全反式维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病过程血脂变化的研究

目的:探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)治疗急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)过程中血脂含量的变化及可能机制。方法:回顾分析了76例APL患者行ATRA诱导分化治疗过程中血脂水平变化的情况,并同时检测了NB4细胞行ATRA诱导分化过程中培养液上清中血脂水平的变化,以肝癌细胞HepG2和培养液为对照。结果:76例APL患者行ATRA治疗后2周行血清甘油三酯(triglyceride,TG)水平检测,结果显示TG水平较治疗前明显升高(P<0.01),而胆固醇(cholesterol,TC)水平则治疗前后差异无统计学意义。NB4细胞培养72h后培养液上清中TG水平明显升高(P<0.05),NB4细胞在ATRA(0.5μmol/L)作用0、24、48和72h后,培养液上清中TG水平逐渐升高(P<0.01),同样2组细胞培养0,24,48,72h后,培养液上清中TC水平经检测,水平变化差异无统计学意义。HepG2细胞及HepG2细胞在ATRA(0.5μmol/L)培养0、24、48和72h后培养液上清中TG及TC水均无明显变化。结论:ATRA治疗APL过程中可引起高甘油三酯血症,可能与APL细胞代谢有关。

1例伴有t(9;22)和ins(3;8)的慢性粒细胞白血病的临床和实验研究

目的报道1例伴有ins(3;8)的慢性粒细胞白血病(CML)病例及其3号、8号全染色体涂染、双色间期荧光原位杂交(FISH)、实时荧光定量PCR研究结果。方法骨髓细胞经直接法或24 h短期培养法制备染色体标本,R显带技术进行核型分析;3号、8号全染色体涂染探针进行染色体涂染;bcr/abl双色双融合探针进行FISH分析;实时荧光定量PCR检测bcr/abl融合基因转录本及其拷贝数。结果骨髓细胞R显带核型分析提示,除t(9;22)外,所有细胞伴ins(3;8);全染色体涂染证实3号染色体上插入一段8号来源的染色体片段;双色FISH检测到bcr/abl基因重排;实时荧光定量PCR检测到bcr/abl融合基因(b3a2)转录本。结论ins(3;8)是CML患者罕见的附加染色体异常;全染色体涂染是明确染色体插入易位的可靠手段。

急性白血病中MDR1 MRP和bcl-2基因表达及其临床意义

目的:研究多药耐药基因(MDR1)、多药耐药相关蛋白基因(MRP)和调控细胞凋亡有重要作用的基因(bcl-2)在急性白血病(AL)中的表达以及它们与临床耐药之间的关系。方法:采用地高辛掺入的半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及常规RT-PCR方法检测了54例急性白血病患者和10例正常人骨髓单核细胞中基因的表达情况。结果:54例AL中MDR1/MRP/bcl-2三基因表达阳性率为16.7%(9/54),MDR1/MRP/bcl-2三基因表达均阴性,发生频率为46.3%(25/54)。46例资料完整的白血病患者中三基因表达均阴性者80.0%缓解(CR),MDR1/MRP或MDR1/MRP/bcl-2共表达者无1人CR(P<0.01)。单基因分析表明MDR1、MRP、bcl-2基因表达阳性率分别为28.3%、41.3%和47.8%,其中MDR1阳性者CR率7.7%,明显低于MDR1阴性者CR率72.7%(P<0.01);MRP阳性CR率21.1%,明显低于阴性CR率77.8%(P<0.01);bcl-2阳性CR率36.4%,亦低于阴性CR率70.8%(P<0.05)。结论:MDR1/MRP或MDR1/MRP/bcl-2共表达的患者不易获得CR,白血病患者的耐药除了与MDR1高表达密切相关外,还与非P-糖蛋白(P-gp)介导的MRP及bcl-2表达等因素相关。

CYP3A5基因多态性与儿童急性白血病的相关性研究

细胞色素P450-3A5（cytochrome P450，CYP3A5）是CYP3A家族的一个亚型，有报道^[1]急性白血病与CYP3A的基因多态性相关，其基因型及等位基因频率对急性白血病的诊断、治疗、预测预后有重要作用。对2005年10月-2006年9月在我院住院的112例儿童急性白血病患者进行与CYP3A5基因6986位点的基因多态性相关性研究。

