或)旁分泌机制参与白血病的发生发展。因此,对VEGFR高表达患者选用干扰VEGF和VEGFR信号途径的药物治疗,可能提高缓解率,延长患者生存期。

恶性淋巴瘤伴获得性循环抗凝物质增多1例报道

1 病例 患者男性,57岁,因＂反复发热伴左上腹胀10月余＂于2009年5月4日收住入院.患者入院前10月即出现发热,呈间歇性发作,伴有左上腹胀,入院半月前再次发热,检查发现脾脏肿大,无消瘦,无咳嗽咳痰,无皮肤紫癜,无牙龈出血,无鼻出血,无血尿及便血.年幼时曾患＂疟疾＂,否认高血压、糖尿病史,无手术外伤史,无长期特殊用药史.体格检查：T 37℃,P 85次/min,R 22次/min,BP 125/75 mmHg,神清,发育正常,轻度贫血貌,全身皮肤黏膜无瘀点瘀斑,左侧腋窝可及一枚蚕豆大小的淋巴结,双侧腹股沟可扪及黄豆大小淋巴结,质中,活动度好,无压痛.

多参数MFC和WT-1基因表达评估急性白血病MRD疗效和疾病预后意义

目的采用多参数流式细胞术(MFC)检测细胞膜表面标记和实时荧光定量(qPCR)术检测WT-1基因表达,评估急性白血病治疗后微小残留病灶(MRD)水平及对预后影响。方法 收集2018-2020年诊断的急性白血病患者52例,女性32例,男性20例,平均年龄53岁(年龄分布14~76岁),其中ANLL 43例,ALL 9例,分为初诊组、化疗组、缓解组。MFC监测MRD>0.1% 为阳性分为MRD阴性组及阳性组,以WT-1中位数为界,分为WT-1高表达组(WT-1>0.59%)和低表达组(WT-1%0.59%)。结果 1. 初诊时所有患者原幼细胞数及WT-1表达明显增高。经1/2疗程化疗后45例获缓解(CR),7例未缓解(NR),缓解组MRD及WT-1 表达显著低于未缓解组。2. 缓解组有23例随访1年后其MRD及WT-1显著升高伴疾病复发,MRD水平与WT-1表达两者呈正相关;3. MRD阳性及WT-1均高表达组复发率高达63.33%(n19/30)。MRD阴性及WT-1高表达组复发率为37.50%(n3/8)。MRD阳性及WT-1低表达组复发率为20%(n1/5)。MRD阴性及WT-1低表达者无复发为2例;4. MRD及WT-1表达水平与年龄、性别、初诊时WBC水平以及疾病类型等一般生物学信息无显著相关性(P>0.05)。结论 1. 同时监测MRD水平及WT-1表达对AL患者疗效评估和预后有意义;2. MRD及WT-1表达水平与年龄、性别、初诊时原始细胞水平、外周血WBC数和白血病类型等生物学信息无相关性。