Runx3基因启动子甲基化与儿童急性白血病关系的研究

目的研究Runx3基因启动子甲基化与儿童急性白血病(AL)的关系,探讨其在儿童AL发生发展中的生物学意义。方法82例白血病骨髓标本取自苏州大学附属儿童医院2005年1月至2007年2月收治的AL患儿,应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)分析AL患儿和16例对照组儿童及白血病细胞株HL60、MOLT4、Jurkat、U937的Runx3基因甲基化状态,并用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测各系Runx3基因的表达情况。结果对照组未检测检测到甲基化,而检测到该基因的表达;白血病细胞株均出现甲基化和非甲基化带,呈部分甲基化状态;82例AL患儿Runx3基因甲基化的出现率为39.0%,高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其中急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿为41.4%,急性髓系白血病(AML)患儿为33.3%,两者之间差异无统计学意义;存在Runx3启动子甲基化患儿首次化疗后完全缓解率低于未甲基化者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Runx3基因启动子甲基化在AL的发病机制中起一定的作用,其检测对估计白血病预后具有临床意义。

RNA干扰对乳腺癌MCF-7细胞株WT1基因表达的抑制作用

目的:为探索治疗乳腺癌新途径,研究RNA干扰(RNA interferance,RNAi)对MCF-7细胞株WT1基因表达的抑制作用。方法:设计制备多对针对WT1基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染MCF-7细胞,采用实时定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RQ-PCR)法测定WT1 mRNA的表达,westernblot测定WT1蛋白的表达,流式细胞仪检测加入长春新碱后的MCF-7细胞凋亡率。结果:siRNA能有效抑制WT1基因的表达,但不呈剂量关系,在较低浓度可维持RNAi至少4d时间,WT1基因表达下调的MCF-7细胞凋亡率增加。结论:RNAi能有效抑制MCF-7细胞中WT1基因的表达,同时转染siRNA后细胞对长春新碱敏感。

CYP3A5基因在急性白血病儿童中的表达及临床意义

目的CYP3A5参与多种常用化疗药物的代谢反应。目前对于CYP3A5基因参与急性白血病的研究主要限于细胞系的体外研究。该文通过检测急性白血病患儿CYP3A5-6986位点的基因型分布特点和基因表达水平,探讨其基因表达水平对白血病患者治疗、预后评价的意义。方法①应用聚合酶链-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)及PCR产物序列测定,检测66例初治急性白血病患儿和20例对照儿童的CYP3A5-6986位点基因型分布;②实时定量PCR法检测病例组及对照组儿童骨髓单核细胞内wt-CYP3A5和SV1-CYP3A5 mRNA的表达水平。结果①对照组和急性白血病儿童CYP3A5-6986多态性位点存在野生型(CYP3A5*1/*1)、杂合突变型(CYP3A5*1/*3)、纯合突变型(CYP3A5*3/*3)3种基因型;②66例初治急性白血病患儿按基因型分组后对其mRNA表达水平进行检测,3组间的wt-CYP3A5 mRNA差异有显著性意义(P<0.05);③ALL组wt-CYP3A5 mRNA低表达者第1次化疗后的缓解率高于wt-CYP3A5 mRNA高表达者,两者比较差异有显著性意义(P<0.05);④对两例急性淋巴细胞性白血病患儿的CYP3A5 mRNA表达水平动态监测显示,1例复发前wt-CYP3A5 mRNA表达水平较缓解时升高。另1例wt-CYP3A5 mRNA表达一直处于较低水平,患儿目前仍处于缓解状态。结论wt-CYP3A5mRNA表达与白血病患儿的化疗疗效及预后密切相关,动态监测wt-CYP3A5 mRNA表达水平变化有助于判断病情变化。

自然杀伤细胞在急性髓系白血病中的临床应用

自然杀伤（NK）细胞表达许多活化或抑制性受体，这些受体与主要组织相容性复合物分子结合，从而调节免疫反应，赋予NK细胞识别靶细胞的能力。NK细胞介导的细胞毒性反应是由细胞表面抑制性或激活性受体产生信号来调节的。异基因造血干细胞移植中，供受者之间杀伤细胞免疫球蛋白样受体配体错配引发的异体反应性NK细胞活性可以防止白血病细胞复发。本文主要阐述NK细胞的细胞毒性、其介导的抗白血病效应，以及同种异体NK细胞输注治疗急性髓系白血病的临床应用前景。